高效液相色譜鑒別糖胺聚糖種類方法的建立和其應用.pdf文檔全文免費閱讀、在
本文關鍵詞:高效液相色譜鑒別糖胺聚糖種類方法的建立及其應用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
萬方數據
萬方數據 高效液相色譜鑒別糖胺聚糖種類方法的建立及其應用 摘要 本文利用反相高效液相色譜法建立了糖胺聚糖 glycosaminoglycans, GAGs 種類的鑒別方法。根據糖胺聚糖及其衍生物不同結構類型的單糖組成不同,采用 柱前衍生反相高效液相色譜法 reversed phase-high performance liquid chromatography, RP-HPLC 實現(xiàn)了甘露糖 mannose, Man 、葡萄糖胺 glucosamine, GlcN 、甘露糖胺 mannosamine, ManN 、半乳糖胺 galactosamine, GalN 、葡萄糖醛酸 glucouronic acid, GlcA 、艾杜糖醛酸 iduronic acid, IdoA 、 半乳糖醛酸 galacturonic acid, GalA 、葡萄糖 glucose, Glc 、半乳糖 galactose, Gal 和木糖 xylose, Xyl 單糖標準品混合物在C18 柱上的有效分離;利用不同 類型糖胺聚糖不完全酸水解產物中耐酸水解二糖結構不同,實現(xiàn)了對肝素/硫酸 乙酰肝素 heparin/heparan sulfate, Hp/HS 、硫酸軟骨素/硫酸皮膚素 chondroitin sulfate/dermatan sulfate, CS/DS 和透明質酸 hyaluronic acid, HA 的鑒別。所建 立的方法成功用于依諾肝素鈉中GlcN 和ManN 摩爾比及海洋魚鰓組織中雜合硫 酸軟骨素的分析測定,為低分子肝素的質量控制和海洋生物中復雜GAGs 的結構 類型鑒別提供了新的途徑。 本文第一部分應用RP-HPLC 建立了GAGs 種類鑒別方法。首先,在實驗室 前期工作的基礎上,對柱前衍生RP-HPLC 方法的分離條件進行了優(yōu)化,確定了 適于Man 、GlcN、ManN 、GalN、GlcA、IdoA 、GalA、Glc、Gal 和Xyl 單糖標 準品同時分離的最佳條件,,即在柱溫30 ℃和流速1.0 mL/min 下,以流動相0.1 mol/L 磷酸鹽緩沖液 pH 6.0 C 乙腈先在85 : 15 v : v 下洗脫25 min ,再在83 : 17 比例下洗脫25 min 。該方法從單糖組成的角度實現(xiàn)了對不同種類GAGs 的鑒 別。在此基礎之上,對GAGs 不完全酸水解產物進行分析,發(fā)現(xiàn)了可以
本文關鍵詞:高效液相色譜鑒別糖胺聚糖種類方法的建立及其應用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:90336
本文鏈接:http://www.sikaile.net/zhongyixuelunwen/90336.html