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針刺預處理對動脈粥樣硬化兔腹腔巨噬細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的影響

發(fā)布時間:2020-06-04 20:00
【摘要】:目的:通過觀察電針預處理對動脈粥樣硬化兔腹腔巨噬細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積情況的影響,揭示病理狀態(tài)下指標的變化及針刺后的變化情況,觀察針刺對AS兔巨噬細胞泡沫化的影響,探究針刺在預防動脈粥樣硬化中所發(fā)揮的作用機制。材料與方法:選取32只體重在2.5-3kg之間,成年健康雄性新西蘭大耳白兔。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機分為空白組7只(正常飼料喂養(yǎng));造模組19只(高脂飼料喂養(yǎng));電針預處理組6只(正常飼料+高脂飼料喂養(yǎng))?瞻捉M不施加干預因素,普通飼料喂養(yǎng)至實驗結(jié)束。造模組高脂飼料喂養(yǎng)4周后,行頸動脈球囊損傷術(shù)造模,術(shù)后繼續(xù)以高脂飼料喂養(yǎng)4周后,空白組與造模組每組隨機選取一只兔處死,取頸動脈切片,HE染色觀察確認造模是否成功。確認造模成功后,造模組隨機分組并進行干預:模型組不予任何治療;藥物組給予阿托伐他丁鈣片混懸液喂服,1mg/kg/d;電針組給予電針刺激“關(guān)元”、雙側(cè)“內(nèi)關(guān)”、雙側(cè)“足三里”,每日20min/次,每周針刺6天,休息1天,共治療4周;電針預處理組適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,預先治療3周,取穴及治療方法與電針組相同,預先干預結(jié)束后由普通飼料轉(zhuǎn)為高脂飼料喂養(yǎng),采用與造模組相同的方法復制模型,HE染色確認模型復制成功后電針治療4周。于實驗取材前3天,兔腹腔注射無菌淀粉。電針治療結(jié)束后,耳緣靜脈注入水合氯醛麻醉,取心臟血,處死后取頸總動脈組織,腹腔注射PBS輕柔腹部,收集腹腔液,離心收集腹腔巨噬細胞。檢測血脂TC/TG/LDL/HDL水平,HE染色評估兔動脈粥樣硬化血管內(nèi)壁斑塊形成及變化情況,油紅O染色觀察巨噬細胞形態(tài)學變化及脂質(zhì)蓄積情況,酶法檢測腹腔巨噬細胞內(nèi)總膽固醇(TC)、游離膽固醇(FC)、膽固醇酯(CE)含量并計算CE含量占TC含量的百分比,判斷巨噬細胞泡沫化程度。結(jié)果:1.血脂水平:與空白組相比,模型組兔血清TC、TG及LDL含量明顯升高,HDL含量有所下降,有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01);與模型組比較,電針治療組及電針預處理組兔血清TC、TG、LDL含量均有所降低,HDL含量升高,有統(tǒng)計學意義(P0.01);與藥物組相比,電針組和電針預處理組,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.頸動脈病理切片組織形態(tài)學HE染色結(jié)果:與空白組相比,模型組血管內(nèi)皮厚度增加,內(nèi)膜結(jié)構(gòu)損壞,組織纖維化,大量大小不一的泡沫細胞聚集出現(xiàn),大量炎性細胞浸潤,斑塊明顯;與模型組相比,電針組、電針預處理組內(nèi)膜略顯粗糙,增厚不明顯;與電針組相比,電針預處理組頸動脈內(nèi)膜雖然也表現(xiàn)出略有增厚且粗糙,但增厚度較小,泡沫細胞相對更為少量,斑塊面積縮小。3.巨噬細胞形態(tài)學油紅O染色結(jié)果:與空白組相比,模型組巨噬細胞內(nèi)染色較深,顏色明顯,可見染成紅色的大量的脂質(zhì)小顆粒的存在,胞核呈現(xiàn)藍色,符合泡沫細胞的形態(tài)學特征;與模型組相比,電針預處理組、電針組巨噬細胞內(nèi)的紅色小顆粒減少,含有脂滴的細胞數(shù)量減少;與電針組相比,電針預處理組含有紅色脂滴的細胞數(shù)更為少量。4.酶法檢測巨噬細胞內(nèi)膽固醇含量:與空白組相比,模型組膽固醇酯(CE)含量明顯增加,巨噬細胞泡沫化,二者差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與模型組相比,電針治療組、電針預處理組膽固醇酯(CE)的含量有所降低,泡沫細胞的形成率降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);與電針組相比,電針預處理組膽固醇酯(CE)含量與總膽固醇(TC)含量比值降低,有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:1.電針預處理關(guān)元、內(nèi)關(guān)、足三里穴能有效調(diào)節(jié)動脈粥樣硬化兔血脂水平,減緩動脈粥樣硬化的發(fā)生風險。2.電針預處理關(guān)元、內(nèi)關(guān)、足三里穴能有效保護血管內(nèi)皮,減少泡沫細胞的堆積,有效減少兔動脈粥樣硬化斑塊的形成。3.電針預處理關(guān)元、內(nèi)關(guān)、足三里穴能有效降低動脈粥樣硬化兔腹腔巨噬細胞內(nèi)膽固醇酯的含量,減少細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積,抑制巨噬細胞向泡沫細胞轉(zhuǎn)化,對動脈粥樣硬化具有預防和治療的作用。
【圖文】:

電針,泡沫細胞,增厚,平滑肌細胞


厚度明顯增加,可見大量泡沫細胞及紊亂排列的平滑肌細胞(圖 1.2),說明 AS 模型復制成功。根據(jù)圖1.3-1.6的治療后頸動脈HE染色結(jié)果顯示, 模型組鏡下可見內(nèi)膜嚴重損傷,動脈壁增厚, 尤以內(nèi)膜增厚為主, 可見大量積聚的泡沫細胞及紊亂排列的平滑肌細胞,有明顯粥樣斑塊(圖 1.3);與模型組相比,,電針預處理組、電針組及藥物組,形態(tài)學上變化明顯,管壁增厚情況有所改善,可見泡沫細胞浸潤減少, 斑塊面積有所減。慌c電針組相比,電針預處理組斑塊面積縮小。說明電針有抑制動脈粥樣斑塊形成的作用,且有一定預防作用。圖 1.3 模型組 圖 1.4 藥物組HE 染色(×400 倍)圖 1.1 空白組 圖 1.2 造模組HE 染色(×400 倍)

電針,泡沫細胞,增厚,動脈粥樣斑塊


根據(jù)圖1.3-1.6的治療后頸動脈HE染色結(jié)果顯示, 模型組鏡下可見內(nèi)膜嚴重損傷,動脈壁增厚, 尤以內(nèi)膜增厚為主, 可見大量積聚的泡沫細胞及紊亂排列的平滑肌細胞,有明顯粥樣斑塊(圖 1.3);與模型組相比,電針預處理組、電針組及藥物組,形態(tài)學上變化明顯,管壁增厚情況有所改善,可見泡沫細胞浸潤減少, 斑塊面積有所減。慌c電針組相比,電針預處理組斑塊面積縮小。說明電針有抑制動脈粥樣斑塊形成的作用,且有一定預防作用。圖 1.1 空白組 圖 1.2 造模組HE 染色(×400 倍)
【學位授予單位】:遼寧中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:R245

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本文編號:2696902

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