發(fā)布時間：2017-08-31 02:16

  本文關鍵詞：基于組效關系的壯藥巖黃連抑制HSC-T6細胞增殖活性成分辨識研究

  更多相關文章： 巖黃連 組效關系 大鼠肝星狀細胞(HSC-T) 抗纖維化 脫氫卡維丁 巴馬汀 小檗堿

【摘要】：目的建立巖黃連提取物的化學成分與其抑制大鼠肝星狀細胞(HSC-T6)作用的組效關系模型,尋找與藥效顯著相關的活性成分。方法采用正交設計法提取得到9個巖黃連提取物,通過HPLC法對巖黃連提取物進行成分表征,以共有峰的相對峰面積來表征其相對質量分數(shù);MTT法測定巖黃連提取物抑制HSC-T6細胞增殖活性,以抑制率為評價指標;利用SIMCA-P11.5軟件的正交投影偏最小二乘法(OPLS)分析,研究共有峰與藥效的相關性,根據(jù)S-載荷圖與變異權重參數(shù)(VIP)值辨識顯著活性成分;通過MTT法及流式細胞儀驗證所篩選成分的活性。采用細胞乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒觀察所篩選成分對人正常肝細胞(HL-7702)LDH活性的影響。結果 HPLC法對9個巖黃連提取物進行表征分析結果確定了21個共有峰,其中19、18、13、20、14和16號共有峰(VIP1)與巖黃連抑制HSC-T6細胞增殖活性顯著相關,并鑒定18、19和20號共有峰代表的化合物分別為脫氫卡維丁、巴馬汀和小檗堿。MTT結果顯示不同質量濃度脫氫卡維丁、巴馬汀及小檗堿對HSC-T6細胞增殖具有明顯抑制作用;流式細胞術檢測結果也與MTT結果一致,脫氫卡維丁、巴馬汀及小檗堿(0.10 mg/m L)處理HSC-T6細胞后的凋亡率分別為42.12%、42.22%、36.73%,明顯高于對照組的1.69%(P0.01)。細胞毒性實驗發(fā)現(xiàn)當脫氫卡維丁終質量濃度低于0.15 mg/m L,巴馬汀與小檗堿終質量濃度低于0.10 mg/m L時,對HL-7702細胞不具有明顯的細胞毒作用。結論通過組效關系研究首次發(fā)現(xiàn)巖黃連提取物中脫氫卡維丁、巴馬汀與小檗堿在體外能顯著抑制HSC-T6細胞增殖并誘導其凋亡,且在有效質量濃度下不具有明顯的細胞毒作用,表明這3種化學成分極有可能是巖黃連抗肝纖維化作用的潛在活性成分且在應用中具備一定的安全性;同時也提示基于組效關系的研究思路可為天然植物藥活性成分的辨識提供行之有效的方法。
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學藥學院;廣西醫(yī)科大學醫(yī)學科學實驗中心;
【關鍵詞】： 巖黃連 組效關系 大鼠肝星狀細胞(HSC-T) 抗纖維化 脫氫卡維丁 巴馬汀 小檗堿
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81560626) 廣西自然科學基金面上項目(2013GXNSFAA019161)
【分類號】：R29
【正文快照】： 巖黃連Corydalis saxicola Bunting為罌粟科紫堇屬多年生草本植物,被收載于《廣西中藥材標準》,主要生長在桂西北以及云貴南部山區(qū),其性涼、味苦,具有清熱解毒、消腫、利濕、止痛、止血等功效[1-3]。在壯族民間,其已成為用于治療肝炎、肝硬化和肝癌等疾病的常用藥材。目前已研

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本文編號：762858