【摘要】：實驗目的利用能夠造成股骨頭壞死的藥物,通過給家兔成功造模后,然后灌服骨蝕寧膠囊Ⅰ號、Ⅱ號治療期間,觀察股骨頭血管CD34、CYR61及CTGF表達的影響和股骨頭組織破壞及修復情況。為驗證骨蝕寧膠囊之所以有效于臨床,治療激素性股骨頭壞死治療提供數據資料。實驗方法1通過動物實驗,檢測運用骨蝕寧藥物后家兔模型的股骨頭CD34、CYR61及CTGF表達的改變情況本實驗使用60只健康新西蘭白兔,均為成年,雌雄各半,被隨機的分配為4個組:正常組6只,骨蝕寧膠囊組(治療組)18只、空白對照組(模型組)18只、健骨生組(陽性組)18只,并給以編號。以正常組6只作為對比的標準,且每個兔子分開放在單個籠里喂養(yǎng),剩余的54只兔子用來造模,通過相關造模藥物應用,使其變成相對典型的SANFH模型,待股骨頭壞死造模成功過后,將對骨蝕寧膠囊組(治療組)進行甘油三酯(TG)檢測用以中醫(yī)辨證,鑒于甘油三酯(TG)正常值為:1.00±0.72mmol/L,檢測結果按1.00mmol/L作為標準,高于此數值辨證為血瘀型,灌服骨蝕寧Ⅰ號方;剩余辨證為腎虛型,灌服骨蝕寧Ⅱ號方,健骨生組(陽性組)采用健骨生丸蒸餾水溶解后定期灌胃,對于空白對照組(模型組)將定時定量為其灌服生理鹽水,于第4周、8周、12周時,將分批次處死家兔,切開取出家兔的雙側股骨頭,經處理后用石蠟包埋,制作成股骨頭組織切片,并運用免疫組化法(SABC)觀察股骨頭的CD34、CYR61及CTGF表達的情況。2從組織形態(tài)學角度觀察股骨頭壞死家兔模型,灌服骨蝕寧膠囊后的股骨頭改變情況第4周、8周、12周分批次處死的家兔,切開雙側的髖關節(jié)并取出股骨頭,經處理后用石蠟包埋,制作成股骨頭組織切片,運用HE染色,在顯微鏡下觀察股骨頭組織形態(tài)的變化。實驗結果1 CD34、CYR61及CTGF表達測定第4周:模型組、陽性組和治療組的CD34、CYR61及CTGF灰度值均低于正常組(P0.01),治療組和陽性組的灰度值都低于模型組的灰度值(P0.01);第8周:治療組和陽性組的灰度值此時仍低于模型組的灰度值,治療組的灰度值與陽性組灰度值比較,治療組偏低些;第12周:正常組和陽性組的灰度值均高于治療組(P0.01),治療組股骨頭的CD34、CYR61及CTGF的表達高于正常組和陽性組的表達(P0.01)。2 HE染色觀察4周時正常組股骨頭經觀察其內骨小梁結構完整,形態(tài)均勻。模型組、治療組與陽性組股骨頭內的骨小梁與正常股骨頭相比,結構顯得不規(guī)整、不均勻,而且骨髓脂肪細胞較正常股骨頭增多。8周時可見模型組股骨頭內的骨小梁變細,間距增大,股骨頭骨髓脂肪細胞明顯增多;骨陷窩數量也較前明顯增多,而治療組和陽性組股骨頭骨小梁結構比模型組有所改善。12周時股骨頭切片示正常組骨小梁結構形態(tài)完整,模型組微結構無明顯改變,治療組與陽性組骨小梁結構變得較有規(guī)則,可見較多的骨髓內造血細胞,骨陷窩數量及脂肪細胞較前減少,總的看來治療組股骨頭骨小梁的整體均勻度要高于陽性組。實驗結論1.大腸桿菌內毒素與甲強龍聯合法可完成對兔SANFH模型構建。2.骨蝕寧膠囊均能夠增強CD34、CYR61及CTGF表達,有利于壞死股骨頭內血管重建與再生,使骨壞死區(qū)的血運得到改善,使骨壞死得到不同程度的修復,可能是此藥對股骨頭壞死起效的作用機制一個重要方面。3.激素性壞死股骨頭內血管重建與再生的改變,對股骨頭修復具有重要意義。
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【學位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R274.9

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本文編號：2326971