目的:應(yīng)用辛開苦降法代表方劑喂養(yǎng)大鼠提取含藥血清,以脂多糖（LPS）損傷Caco-2細(xì)胞的方式模擬潰瘍性結(jié)腸炎（UC）模型。通過細(xì)胞活力,免疫熒光、Western blot等方法檢測蛋白表達(dá),探索辛開苦降法治療潰瘍性結(jié)腸炎細(xì)胞的作用機(jī)制。方法:以Caco-2細(xì)胞作為研究對象,采用脂多糖（LPS）制作細(xì)胞炎癥模型。將20只WB大鼠分為:空白組、西藥對照組（即柳氮磺吡啶組）、烏梅丸方藥組、半夏瀉心湯方藥組、甘草瀉心湯方藥組。正常組給予飲水、進(jìn)食,不給予任何藥物、其余組給予柳氮磺吡啶、烏梅丸方藥、半夏瀉心湯方藥、甘草瀉心湯方藥,連續(xù)給藥7天。禁食禁水,提取血清。Caco-2細(xì)胞用脂多糖造模,用CCK-8檢測細(xì)胞活力,選擇最佳時(shí)間、最佳脂多糖（LPS）濃度后,同時(shí)給予含藥血清,細(xì)胞分組為正常組、模型組、西藥對照組（柳氮磺吡啶）、烏梅丸方藥組、半夏瀉心湯方藥組、甘草瀉心湯方藥組。（1）用CCK-8檢測細(xì)胞活力;（2）用免疫熒光法檢測細(xì)胞TLR4/NF-κBp65蛋白的表達(dá)。（3）用Western blot法檢測細(xì)胞中TLR4/NF-κBp65/IKB蛋白表達(dá)高低。結(jié)果:（1）細(xì)胞活力:相較于正常... 

【文章來源】：長春中醫(yī)藥大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)胞計(jì)數(shù)示意圖

各組Caco-2細(xì)胞中TLR4表達(dá)比較

圖 5 各組 Caco-2 細(xì)胞中 NF-κB-P65 表達(dá)比較 小結(jié)本章實(shí)驗(yàn)用脂多糖（LPS）誘導(dǎo) Caco-2 細(xì)胞炎癥模型，應(yīng)用辛開苦降法代方劑烏梅丸、半夏瀉心湯和甘草瀉心湯喂養(yǎng)大鼠 7 天后，分別提取血清后進(jìn)行組干預(yù)潰瘍性結(jié)腸炎細(xì)胞模型，用免疫熒光檢測 TLR4/NF-κBp65 蛋白表達(dá)情。結(jié)果：與正常組相比較模型組 TLR4 NF-κBp65 蛋白表達(dá)較強(qiáng)，與模型組相對照組 TLR4 NF-κBp65 蛋白表達(dá)降低，辛開苦降法代表方劑組 TLR4 蛋白表也有不同程度的降低。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3076113