本文關(guān)鍵詞：microRNA-183下調(diào)EGR1對人滑膜肉瘤細(xì)胞株SW982耐藥、侵襲、遷移能力的影響

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【摘要】：目的：探討微小RNA-183 (miR-183)對人滑膜肉瘤細(xì)胞株SW982耐藥、侵襲、侵襲能力的影響,并分析早期生長反應(yīng)因子1(EGR1)作為其潛在靶點(diǎn)的可能。方法：采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)轉(zhuǎn)染]miR-183 mimics/inhibitors/N.C,上調(diào)／下調(diào)SW982細(xì)胞中miR-183的表達(dá)；流式細(xì)胞術(shù)及Real-time PCR檢測轉(zhuǎn)染效率；噻唑藍(lán)(MTT)法檢測轉(zhuǎn)染后SW982細(xì)胞增值率； MTT法測定轉(zhuǎn)染24h、48h、72h后10μmmol/I多柔比星對SW982滑膜肉瘤細(xì)胞抑制情況；流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染效率及轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞周期的改變,Annexin V-FITC/PI雙染法檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞凋亡的影響；Transwell實(shí)驗(yàn)比較轉(zhuǎn)染前后SW982細(xì)胞遷移、侵襲能力的變化。Western blot檢測轉(zhuǎn)染前后各組中EGR1含量的變化；雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證EGR1是否為miR-183靶基因。結(jié)果：轉(zhuǎn)染miR-183 mimics/inhibitors/N.C后,SW982細(xì)胞中miR-183的含量明顯發(fā)生改變；與正常組相比mimics組miR一183含量明顯增加(P0.001),inhibitors組miR-183含量明顯降低(P0.001),N.C組miR-183含量明顯無明顯變化(P=0.637)。在細(xì)胞增殖、周期、凋亡實(shí)驗(yàn)中,結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染前后SW982細(xì)胞株中的細(xì)胞增殖、周期、凋亡無明顯變化。在耐藥實(shí)驗(yàn)中,轉(zhuǎn)染后,多柔比星作用24h后mimics組(0.0051±0.022)抑制率較正常組(0.0903±0.039)明顯減低(P=0.003)；inhibitors組(0.1351±0.062)抑制率較正常組(0.0281±0.033)明顯增高(P=0.009)。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在遷移實(shí)驗(yàn)中,]mimics組和inhibitor組穿膜細(xì)胞數(shù)分別為108.61±4.94個(gè)、54.36±4.03個(gè)(P0.001)；在侵襲實(shí)驗(yàn)中,mimics組和inhibitor組穿膜細(xì)胞數(shù)分別為79.13±5.77個(gè),20.87±3.17個(gè)(P=0.036)。EGR1表達(dá)分析中,轉(zhuǎn)染48h后mimics組中EGR1表達(dá)較正常組明顯減低(P0.001)；inhibitors組中EGR1表達(dá)較正常組明顯增高(P=0.012)；雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)表明,miR-183可特異性靶向EGR1基因。結(jié)論：miR-183參與調(diào)控SW982細(xì)胞耐藥、侵襲及遷移；EGR1可能是其潛在靶點(diǎn)。miR-183對SW982細(xì)胞的增值、周期、凋亡無明顯影響。
【關(guān)鍵詞】：microRNA-183 EGR1 滑膜肉瘤 耐藥 侵襲
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R738.5
【目錄】：

• 中英文縮咯詞對照表5-7
• 摘要7-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-11
• 內(nèi)容與方法11-19
• 1 研究對象11-12
• 2. 內(nèi)容與方法12-18
• 3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18-19
• 結(jié)果19-28
• 討論28-33
• 小結(jié)33-34
• 致謝34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 綜述39-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文46-47
• 導(dǎo)師評閱表47

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本文編號(hào)：994688