本文關(guān)鍵詞：三七乳膏的制備及體外透皮特性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南方醫(yī)科大學(xué)》 2014年

三七乳膏的制備及體外透皮特性的研究

黎月桃  

【摘要】：[研究背景] 2000年,世界衛(wèi)生組織把疼痛列為繼呼吸、脈搏、體溫和血壓之后的人類第5大生命指征。這種醫(yī)學(xué)上的新觀點(diǎn)、新認(rèn)識(shí)正在逐漸普及到人民大眾,使得疼痛醫(yī)學(xué)受到了社會(huì)的廣泛關(guān)注,得到了迅猛的發(fā)展。雖然在中國還缺乏大規(guī)模、多中心的流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù),但在中國醫(yī)院的臨床診療中,疼痛是最常見的主訴之一,也是門診患者就診最主要的原因。 對(duì)于疼痛的治療目前還存在著手段單一的局面。藥物治療是疼痛治療的主導(dǎo),包括各種麻醉、鎮(zhèn)痛藥物的口服和注射、麻醉藥物神經(jīng)阻滯療法等。但存在著口服藥物胃腸道反應(yīng)大,不宜長期應(yīng)用,麻醉劑成癮性和神經(jīng)阻滯專業(yè)技術(shù)要求高,難以普遍推廣應(yīng)用等問題。如何快速、高效、安全、穩(wěn)定、有效、可控性鎮(zhèn)痛,提高鎮(zhèn)痛質(zhì)量一直是醫(yī)學(xué)界共同關(guān)注的重大課題之一 隨著傳統(tǒng)中藥的研究與現(xiàn)代藥理研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)許多中草藥具有明顯的鎮(zhèn)痛效果,對(duì)多種疼痛的鎮(zhèn)痛療效確切。而且沒有明顯的成癮性、耐受性等毒副作用,是當(dāng)今鎮(zhèn)痛藥研究的熱點(diǎn),具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景。 三七(Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen)為五加科人參屬植物,以干燥的根入藥。其用于治療疾病有著悠久的歷史,是我國特有的珍貴藥材。現(xiàn)代化學(xué)和藥理學(xué)研究表明,三七具有止血、補(bǔ)血、營養(yǎng)心肌、抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)心腦血管、營養(yǎng)腦神經(jīng)、增加智力、調(diào)節(jié)免疫、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗炎、抗衰老等作用。其中活血、鎮(zhèn)痛作用尤為突出,劉榮東等研究證明三七總皂苷注射劑能明顯緩解老年人骨關(guān)節(jié)炎疼痛的療效。目前臨床應(yīng)用較多的三七總皂苷產(chǎn)品有血塞通注射液、云南白藥、血塞通軟膠囊、絡(luò)泰粉針、正康腦明注射液、血栓通注射液、路路通注射液等。 經(jīng)皮給藥系統(tǒng)(Transdermal Drug Delivery System,TDDS):是指在皮膚表面給藥,使藥物以恒定速度(或接近恒定速度)通過皮膚各層,進(jìn)入人體血液循環(huán)并達(dá)到有效血藥濃度、實(shí)現(xiàn)疾病治療或預(yù)防的一類新型制劑。TDDS的基本類型有：膜控釋型、粘膠分散型、骨架擴(kuò)散型、微貯庫型。 TDDS是無創(chuàng)給藥的新途徑,具有以下特點(diǎn)及優(yōu)勢：避免了口服給藥時(shí)肝臟的首過效應(yīng)及胃腸道對(duì)藥物的破壞,提高了藥物的生物利用度；具有緩釋作用,可減少給藥次數(shù),延長給藥時(shí)間；保持血藥水平穩(wěn)定在治療有效濃度范圍內(nèi),降低了藥物的毒性和副作用,提高了藥物的療效；避免了藥物對(duì)胃腸道的刺激性,且給藥無創(chuàng)傷,提高了患者的依從性；患者可以自主用藥,相對(duì)減少患者個(gè)體間差異和個(gè)體內(nèi)差異。 TDDS可通過化學(xué)滲透法及物理方法促進(jìn)藥物滲透。常用的滲透促進(jìn)劑有月桂氮卓酮、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等。常用的物理促滲方法則有離子導(dǎo)入法、電致孔法、超聲導(dǎo)入法、激光技術(shù)、磁導(dǎo)入及熱穿孔。 乳膏是其中一種經(jīng)皮給藥制劑,是采用乳劑型基質(zhì)制成的軟膏劑,主要有保護(hù)創(chuàng)面、潤滑皮膚和局部治療作用。乳膏劑因使用方便、性質(zhì)穩(wěn)定、溶解性能較好等優(yōu)點(diǎn)越來越受到人們的關(guān)注,很多新的醫(yī)藥原料正在嘗試著制成乳膏,通過透皮吸收達(dá)到較好的治療效果。 [研究目的] 確立三七乳膏的處方及制備工藝,并考察乳膏的穩(wěn)定性；建立高效液相色譜梯度洗脫法測定三七乳膏中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rb1、Rd的含量、研究三七乳膏的體外透皮能力。 [研究方法] 1、三七乳膏的處方篩選及其制備工藝 根據(jù)三七的理化特性,以三七總皂苷為主藥,以O(shè)/W型基質(zhì)為載體,制備成三七乳膏。本課題通過對(duì)油相、水相組成配比和乳化劑及其用量進(jìn)行篩選,以外觀形狀、離心實(shí)驗(yàn)、耐熱耐寒實(shí)驗(yàn)及室溫留樣觀察實(shí)驗(yàn)等評(píng)價(jià)指標(biāo),最終確定了乳膏的最佳處方,并通過對(duì)乳化方式、乳化溫度、藥物加入方式等考察來優(yōu)選乳膏制備的最佳工藝。 2、三七乳膏穩(wěn)定性考察 根據(jù)《中國藥典》相關(guān)規(guī)定,運(yùn)用離心實(shí)驗(yàn)、耐熱耐寒實(shí)驗(yàn)、加速實(shí)驗(yàn)及室溫留樣觀察實(shí)驗(yàn)考察三七乳膏穩(wěn)定性。為進(jìn)一步考察乳膏安全性,進(jìn)行了皮膚刺激性實(shí)驗(yàn),觀察局部紅斑和紅腫反應(yīng)。 3、分析方法學(xué)的建立 采用高效液相色譜法同步測定三七乳膏透皮吸收液中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rb1及Rd的含量。 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品的制備：精密稱取干燥至恒重的三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rb1、Rd對(duì)照品適量,置于10mL的容量瓶中,加25%甲醇溶解并稀釋至刻度,制成三七皂苷R10.247mg·mL-1、人參皂苷Rg10.251mg·mL-1、人參皂苷Rb10.248mg·mL-1、人參皂苷Rd0.250mg·mL-1的混標(biāo)溶液,于4℃冰箱保存。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液0,1,2,3,4,5mL置于10mL量瓶中,用25%甲醇定容,稀釋至刻度,搖勻,得到系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別進(jìn)樣10μL,以峰面積為縱坐標(biāo)、濃度X(μg·mL-1)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程。 精密度試驗(yàn)：將標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次,每次進(jìn)樣10μL,測定峰面積,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)。 穩(wěn)定性試驗(yàn)：取透皮接收液按標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液制備方法制成供試品溶液,1、2、4、6、8、10、12、14h進(jìn)樣1次,每次進(jìn)樣10μL,測定峰面積,計(jì)算RSD。 加樣方法回收率實(shí)驗(yàn)：精密稱取已知含量的樣品,分別精密加入一定量的三七皂苷Rl,人參皂苷Rg1、Rb1、Rd標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品,按樣品溶液制備項(xiàng)下操作,重復(fù)操作5份。按色譜條件測定含量,計(jì)算回收率。 4、體外透皮試驗(yàn)的研究 采用改良Franz擴(kuò)散池,以完整裸鼠皮膚為滲透屏障,對(duì)三七乳膏進(jìn)行體外透皮試驗(yàn),分別在不同時(shí)間點(diǎn)取樣測定透皮接收液中的濃度,采用高效液相色譜法測定三七總皂苷中主要成分三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rb1、Rd的累積透皮量。實(shí)驗(yàn)條件：擴(kuò)散池面積為2.92cm2,接收液體積為7ml,接收液溫度為32℃±0.5,磁振子轉(zhuǎn)速200r·min-1,接收液為含30%乙醇的生理鹽水。三七乳膏4份,置于擴(kuò)散池中,涂勻,分別于給藥后1、2、4、6、8、10、12、14h各取接受液1mL(取液后補(bǔ)充等體積接收液)。 [實(shí)驗(yàn)結(jié)果] 1、三七乳膏的制備 通過對(duì)處方篩選,最終確立三七乳膏的最佳處方,乳化劑：司盤-801g、吐溫-804g；油相：硬脂酸5g、單硬脂酸甘油酯4g、白凡士林3g、液體石蠟10g；水相：甘油10g、蒸餾水61.8g；防腐劑：尼泊金乙酯0.2g。制備方法：采用后加乳化劑法,將三七總皂苷充分溶解于蒸餾水中,再加入其它基質(zhì)(乳化劑除外),加熱至85℃,待其充分溶解、混合。另稱取乳化劑吐溫-80、司盤-80加熱至85℃,攪勻,將乳化劑加入其它基質(zhì)中,均勻攪拌(1000rpm,15min),冷卻、凝固、分裝、即得。 2、三七乳膏穩(wěn)定性考察結(jié)果 經(jīng)過離心實(shí)驗(yàn)、耐熱耐寒實(shí)驗(yàn)、加速實(shí)驗(yàn)及室溫留樣觀察實(shí)驗(yàn)等的穩(wěn)定性考察,三七乳膏未見酸敗、變色、分層等現(xiàn)象,證明本乳膏性狀穩(wěn)定。 3、檢測方法學(xué)的建立 色譜柱：Thermo C18(250mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相：A為乙腈,B為純水,梯度洗脫。(0-4min)12%A,(4～30min)12%～45%A,(30-31min)45%-12%A,(31-33min)12%A；檢測波長:203nm；流速:1.0ml-min-1；柱溫：恒溫；進(jìn)樣量：10μL。三七皂苷R1標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=0.1079X-2.636(0.9999),線性范圍：24.7～123.5μg·mL-1；人參皂苷Rg1標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=0.1129X-2.774(0.9997),線性范圍：25.1～125.5μg·mL-1人參皂苷Rbl標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=0.1082X-2.657(0.9997)；線性范圍：24.8-124.0μg·mL-1;人參皂苷Rd標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=0.1120X-2.792(0.9999)；線性范圍：25.0～125.0μg·mL-1。 精密度試驗(yàn)結(jié)果：三七皂苷R1RSD1.71%,人參皂苷Rg1RSD1.65%,人參皂苷Rb1RSD1.87%,人參皂苷Rd RSD0.82%,表明測定方法的精密度較高,符合含量測定的要求。 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果：三七皂苷R1RSD1.53%,人參皂苷Rgl RSD1.24%,人參皂苷Rb1RSD2.18%,人參皂苷Rd RSD0.92%。結(jié)果表明,樣品中成分在14h內(nèi)均較穩(wěn)定,符合含量測定的要求。 加樣方法回收率結(jié)果：三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rb1、Rd平均回收率分別為96.67%,99.30%,96.87%,98.23%。RSD分別為2.62%,1.83%,1.93%,2.13%。 4、體外透皮吸收結(jié)果 三七乳膏成分群滲透動(dòng)力學(xué)參數(shù)：三七皂苷R1：Qn=4.83t+40.23,透皮吸收速率為4.83μg·cm-2·h-1;人參皂苷Rg1：Qn=8.15t+51.56,透皮吸收速率為8.15μg·cm-2·h-1;人參皂苷Rb1：Qn=5.02t+39.42,透皮吸收速率為5.02μg·cm-2·h-1;人參皂苷Rd：Qn=4.68t+41.35,透皮吸收速率為4.68μg·cm-2·h1。累積透皮吸收量與時(shí)間呈良好的線性關(guān)系,符合零級(jí)速率特征。 [結(jié)論] 三七乳膏生產(chǎn)工藝簡便,滲透性良好,性質(zhì)穩(wěn)定可靠。本課題建立了三七的HPLC含量測定方法,該方法準(zhǔn)確、靈敏、簡單、重復(fù)性好,適用于三七體外透皮的系列研究。確立了三七的體外透皮試驗(yàn)儀裸鼠皮膚為滲透用皮膚,乙醇/生理鹽水(3：7,V：V)為接收液,三七成分群累積透皮吸收量與時(shí)間呈良好的線性關(guān)系,符合零級(jí)速率特征。本課題為三七透皮吸收制劑的研制提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R283.6;R286.0
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：三七乳膏的制備及體外透皮特性的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：155913