目的:研究蒙藥朱日很滴丸抗動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的作用及機(jī)制。方法:1蒙藥朱日很滴丸發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的研究。將60只日本大耳白兔適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機(jī)分為6組:溶媒對(duì)照組(Control)、模型組(Model)、朱日很滴丸高劑量組(HZRH,1160mg/kg)、朱日很滴丸中劑量(MZRH,367mg/kg)、朱日很滴丸低劑量組(LZRH,116mg/kg)、普羅布考組(Probucol,26mg/kg)。采用高脂飼料喂養(yǎng)結(jié)合牛血清白蛋白注射(250 mg/kg)的方法干預(yù)日本大耳白兔,建立AS動(dòng)物模型。第8周造模成功后,在模型組的喂養(yǎng)基礎(chǔ)上,朱日很滴丸組分別灌胃給予各劑量朱日很滴丸,每天一次,連續(xù)4周;普羅布考組灌胃給予普羅布考溶液,每天一次,連續(xù)4周;第12周處死。檢測以下指標(biāo):(1)造模期間的第1、2和7、8周測定兔攝食量變化,體質(zhì)量變化;(2)在造模開始至給藥過程中的第0、4、8、12周測定各組血清中總膽固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三脂(TG)及高密度脂蛋白(HDL)的含量;(3)通過油紅O染色法,觀察主動(dòng)脈斑塊覆蓋率;(4)通過蘇木素-伊紅(HE)染色觀察血管平滑肌增生及內(nèi)膜病理改變。2蒙藥朱日很滴丸抗氧化應(yīng)激作用的研究。(1)通過Elisa法測定方法“1”中第12周各組血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活力,丙二醛(MDA)、氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)的含量;(2)以氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)共孵育建立動(dòng)脈粥樣硬化血管內(nèi)皮損傷模型,同時(shí)給予朱日很滴丸含藥血清進(jìn)行干預(yù)。實(shí)驗(yàn)共分為7組:空白組(Control)、模型組(Model)、空白血清組(VSC)、朱日很滴丸高劑量含藥血清組(HZRHS)、朱日很滴丸中劑量含藥血清組(MZRHS)、朱日很滴丸低劑量含藥血清組(LZRHS)、維生素C對(duì)照組(Vit C)。(1)采用MTS法測定細(xì)胞存活率,確定ox-LDL損傷HUVEC所用的濃度與時(shí)間;(2)采用MTS法測定細(xì)胞存活率,考察ZRH含藥血清對(duì)HUVEC發(fā)揮保護(hù)作用時(shí)各劑量組的用量與作用時(shí)間;(3)采用MTS法測定細(xì)胞存活率,考察ZRH含藥血清各劑量對(duì)經(jīng)ox-LDL損傷的HUVEC保護(hù)作用;(4)采用流式細(xì)胞術(shù)分析ZRH含藥血清對(duì)經(jīng)ox-LDL損傷的HUVEC凋亡的影響;(5)采用流式細(xì)胞術(shù)分析ZRH含藥血清對(duì)經(jīng)ox-LDL損傷的HUVEC細(xì)胞周期的影響;(6)采用Elisa法檢測ZRH含藥血清對(duì)經(jīng)ox-LDL損傷的各組HUVEC中HO-1的表達(dá)量和SOD的活力。3蒙藥朱日很滴丸抗氧化應(yīng)激作用與Nrf2信號(hào)通路相關(guān)性的研究。對(duì)方法“2-(2)”中HUVEC做如下檢測:(1)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q PCR)法檢測HUVEC中Nrf2的m RNA水平;(2)采用蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測各組HUVEC中Nrf2蛋白的表達(dá)量;(3)采用蛋白免疫印跡法檢測HUVEC中細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核中Nrf2蛋白的表達(dá)量;(4)采用細(xì)胞免疫熒光法檢測各組HUVEC中Nrf2的核轉(zhuǎn)位情況;(5)加入Nrf2的干擾RNA(si RNA),采用MTS法檢測ZRH含藥血清對(duì)HUVEC存活率的影響,進(jìn)一步探討朱日很滴丸發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用與Nrf2信號(hào)通路的相關(guān)性。結(jié)果:1蒙藥朱日很滴丸發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的研究。(1)造模期間兔攝食量與體質(zhì)量變化:與Control組相比,Model組、ZRH各劑量組、Probucol組的攝食量顯著降低(P0.05),但其體質(zhì)量無明顯不同(P0.05)。(2)通過全自動(dòng)生化分析儀檢測0、4、8、12周各組兔血清中TG、CHOL、LDL、HDL的含量:于第8周時(shí),與Control組相比,Model組TG、CHOL、LDL均顯著升高(P0.01),表明兔動(dòng)脈粥樣硬化模型建立成功。于第12周ZRH組給藥結(jié)束后,與Model組相比,ZRH各劑量組血清中TG、LDL、CHOL的含量低于Model組,HDL的含量高于Model組,但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)通過油紅O染色法觀察主動(dòng)脈斑塊覆蓋率:與Model組相比,ZRH各劑量組主動(dòng)脈的斑塊覆蓋率顯著減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(4)通過HE染色觀察血管內(nèi)膜病理改變:與Model組相比,HZRH組細(xì)胞排列較整齊,平滑肌增生不太明顯,內(nèi)膜層泡沫細(xì)胞較少,病變較輕,MZRH、LZRH組相應(yīng)病變均有減輕。2蒙藥朱日很滴丸抗氧化應(yīng)激作用的研究。(1)通過Elisa法檢測AS模型兔血清中MDA、ox-LDL的含量和SOD的活力:與Model組相比,ZRH各劑量組血清中MDA的含量顯著降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(HZRH:P0.01,MZRH:P0.01,LZRH:P0.05);ox-LDL的含量顯著降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(HZRH:P0.01,MZRH:P0.01,LZRH:P0.05);SOD的活力顯著升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(2)(1)通過MTS法測定HUVEC活力,最終選用200μg/m L的ox-LDL作用于HUVEC 12h作為HUVEC最佳損傷條件。(2)通過MTS法測定HUVEC活力,最終選用20%的各劑量ZRHS孵育HUVEC 24h作為考察ZRHS對(duì)HUVEC保護(hù)作用的最佳條件。(3)通過MTS法測定HUVEC活力,與Model組相比,ZRH各劑量含藥血清組均能顯著提高細(xì)胞存活率(P0.01),且各組間呈劑量依賴性。(4)通過流式細(xì)胞術(shù)檢測ZRH含藥血清對(duì)受損HUVEC凋亡的影響:與Model組相比,ZRH各劑量含藥血清組均能顯著降低細(xì)胞凋亡率(HZRHS:P0.01,MZRHS:P0.05,LZRHS:P0.05),且各組間呈劑量依賴性。(5)通過流式細(xì)胞術(shù)檢測ZRH含藥血清對(duì)受損HUVEC周期的影響:與Model組相比,HZRHS組能顯著提高細(xì)胞中處于S+G2/M期細(xì)胞的比率,能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖(P0.01),MZRHS、LZRHS沒有顯著變化(P0.05)。(6)通過Elisa法檢測各組HUVEC中HO-1的表達(dá)量和SOD的活力:與Model組相比,ZRH各劑量含藥血清組均能顯著提高細(xì)胞中HO-1表達(dá)量、SOD的活力,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且各組間呈劑量依賴性。3蒙藥朱日很滴丸抗氧化應(yīng)激作用與Nrf2信號(hào)通路相關(guān)性的研究。(1)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q PCR)法檢測各組HUVEC中Nrf2的m RNA水平:與Model組相比,ZRH各劑量含藥血清組中m RNA水平顯著上升(P0.05),呈劑量依賴性。(2)通過蛋白免疫印跡法(western blot)檢測各組HUVEC中Nrf2蛋白的表達(dá)量:與Model組相比,ZRH各劑量含藥血清組細(xì)胞中Nrf2蛋白含量均顯著上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),呈劑量依賴性。(3)通過蛋白免疫印跡法(western blot)檢測各組HUVEC中細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核中Nrf2蛋白的表達(dá)量:與Model組相比,ZRH各劑量含藥血清組細(xì)胞質(zhì)中Nrf2蛋白含量顯著上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(HZRHS:P0.01,MZRHS:P0.01,LZRHS:P0.05),呈劑量依賴性;HUVEC細(xì)胞核中Nrf2蛋白含量顯著上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),呈劑量依賴性。(4)通過細(xì)胞免疫熒光法檢測各組HUVEC中Nrf2的核轉(zhuǎn)位情況:與Model組相比,ZRH各劑量含藥血清組細(xì)胞核中Nrf2表達(dá)量增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),呈劑量依賴性。(5)加入Nrf2的干擾RNA(si RNA),通過MTS法檢測ZRH含藥血清對(duì)HUVEC的保護(hù)作用:與Model組相比,si RNA+HZRHS、si RNA+MZRHS、si RNA+LZRHS組未能顯著提高細(xì)胞存活率(P0.05),表明朱日很滴丸主要通過調(diào)節(jié)Nrf2信號(hào)通路發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用。結(jié)論:蒙藥朱日很滴丸可能主要基于Nrf2信號(hào)通路發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用進(jìn)而表現(xiàn)出抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R29
【部分圖文】：
圖 1-1 血清中 TG、CHOL、LDL、HDL 的含量注：*與 Control 組相比,*p＜0.05,**p＜0.01;#與 Model 組相比,##p＜0.05.由表 1-2 和圖 1-1 可知，于第 8 周時(shí)，與 Control 組相比，Model 組血清中TG、LDL、CHOL 的含量均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。于第12 周朱日很滴丸組給藥結(jié)束后，與 Model 組相比，HZRH、MZRH、LZRH 組血清中 TG、LDL、CHOL 的含量降低，HDL 的含量升高，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；Probucol 組血清中 LDL、CHOL 的含量顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），TG 的含量降低，HDL 的含量升高，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。3.4 兔主動(dòng)脈油紅 O 染色及斑塊覆蓋率測定結(jié)果A
A:兔主動(dòng)脈油紅 O 染色 B：兔主動(dòng)脈斑塊覆蓋率注:*與 Control 組相比,**P＜0.01;#與 Model 組相比,##P＜0.01.圖 1-2 兔主動(dòng)脈斑塊覆蓋情況由圖 1-2 可知，與 Control 組相比，Model 組的斑塊覆蓋率顯著增加有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與 Model 組相比，HZRH、MZRH、LZRH 主斑塊覆蓋率顯著減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；Probucol 組主動(dòng)脈覆蓋率顯著減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。3.5 兔主動(dòng)脈的 HE 染色結(jié)果（40×）ControlModelProbucol
注:*與 Control 組相比,**P＜0.01;#與 Model 組相比,##P＜0.01.圖 1-2 兔主動(dòng)脈斑塊覆蓋情況由圖 1-2 可知，與 Control 組相比，Model 組的斑塊覆蓋率顯著增加，差有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與 Model 組相比，HZRH、MZRH、LZRH 主動(dòng)脈斑塊覆蓋率顯著減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；Probucol 組主動(dòng)脈的斑覆蓋率顯著減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。3.5 兔主動(dòng)脈的 HE 染色結(jié)果（40×）ControlModelProbucol
【相似文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 汪盈盈;柳繼鋒;;中藥滴丸研究進(jìn)展[J];產(chǎn)業(yè)與科技論壇;2017年12期
2 王丹丹;黃巧玲;吳曉云;何新軍;;我院2014-2015年麝香通心滴丸的用藥合理性評(píng)價(jià)[J];中國藥房;2017年23期
3 侯周林;劉燕;郭哲;徐夢(mèng);冀昂揚(yáng);楊波;;國內(nèi)實(shí)驗(yàn)用滴丸機(jī)研究綜述[J];新經(jīng)濟(jì);2016年Z1期
4 李娟;封士蘭;郭朝暉;;參橘止咳滴丸微生物限度檢查法的建立和最大耐受量實(shí)驗(yàn)[J];西部中醫(yī)藥;2015年02期
5 許瑞凌;;藿膽滴丸聯(lián)合頭孢米諾治療急性化膿性鼻竇炎58例療效觀察[J];襄陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年02期
6 吳思恩;李清明;曹火太;;咽立爽口含滴丸治療慢性咽炎的效果觀察[J];中國當(dāng)代醫(yī)藥;2015年20期
7 陳志磊;劉娜;;黃芩苷滴丸的制備及含量測定[J];數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志;2015年10期
8 韓德承;;治療婦女痛經(jīng) 試試玄歸滴丸[J];現(xiàn)代養(yǎng)生;2017年19期
9 胡瀚文;張學(xué)順;;緩釋滴丸研究概況[J];藥學(xué)研究;2013年07期
10 李金泉;;治咳川貝枇杷滴丸療效分析70例[J];繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育;2013年09期
相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條
1 周鴻;舒腦欣滴丸心腦血管保護(hù)作用和2型糖尿病干預(yù)作用研究[D];天津大學(xué);2017年
2 王建湘;舒冠滴丸對(duì)AS兔炎癥介質(zhì)的調(diào)節(jié)作用及治療不穩(wěn)定性心絞痛的臨床研究[D];湖南中醫(yī)學(xué)院;2004年
3 韓振蘊(yùn);清腦滴丸治療腔隙性腦梗死的臨床觀察及對(duì)腦缺血MARCKS磷酸化的調(diào)節(jié) [D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2004年
4 燕芳芳;芪參益氣滴丸對(duì)心肌梗死二級(jí)預(yù)防的作用及其機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2008年
5 董林毅;治咳川貝枇杷滴丸藥效物質(zhì)組學(xué)及作用機(jī)制的評(píng)價(jià)研究[D];天津大學(xué);2012年
6 韓育明;鵝冰舒冠滴丸對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞脂質(zhì)過氧化損傷保護(hù)作用研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2005年
7 朱曉靜;基于抗腫瘤活性組分篩選的西黃滴丸制劑工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2013年
8 彭彥卿;軟膠囊滴丸制藥生產(chǎn)過程的建模與優(yōu)化控制研究[D];廈門大學(xué);2009年
9 高紅梅;PDD1滴丸的藥代動(dòng)力學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2015年
10 林珊;基于PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路探討麝香通心滴丸抗心肌缺血的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2017年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條
1 常百金;人參發(fā)酵產(chǎn)物滴丸的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D];長春中醫(yī)藥大學(xué);2019年
2 吳宗珉;芪參益氣滴丸治療亞臨床甲狀腺功能減退癥的臨床研究[D];長春中醫(yī)藥大學(xué);2019年
3 鄒天;基于柔性板的滴丸機(jī)定型管內(nèi)液體流速測量技術(shù)研究[D];華中科技大學(xué);2019年
4 崔志鵬;滴丸機(jī)膠液粘度在線檢測系統(tǒng)設(shè)計(jì)[D];華中科技大學(xué);2019年
5 孫雨輝;基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討朱日亨滴丸治療大鼠急性心肌缺血再灌注損傷[D];內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué);2019年
6 郭俊英;蒙藥朱日很滴丸抗動(dòng)脈粥樣硬化作用及其與Nrf2信號(hào)通路相關(guān)性的研究[D];內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué);2019年
7 洪國君;瓜蔞滴丸的制備及其抗心肌缺血再灌注損傷作用機(jī)制的研究[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2019年
8 廖鵬達(dá);芪參益氣滴丸對(duì)急性心肌梗死PCI后心功能影響多中心研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年
9 李建;芪參益氣滴丸對(duì)急性心肌梗死患者治療作用觀察[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2018年
10 李燕偉;麝香通心滴丸對(duì)冠狀動(dòng)脈慢血流氣虛血瘀痰濁阻滯證患者血管內(nèi)皮保護(hù)作用的臨床研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2018年
本文編號(hào)：
2865172
