【摘要】：目的:探討TGF-β1是否介導(dǎo)針刺對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠的抗炎作用。方法:將18只大鼠隨機(jī)分為完全弗氏佐劑模型組(AIA)、針模組(AIA+MA)、針模+TGF-β1受體阻斷劑組(AIA+MA+TβR bloker),每組6只。AIA的造模方法是大鼠右側(cè)足底皮內(nèi)注射佐劑,干預(yù)手法為手針針刺大鼠雙側(cè)足三里。AIA+MA+TβR bloker組在造模后隔日一次對大鼠右側(cè)足底給藥注射,AIA組、AIA+MA組同前足底注射PBS。實驗過程中及取材后,應(yīng)用足排水法對大鼠足部容積進(jìn)行效應(yīng)指標(biāo)檢測。取材后,應(yīng)用實時熒光定量PCR法檢測大鼠足爪部位TGF-β,CD86,MCP-1,IL-1β,2iNOS的基因表達(dá)量。結(jié)果:(1)足排水檢測結(jié)果表明,實驗過程中AIA+MA大鼠足腫脹度始終維持在相對最低水平。AIA大鼠在整個觀察期間足腫脹度均高于AIA+MA大鼠,且在d9、d13兩個時間點,AIA大鼠足腫脹度明顯高于AIA+MA大鼠,差異具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。AIA+MA+TβR bloker大鼠在整個觀察期間足腫脹度也始終均高于AIA+MA大鼠,且在d7時兩組比較差異具有極顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),在d9、d13兩個時間點比較差異具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)經(jīng)RT-qPCR法檢測結(jié)果表明,AIA+MA+TβR bloker大鼠的MCP-1 mRNA表達(dá)量明顯高于AIA+MA,差異具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),AIA有高于AIA+MA的趨勢。AIA和AIA+MA+TβR bloker的TGF-βmRNA表達(dá)量有低于AIA+MA的趨勢,AIA和AIA+MA+TβR bloker的IL-1β、2iNOS mRNA表達(dá)量有高于AIA+MA的趨勢,但均未出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。CD86 mRNA的表達(dá)量三組間無明顯差異。結(jié)論:(1)TGF-β1受體阻斷劑可在一定程度上阻斷針效,說明TGF-β1參與了針刺治療佐劑性關(guān)節(jié)炎的過程。(2)TGF-β1可能是通過下調(diào)MCP-1介導(dǎo)針刺抗炎效應(yīng)。
【圖文】：

圖 1 實驗流程2.2 實驗動物分組根據(jù)實驗流程（見圖1），采用 Microsoft Excel 軟件對30只Wistar大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后的足容積大小進(jìn)行排序，篩選出其中大小較均一的18只，隨機(jī)分為完全弗氏佐劑模型組（AIA）、針模組（AIA+MA）、針模+TGF-β1受體阻斷劑組（AIA+MA+TβRbloker），每組各6只。三組均參照文獻(xiàn)[33]，在實驗開始前1天（d-1）于大鼠右后肢足底皮內(nèi)注射0.1ml佐劑進(jìn)行造模。實驗過程中AIA不做任何干預(yù)；AIA+MA和AIA+MA+TβR bloker在造模后隔日（d1）開始進(jìn)行針刺，連續(xù)7天，，每日1次

和可重復(fù)性，針刺操作者在正式實驗開始前及實驗期間需反復(fù)進(jìn)行針灸操作參數(shù)儀器的手動練習(xí)。實驗過程中，從d1開始隔日上午8-10點對大鼠足部容積進(jìn)行效應(yīng)指標(biāo)檢測，檢測方法為足排水法。具體針刺干預(yù)方法與效應(yīng)指標(biāo)檢測流程見圖2，固定方法見圖3。圖 2 針刺干預(yù)方法與效應(yīng)指標(biāo)檢測流程圖 3 針刺中大鼠使用自制固定衣固定
【學(xué)位授予單位】：長春中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R245

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本文編號：2647232