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基于病證結(jié)合探討血瘀證糖尿病腎病大鼠腎損害與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的關(guān)系

發(fā)布時(shí)間:2020-11-18 05:39
   目的:觀察血瘀證對(duì)糖尿病腎病(DKD)大鼠的腎損害以及對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)的影響,探討DKD血瘀證大鼠腎損害與ERS之間的關(guān)系。方法:選用50只SPF級(jí)雄性SD大鼠,用高脂高糖飼料聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)方法建立DKD大鼠模型。隨機(jī)分為正常組、糖尿病組、糖尿病+血瘀證組,其中糖尿病+血瘀證組(0.05 mg·kg-1)采用右旋糖酐法制備。觀察各組大鼠一般情況、血液流變學(xué)指標(biāo),24 h尿蛋白含量、肌酐、腎臟病理學(xué)變化;免疫組化、蛋白免疫印跡法(Western blot)和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)檢測(cè)腎組織ERS相關(guān)蛋白葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78),活化轉(zhuǎn)錄因子6(ATF6)和腎臟纖維化指標(biāo)纖維連接蛋白(FN),α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的mRNA及蛋白表達(dá)。結(jié)果:與正常組比較,糖尿病組大鼠出現(xiàn)多飲多食多尿、體質(zhì)量減輕,血液流變學(xué)指標(biāo)全血黏度和血漿黏度均明顯升高(P0.05,P0.01),24 h尿蛋白含量、肌酐、尿素氮顯著上升(P0.01),腎臟病理加重,腎組織的GRP78,ATF6,FN和α-SMA的mRAN及蛋白表達(dá)明顯升高(P0.05,P0.01);經(jīng)過(guò)右旋糖酐法制備血瘀證模型后,糖尿病+血瘀證組大鼠死亡率增加,體征變化較糖尿病組更加明顯,全血黏度、血漿黏度,24 h尿蛋白含量、肌酐、尿素氮等較糖尿病組顯著升高(P0.01),同時(shí)病理改變較糖尿病組加重,腎組織的GRP78,ATF6,FN,α-SMA的mRNA及蛋白表達(dá)較糖尿病組明顯升高(P0.05,P0.01)。結(jié)論:在病證結(jié)合模型下,血瘀證可能明顯加重糖尿病腎病大鼠腎臟病理?yè)p害,且與增強(qiáng)糖尿病腎病大鼠腎臟組織的ERS有關(guān)。
【部分圖文】:

血瘀證,病理,糖尿病,腎小球


對(duì)大鼠腎組織切片進(jìn)行HE,Masson,PAS染色。其中正常組大鼠腎小管、腎小球無(wú)病理變化,腎臟組織正常。HE染色中,與正常組比較,糖尿病組大鼠出現(xiàn)系膜基質(zhì)增生、基底膜增厚和腎小球萎縮,細(xì)胞外基質(zhì)可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn);糖尿病+血瘀證組較糖尿病組整體加重,見(jiàn)圖1。Masson染色中,與正常組比較,糖尿病組可見(jiàn)藍(lán)色膠原物沉積,腎小球中可見(jiàn)細(xì)胞增生及膠原纖維,腎間質(zhì)纖維化,腎小球毛細(xì)血管管壁顯著增厚,腎小球系膜、基底膜可見(jiàn)紫紅色物質(zhì)沉積;與糖尿病組比較,糖尿病+血瘀證組則顏色沉積更為明顯,纖維化表現(xiàn)更重,見(jiàn)圖2。PAS染色中,與正常組比較,糖尿病組大鼠腎小球系膜、基底膜以及腎小管均可見(jiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),呈紫紅色,病變程度較為嚴(yán)重;與糖尿病組比較,糖尿病+血瘀證組大鼠腎小球系膜、基底膜以及腎小管均可見(jiàn)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),紫紅色分布較多,同時(shí)近曲小管擴(kuò)張,管腔變大,表明有大量糖原物質(zhì)積累,見(jiàn)圖3。圖2 血瘀證對(duì)大鼠腎組織病理的影響(Masson,×400)

血瘀證,病理


血瘀證對(duì)大鼠腎組織病理的影響(Masson,×400)

血瘀證,病理,蛋白


血瘀證對(duì)大鼠腎組織病理的影響(PAS,×400)
【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2888375

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