腎虛痰濕型多囊卵巢綜合征病證結(jié)合動(dòng)物模型的建立研究
本文關(guān)鍵詞: 來(lái)曲唑 脫氫表雄酮 大鼠模型 腎虛痰濕 肥胖 多囊卵巢綜合征 出處:《成都中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯篩選出符合具有中醫(yī)腎虛痰濕特征信息PCOS病證結(jié)合即臨床與代謝特征的最優(yōu)動(dòng)物模型。并研究Bax、Bcl-2、GDF-9、BMPR-2在PCOS大鼠卵巢中的表達(dá)水平,初步探討肥胖型PCOS發(fā)病機(jī)制。[實(shí)驗(yàn)方法]健康42d齡、23d齡SD雌性大鼠各70只,連續(xù)5天行陰道分泌物涂片檢查,選取動(dòng)情周期正常的為入組標(biāo)準(zhǔn)。將42d齡大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、高脂模型組、Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組;將23d齡大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、高脂模型組、DHEA模型組、DHEA肥胖模型組。分別在Letrozole、 DHEA基礎(chǔ)上加用高脂乳劑,連續(xù)造模處理21天后,通過(guò)觀察大鼠一般情況、動(dòng)情周期,檢測(cè)大鼠用藥前后體重差、臟器指數(shù)、胰島素(FINS、2hINS、FPG、 2hBPG、HOMA指數(shù))水平、血清性激素(E2、T、LH、FSH、LH/FSH)水平、血脂(TC、TG、HDL、LDL)水平并將卵巢送檢。HE染色后,在顯微鏡下觀察各組大鼠卵巢組織,用免疫組化法檢測(cè)Bax、Bcl-2、GDF-9、BMPR-2在PCOS大鼠卵巢中的表達(dá)水平。[實(shí)驗(yàn)結(jié)果](1)對(duì)動(dòng)情周期的影響Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組、DHEA模型組、DHEA肥胖模型組大鼠均出現(xiàn)動(dòng)情周期紊亂,或動(dòng)情周期延長(zhǎng),或持續(xù)處于動(dòng)情期。大鼠排卵率明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(2)對(duì)體重的影響Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組、DHEA模型組、DHEA肥胖模型組大鼠用藥前后體重差及大鼠處死時(shí)體重升高明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(3)對(duì)臟器指數(shù)的影響Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組大鼠子宮臟器指數(shù)下降明顯,卵巢臟器指數(shù)升高明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。DHEA模型組、DHEA肥胖模型組大鼠子宮臟器指數(shù)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(4)對(duì)血糖和胰島素的影響Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組大鼠FINS、FPG值升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),2hFINS升高明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。DHEA模型組、DHEA肥胖模型組大鼠FINS. HOMA指數(shù)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05),2hFINS升高明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(5)對(duì)性激素的影響Letrozole;模型組、Letrozole肥胖模型組大鼠E2、LH/FSH值升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),T、LH值升高明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。DHEA模型組、DHEA肥胖模型組大鼠E2、T、LH、FSH值升高明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(6)對(duì)血脂的影響Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組大鼠TC、TG值升高,HDL值降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。DHEA模型組、DHEA肥胖模型組大鼠TC、 TG值升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(7)對(duì)卵巢形態(tài)學(xué)影響Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組大鼠卵巢初級(jí)卵泡數(shù)、次級(jí)卵泡數(shù)、成熟卵泡數(shù)、黃體數(shù)均減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),囊狀卵泡數(shù)增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),閉鎖卵泡數(shù)增多明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。DHEA模型組、DHEA肥胖模型組大鼠卵巢成熟卵泡數(shù)、黃體數(shù)減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),閉鎖卵泡數(shù)增多明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(8) Bax、Bcl-2的表達(dá)研究Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組、DHEA模型組、DHEA肥胖模型組均出現(xiàn)Bax呈現(xiàn)高水平表達(dá),Bc1-2呈現(xiàn)低水平表達(dá),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(9) GDF-9、BMPR-2的表達(dá)研究Letrozole模型組、Letrozole肥胖模型組、DHEA模型組、DHEA肥胖模型組GDF-9、BMPR-2均呈現(xiàn)低水平表達(dá),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)[實(shí)驗(yàn)結(jié)論](1) Letrozole改良法和DHEA改良法均較符合具有中醫(yī)腎虛痰濕特征信息病證結(jié)合PCOS動(dòng)物模型。(2) Letrozole改良法偏重于研究PCOS大鼠血脂、胰島素抵抗、卵巢形態(tài)學(xué)改變。(3)DHEA改良法偏重于研究PCOS大鼠血清性激素水平、卵巢形態(tài)學(xué)改變。(4)推測(cè)Bax在肥胖型PCOS動(dòng)物模型中呈現(xiàn)高水平表達(dá),Bcl-2、GDF-9、 BMPR-2均呈現(xiàn)低水平表達(dá)。
[Abstract]:Objective : To screen out the optimal animal model for syndrome of PCOS ( PCOS ) with syndrome of kidney - deficiency and phlegm - dampness syndrome ( PCOS ) , and to study the expression level of Bax , Bcl - 2 , GDF - 9 and BMPR - 2 in the ovary of PCOS rats . The rats were randomly divided into blank control group , high fat model group , Letrozole model group and Letrozole obesity model group . The rats were randomly divided into blank control group , high fat model group , Letrozole model group and Letrozole obesity model group . The rats were randomly divided into blank control group , high fat model group , Letrozole model group and Letrozole obesity model group . After HE staining , the expression level of Bax , Bcl - 2 , GDF - 9 and BMPR - 2 in the ovary of PCOS rats was observed by immunohistochemistry . ( 2 ) The effects of the Letrozole model group , the Letrozole obesity model group , the model group of Letrozole , the model group of Letrozole , the model group of Letrozole , the model group of Letrozole , the model group of Letrozole in obese model group , the model group of Letrozole obesity model group , the model group of Letrozole obesity model group , the model group of Letrozole obesity model group and the model group of Letrozole obese rats were significantly higher than those in the model group of Letrozole model group , the difference was significant ( P0.01 ) . There was significant difference in serum levels of E2 , LH and FSH in the model group and Letrozole obesity model group ( P0.05 ) . The expression of Bax and BMPR - 2 in obese model group was significantly higher than that in Letrozole model group ( P0.05 ) . ( 4 ) Bcl - 2 , GDF - 9 and BMPR - 2 were expressed at low level in obese women with PCOS .
【學(xué)位授予單位】:成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R271.9
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本文編號(hào):1548579
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