維藥鐵線蕨總黃酮的提
本文關(guān)鍵詞:維藥鐵線蕨總黃酮的提取、純化及藥效學(xué)研究
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【摘要】:目的:本文以維藥常用藥材鐵線蕨為研究對(duì)象,建立鐵線蕨總黃酮的定性鑒別和定量測(cè)定方法,并優(yōu)選聚酰胺樹脂純化鐵線蕨總黃酮的工藝條件;對(duì)純化后的鐵線蕨總黃酮進(jìn)行急性毒性及抗炎、鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用研究,評(píng)價(jià)其安全性并對(duì)其藥效學(xué)進(jìn)行初探,從而為鐵線蕨藥材的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。方法:1.采用顯色反應(yīng)和薄層色譜法對(duì)鐵線蕨提取液進(jìn)行定性鑒別,并對(duì)其進(jìn)行方法學(xué)考察2.以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,以NaNO2-AI(NO3)3-NaOH為顯色劑,采用紫外-分光光度法建立鐵線蕨總黃酮的含量測(cè)定方法,并對(duì)其進(jìn)行方法學(xué)考察;比較四種提取方法的提取率,從中選擇提取率高、適合工業(yè)化生產(chǎn)的一種,以總黃酮浸出量為指標(biāo),通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定鐵線蕨總黃酮的最佳提取工藝條件。3.聯(lián)合應(yīng)用大孔樹脂-聚酰胺樹脂,以總黃酮含量為指標(biāo),研究聚酰胺樹脂對(duì)鐵線蕨總黃酮的吸附和洗脫行為,篩選出最優(yōu)純化工藝參數(shù)。4.按最大給藥量法進(jìn)行急性毒性研究,評(píng)價(jià)其安全性。5.采用小鼠耳廓二甲苯致炎法、小鼠氨水引咳法、小鼠氣管酚紅排泌法、整體動(dòng)物藥物引喘法,考察鐵線蕨總黃酮的抗炎、鎮(zhèn)咳、祛痰及平喘作用。結(jié)果:1.當(dāng)以乙酸乙酯:甲酸:水(10:1.5:1.5)為展開劑時(shí),鐵線蕨中的蘆丁能被檢視,斑點(diǎn)清晰、分離度好。2.紫外分光光度含量測(cè)定方法的線性范圍為A=11.414C+0.0015,r=0.9997,加樣回收率為98.77%。鐵線蕨總黃酮的最佳提取工藝條件為:鐵線蕨粗粉按照料液比1:25加入50%乙醇在80℃水浴中回流加熱2.0小時(shí),濾渣重復(fù)提取2次。方差分析結(jié)果表明,影響鐵線蕨總黃酮提取的因素依次為提取時(shí)間(h),提取溫度(℃),料液比(g·mL-1)和乙醇濃度(%)。3.鐵線蕨總黃酮的最佳純化工藝為:選用60-100目聚酰胺樹脂,上樣量為24.8331 mg·g-1,上樣液質(zhì)量濃度為5.4126 mg·mL-1,吸附及洗脫流速均為1.0 mL·min-1,先依次加3BV蒸餾水和3BV 10%乙醇洗脫除雜,再加6BV 70%乙醇洗脫,收集第2-6BV洗脫液。總黃酮純度由原來的3.14%提高至51.01%。4.急性毒性實(shí)驗(yàn)中未出現(xiàn)任何中毒反應(yīng)及死亡,小鼠口服鐵線蕨總黃酮最大給藥量為40 g·kg-1,相當(dāng)于60 kg體質(zhì)量成人臨床生藥日用量的160倍。5.與空白對(duì)照組比,鐵線蕨總黃酮能顯著抑制小鼠耳廓腫脹(P㩳0.05);能延長小鼠咳嗽潛伏期(P㩳0.05)并減少咳嗽次數(shù)(P㩳0.05);促進(jìn)小鼠氣管酚紅分泌量(P㩳0.05);延長豚鼠哮喘潛伏期(P㩳0.05)。結(jié)論:所建立的定性鑒別和定量測(cè)定方法簡便、專屬性強(qiáng),能初步確定鐵線蕨粗提物中含有黃酮類化合物。鐵線蕨總黃酮的提取、純化工藝效果好、操作簡單,有效成分的純度達(dá)到51.01%。鐵線蕨總黃酮口服急性毒性小,安全性高,具有良好的抗炎、鎮(zhèn)咳、祛痰及平喘作用。
【關(guān)鍵詞】:鐵線蕨總黃酮 提取 純化 抗炎 平喘
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R29
【目錄】:
- 摘要8-10
- ABSTRACT10-12
- 前言12-14
- 研究內(nèi)容與方法14-26
- 1. 鐵線蕨總黃酮的定性分析14-15
- 1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器14
- 1.2 方法與內(nèi)容14-15
- 2. 鐵線蕨總黃酮提取工藝研究及含量測(cè)定15-18
- 2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器16
- 2.2 方法與內(nèi)容16-18
- 3. 鐵線蕨總黃酮純化工藝研究18-21
- 3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器19
- 3.2 方法與內(nèi)容19-21
- 4. 鐵線蕨總黃酮急性毒性研究21-23
- 4.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器21-22
- 4.2 方法與內(nèi)容22-23
- 5. 鐵線蕨總黃酮藥效學(xué)研究23-26
- 5.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器23-24
- 5.2 方法與內(nèi)容24-26
- 結(jié)果26-48
- 討論48-53
- 小結(jié)53-54
- 致謝54-55
- 參考文獻(xiàn)55-59
- 綜述59-67
- 參考文獻(xiàn)64-67
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文67-68
- 導(dǎo)師評(píng)閱表68
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,本文編號(hào):691034
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