本文關(guān)鍵詞：電針“天樞”穴對慢傳輸型便秘大鼠結(jié)腸平滑肌結(jié)構(gòu)及Cajal間質(zhì)細胞的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《第三軍醫(yī)大學》 2005年

體外培養(yǎng)小鼠小腸Cajal間質(zhì)細胞及SCL轉(zhuǎn)基因?qū)ζ浔磉_c-kit的影響

李春穴  

【摘要】：Cajal間質(zhì)細胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是胃腸慢波的起搏細胞(pacemakercells)。ICC缺失與糖尿病性胃腸動力紊亂、慢傳輸性便秘、慢性假性腸梗阻等眾多胃腸動力紊亂性疾病密切相關(guān)。酪氨酸激酶受體c-kit是胃腸道ICC的特異性標志,干細胞因子(stem cell factor,SCF)與c-kit結(jié)合后所啟動的信號通路,對ICC發(fā)育、分化及表型維持穩(wěn)定至關(guān)重要。多種外源性因素均可通過下調(diào)c-kit表達使ICC失去正常的表型特征,如對c-kit反應(yīng)呈陰性,而對部分平滑肌抗原反應(yīng)呈陽性,細胞突起變短或消失,ICC數(shù)目減少并直接導(dǎo)致胃腸道平滑肌慢波喪失,但并未發(fā)現(xiàn)細胞凋亡或壞死。如何使發(fā)生表型轉(zhuǎn)化的ICC通過重建c-kit信號通路實現(xiàn)表型逆轉(zhuǎn),是醫(yī)學工作者面臨的一個難題。 相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),c-kit轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)存在核轉(zhuǎn)錄因子SCL(stem cell leukemia,SCL)結(jié)合位點,SCL主要是通過作用于c-kit基因啟動子調(diào)節(jié)c-kit表達來發(fā)揮其“生存基因”的功能,其對SCF依賴型細胞以及CD34(CD34~+)陽性細胞的生存具有重要的調(diào)控作用,可強烈上調(diào)造血細胞、多種干細胞以及其他多種CD34~+細胞表達c-kit,CD34~+的TL-1細胞轉(zhuǎn)染反義SCLcDNA后c-kit表達明顯降低,并對SCF失去反應(yīng)性,而SCL過表達則可使c-kit表達升高并對SCF反應(yīng)性恢復(fù)正常,可見SCL在c-kit表達調(diào)控中發(fā)揮重要作用。ICC是SCF依賴型且CD34~+的細胞,但目前尚無有關(guān)SCL對ICC表達c-kit調(diào)控作用的報道。我們由此設(shè)想,通過上調(diào)體外培養(yǎng)ICC內(nèi)SCL表達和活性水平,達到促進ICC表達c-kit的目的,從而為通過重建c-kit信號通路促進表型受損ICC恢復(fù)表型奠定基礎(chǔ)。 體外培養(yǎng)ICC方法是研究細胞功能以及細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的重要方法,相對體內(nèi)研究而言影響因素單一。目前,有關(guān)ICC的體外培養(yǎng),國外的研究尚少,國內(nèi)尚未見報道。在本課題研究,我們擬在建立ICC體外培養(yǎng)方法的基礎(chǔ)上,構(gòu)建SCL表達載體,并通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)上調(diào)體外培養(yǎng)小鼠小腸ICC內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子SCL蛋白表達水平和轉(zhuǎn)錄活性,進而探討SCL轉(zhuǎn)基因?qū)w外培養(yǎng)小鼠小腸ICC表達c-kit的影響。本研究有望為從核轉(zhuǎn)錄水平治療以ICC減少為背景的胃腸動力紊亂性疾病奠定理論基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R574
【目錄】：

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