發(fā)布時間：2020-05-15 07:59

【摘要】：目的明確蒙藥藍盆花(Flos Scabiosa,FS)醇提物最大給藥量;研究藍盆花保肝藥效;探討藍盆花保肝藥效物質基礎,推測活性化學成分,篩選FS質量標記物(Q-marker)候選物。方法及結果(1)急性毒性試驗研究:采用經典的急性毒性試驗方法評價FS醇提物毒性情況,結果發(fā)現,在最大濃度最大體積給藥后小鼠未出現死亡;無法給出半數致死量(LD_(50)),可給出最大給藥量為198.88 g(生藥)/kg,等于成人臨床等效劑量的145.70倍,認為該劑量下FS醇提物無明顯毒性。(2)FS血清藥理學研究:采用FS血清藥理學評價方法,用H_2O_2誘導肝細胞氧化損傷模型,MTT法檢測不同時間點含藥血清對細胞存活率的影響,結果發(fā)現,除4hr,6 hr含藥血清外,其余時間點含藥血清組的肝細胞存活率均明顯升高(P0.001),其中1.5 hr含藥血清組細胞存活率最高,該項研究說明FS含藥血清對H_2O_2誘導的肝損傷細胞具有保護作用。(3)FS血清指紋圖譜的建立:采用HPLC-Q-Exactive MS建立血清指紋分析方法,以健康Wistar大鼠為供體,灌胃給藥,制備15個批次FS含藥血清,運用上述的分析方法建立含藥血清指紋圖譜,數據經預處理后,經SIMCA-P12.0進行模式識別,多維統(tǒng)計分析,經無監(jiān)督主成分分析(PCA)發(fā)現,與空白組比較,15個批次藥材聚集良好,說明FS共有模式下各個批次藥材之間相似度良好;采用系統(tǒng)聚類分析(HCA)將15批藥材血清指紋圖譜分為三類;通過相關文獻報道及標準品對照等方式,共確定18個入血原型成分。(4)基于“經時譜-效關系”探究FS保肝作用藥效物質基礎:基于血清藥理學結果及血清指紋圖譜分析方法,利用灰色關聯(lián)度法分析氧化損傷肝細胞存活率與不同時間點含藥血清各成分峰面積的相關性。結果表明,13種成分與保肝活性關聯(lián)度均大于0.75,說明這些成分均具有不同程度的保肝作用,其中關聯(lián)度大于0.8的成分有3,5-二咖啡�；鼘幩帷ο愣顾�、香葉木素、芹菜素、對羥基苯甲酸,推測這些成分可能表現出相對較高的保肝活性。(5)FS中13種成分在健康與急性肝損傷狀態(tài)下藥代動力學比較研究:將血清指紋圖譜分析方法應用于健康和CCL4致急性肝損傷大鼠給藥后13種成分的藥動學比較研究。實驗結果表明,急性肝損傷狀態(tài)下可顯著影響藍盆花各成分的體內吸收代謝過程,且不同成分藥動學參數變化趨勢有一定的差異性。與正常大鼠比較,模型大鼠體內3,5-二咖啡酰基奎寧酸、新綠原酸、對香豆酸、對羥基苯甲酸、原兒茶酸、秦皮乙素最大血藥濃度(Cmax)、藥時曲線下面積(AUC)高于正常大鼠,說明其體內暴露量增加,在肝損傷狀態(tài)下這些成分的血漿藥物濃度增加,可以在較低給藥劑量下獲得所需的藥效,故此推測這幾種成分為保肝活性成分。結論明確了FS醇提物最大給藥劑量;證實FS醇提物的含藥血清具有保肝作用;建立了15批FS血清指紋圖譜,表征了FS口服給藥后吸收入血情況,同時借助灰色關聯(lián)度法分析保肝活性的譜-效關系。明確了正常-急性肝損傷狀態(tài)下FS入血原型成分的藥代動力學行為差異。本課題為闡述FS蒙醫(yī)臨床保肝作用的藥效物質基礎,進一步確定FS質量標記物(Q-marker)候選物、臨床用藥安全性提供參考,為FS現代化研究提供了科學依據,推動該藥材的深層次開發(fā)利用。
【圖文】：

內蒙古醫(yī)科大學碩士研究生學位論文（2019）表 1-4 FS 急性毒性實驗對小鼠體重的影響（ x±S，，n=10 ）Table1-4 Weight change of mouse in acute toxicity test of FS（ x±S，n=10 ）給藥前（g）藥后1 d(g)藥后3 d(g)藥后5 d(g)藥后7 d(g)藥后11 d(g)120.2±1.94 22.5±1.34 26.4±2.30 30.0±2.18 32.6±2.17 36.50±3.31 38.9 19.5±1.38 19.7±1.10 23.2±2.10 29.7±2.01 31.9±2.76 35.9±2.69 38.1

C15* C7H6O3137.02447 137.02361 6.32 137.02345,93.03329C16 C21H20O10431.09837 431.09860 16.8 431.09924,268.03827C17 C12H8O4 215.03498215.032681.13215.03220,189.02302,59.01231,119.03379,145.06082,71.01239,76.09027C18* C9H8O3 163.04007 163.03938 13.20 119.04907,165.03964,75.00741,121.02843注：*該成分碎片離子參與方法學考察。-30-20-100102030-40 -35 -30 -25 -20 -15 -10 -5 0 5 10 15 20 25 30 35 40t[2]t[1]15pici-轉置Y1-Y15+blank serum6.M1 (PCA-X)t[Comp. 1]/t[Comp. 2]R2X[1] = 0.257756 R2X[2] = 0.210676 Ellipse: Hotelling T2 (0.95)Y8Y7Y13Y14Y9Y11Y12Y4Y10Y2Y15Y6Y5Y3Y1blank-seruSIMCA-P+ 12 - 2019-03-16 06:51:49 (UTC+8)圖 3-4 空白血清供試品及 15 批 FS 含藥血清供試品 PCA 得分圖Figure 3-4. Principal component analysis of blank serum and serum of 15 batches of FS
【學位授予單位】：內蒙古醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R29

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 孫媛媛;焦丹;董聰聰;林昱宏;蘇俊霞;;藍盆花研究進展[J];亞熱帶植物科學;2018年03期

2 李旭新;拉喜那木吉拉;蘇慧;包金花;賈俊英;孫德智;楊恒山;;蒙藥植物藍盆花花粉形態(tài)及萌發(fā)特性研究[J];內蒙古民族大學學報(自然科學版);2018年02期

3 趙君;姚彤;李明;楊進;;生物炭對干旱脅迫下藍盆花生長及根際土壤真菌豐度的影響[J];北方園藝;2019年14期

4 劉艷紅;歐陽輝;黃小方;黎田兒;周茂福;;蒙藥藍盆花UHPLC特征圖譜研究[J];江西中醫(yī)藥大學學報;2018年06期

5 路端正;北京植物兩新變型[J];北京農學院學報;1994年01期

6 王國英;趙子龍;薛培鳳;馬飛祥;張冬艷;王娜娜;李e

本文編號：2664716