本文選題：右歸丸 + 滋陰、溫陽拆方　； 參考：《首都醫(yī)科大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：第一部分:右歸丸對(duì)EAE小鼠神經(jīng)導(dǎo)向因子及Rho GTP酶信號(hào)分子的調(diào)節(jié)作用目的:觀察右歸丸對(duì)小鼠腦和脊髓netrin1/DCC、slit2/Robo1和Rho A/Rac1/Cdc42等神經(jīng)因子的調(diào)節(jié)作用,以探討右歸丸促進(jìn)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠神經(jīng)再生的作用機(jī)制。方法:70只C57BL/6雌性小鼠,隨機(jī)分為七組,分別為正常組(NC)、模型組(MO)、激素組(PA)、梓醇組(CA)和右歸丸組(1.2,2.4,4.8 g/kg)。皮下注射MOG35-55建立EAE小鼠模型。每日灌胃給藥,記錄體重和神經(jīng)功能評(píng)分。40天后處死小鼠,取腦和脊髓,蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色光鏡觀察小鼠腦和脊髓組織病理改變,透射電鏡觀察小鼠腦和脊髓軸突和髓鞘的損傷變化。免疫熒光法(immunofluorescent staining,IF)觀察MAP-2的表達(dá)。免疫組化法(immunohistochemistry,IHC)、實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)和蛋白印跡法(Western blot,WB)檢測(cè)小鼠腦和脊髓netrin1、DCC、slit2、Robo1、Rho A、Rac1和Cdc42的表達(dá)水平。結(jié)果:右歸丸能減低EAE小鼠的神經(jīng)功能評(píng)分、減輕腦和脊髓炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、減少軸突損傷和髓鞘脫失。右歸丸可提高M(jìn)AP-2的表達(dá)。IHC、q RT-PCR和WB顯示,右歸丸可提高netrin1、DCC、slit2、Robo1、Rac1、Cdc42的表達(dá)水平,降低Rho A的表達(dá)水平。結(jié)論:右歸丸對(duì)MOG35 55誘導(dǎo)的EAE小鼠具有一定的神經(jīng)保護(hù)作用,能促進(jìn)神經(jīng)再生修復(fù),該作用與調(diào)節(jié)netrin1/DCC、slit2/Robo1和Rho家族Rho A、Rac1、Cdc42相關(guān)。酶信號(hào)分子的調(diào)節(jié)作用第二部分:右歸丸及其滋陰、溫陽拆方對(duì)EAE小鼠神經(jīng)導(dǎo)向因子及Rho GTP目的:進(jìn)一步研究右歸丸“陰中求陽”配伍對(duì)EAE小鼠神經(jīng)再生的調(diào)節(jié)作用。方法:C57BL/6雌性小鼠分為NC、MO、PA、CA、右歸丸(YGPs)、滋陰填精方(NY)和溫陽化氣方(WY)七組。造模和處理方法同實(shí)驗(yàn)第一部分,檢測(cè)指標(biāo)和方法亦同前。結(jié)果:右歸丸及其NY、WY拆方均能減低EAE小鼠的神經(jīng)功能評(píng)分、減輕腦和脊髓中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、緩解軸突損傷和髓鞘脫失。右歸丸及其拆方可提高M(jìn)AP-2表達(dá),IHC、q RT-PCR和WB結(jié)果顯示,右歸丸及其拆方可提高netrin1、DCC、slit2、Robo1、Rac1、Cdc42的表達(dá)水平,降低Rho A表達(dá)水平。在拆方研究中,NY在減輕EAE小鼠急性期神經(jīng)功能評(píng)分以及EAE緩解期病理損傷效果較好,對(duì)EAE緩解期排斥性導(dǎo)向因子slit2、Robo1以及信號(hào)分子Rho A具有調(diào)節(jié)作用;WY對(duì)EAE緩解期吸引性神經(jīng)導(dǎo)向因子netrin1、DCC以及信號(hào)分子Rho A、Rac1、Cdc42具有調(diào)節(jié)作用,而右歸丸方對(duì)上述各方面均具有較顯著的調(diào)節(jié)作用。結(jié)論:右歸丸方及其拆方均對(duì)EAE小鼠有神經(jīng)保護(hù)作用,可通過調(diào)節(jié)slit2/Robo1、netrin1/DCC和Rho A/Racl/Cdc42促進(jìn)EAE小鼠神經(jīng)修復(fù)。滋陰和溫陽拆方在神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)修復(fù)等方面各有側(cè)重,右歸丸在神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)修復(fù)等方面均具有較為顯著的調(diào)節(jié)作用。第三部分:右歸丸方及其滋陰、溫陽拆方的主要化學(xué)成分指認(rèn)與定量分析目的:為右歸丸方及兩個(gè)拆方的質(zhì)量控制與發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)。方法:采用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS對(duì)右歸丸方及其拆方的化學(xué)成分進(jìn)行研究,應(yīng)用LC-ESI-MS/MS法對(duì)右歸丸樣品中的馬錢苷與金絲桃苷進(jìn)行定量測(cè)定。結(jié)果:本研究從右歸丸方中指認(rèn)出宋果靈、綠原酸、附子靈、馬錢苷、尼奧靈、獐牙菜苷、金絲桃苷、槲皮素8個(gè)化合物;滋陰方中主含綠原酸、馬錢苷、獐牙菜苷、金絲桃苷、槲皮素等5個(gè)化合物,溫陽方中主含宋果靈、綠原酸、附子靈、尼奧靈、金絲桃苷、槲皮素等6個(gè)化合物。定量測(cè)定右歸丸方中馬錢苷的含量是51.8 mg/g,金絲桃苷的含量是43 mg/g。結(jié)論:右歸丸方及其滋陰、溫陽拆方的化學(xué)成分指認(rèn)及主要化學(xué)成分含量測(cè)定為藥理實(shí)驗(yàn)提供了質(zhì)量控制及相應(yīng)的作用物質(zhì)基礎(chǔ)。綜上,本課題研究證實(shí)右歸丸對(duì)EAE小鼠具有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用,能夠促進(jìn)EAE小鼠神經(jīng)修復(fù),其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)神經(jīng)導(dǎo)向因子netrin1、slit2和其受體DCC、Robo1,以及細(xì)胞內(nèi)Rho GTP酶Rho A、Rac1、Cdc42相關(guān)。滋陰、溫陽拆方作用各有側(cè)重,全方在神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)再生等方面均具有較為顯著的作用,揭示了右歸丸“陰中求陽”配伍的部分科學(xué)內(nèi)涵。
[Abstract]:In the first part , the effects of Yougui Pill on the neurogenesis of mouse brain and spinal cord netrin1 / DCC , bcl 2 / Robo1 and rho A / Rac1 / Cdc42 were investigated . 鐨笅娉ㄥ皠MOG35-55寤虹珛EAE灝忛紶妯″瀷.姣忔棩鐏岃儍緇欒嵂,璁板綍浣撻噸鍜岀緇忓姛鑳借瘎鍒，

本文編號(hào)：1950790