本文關(guān)鍵詞：血清循環(huán)DNA在大腸癌診斷和療效評(píng)價(jià)方面的應(yīng)用研究

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【摘要】：背景大腸癌(colorectal cancer,CRC)是常見惡性腫瘤之一,發(fā)病率分別居于男、女性惡性腫瘤的第3位和第2位。新發(fā)病例數(shù)和死亡病例數(shù)呈逐年上升趨勢(shì)。據(jù)統(tǒng)計(jì),2012年兩項(xiàng)數(shù)字達(dá)到了140萬和69.39萬。由于早期缺乏特異性癥狀,超過半數(shù)患者就診時(shí)已屬中晚期,即使接受了手術(shù)治療,仍有較高的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)。因此早期診斷和監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)對(duì)大腸癌的治療至關(guān)重要。循環(huán)DNA(Circulating DNA)是一種存在于血漿、腦脊液及滑液等體液中的細(xì)胞外DNA,主要來源于細(xì)胞的凋亡和壞死。據(jù)估算,一個(gè)重量100g的腫瘤,每天大約3×1010個(gè)細(xì)胞的DNA進(jìn)入血液循環(huán)。血液循環(huán)中的癌細(xì)胞和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞同樣釋放循環(huán)DNA。檢測(cè)血漿或血清中的循環(huán)DNA猶如“液體活檢(Liquid biopsy)”,不僅可以通過“量”的多少估算腫瘤負(fù)荷、評(píng)價(jià)治療效果,還可以通過檢測(cè)遺傳學(xué)(如基因突變等)和表觀遺傳學(xué)(基因甲基化、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性、雜合性缺失LOH、mi RNAs)的改變判斷良惡性和篩選藥物靶標(biāo)。更重要的是,循環(huán)DNA的檢測(cè)簡便、經(jīng)濟(jì),重復(fù)性好。目的本實(shí)驗(yàn)通過比較血清循環(huán)DNA含量及完整性(DNA integrity index)在大腸癌患者、腸道良性病變患者及健康人的區(qū)別的差別來判斷二者是否在大腸癌的診斷方面具有價(jià)值,并且研究二者在評(píng)估手術(shù)大腸癌患者和化療大腸癌患者治療價(jià)值方面的價(jià)值。方法收集山東省腫瘤醫(yī)院自2014年6月-2015年6月收治的手術(shù)大腸癌患者血清標(biāo)本112例(術(shù)前3天,術(shù)后7天,術(shù)后14天);化療大腸癌患者血清標(biāo)本36例(第1周期化療前,第3周期化療前);腸道良性疾病患者血清標(biāo)本46例;健康人血清標(biāo)本41例。以LINE1基因?yàn)閿U(kuò)增引物,檢測(cè)血清標(biāo)本循環(huán)DNA的含量及完整性指數(shù)(完整性的計(jì)算按照如下公式計(jì)算:完整性指數(shù)=長片段DNA含量/短片段DNA含量)。療效評(píng)價(jià)按照2009年美國國立癌癥研究所實(shí)體瘤客觀療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)修訂版RECIST1.1進(jìn)行評(píng)價(jià)。采用SPSS17.0計(jì)算機(jī)醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,全部檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.循環(huán)DNA(Circulating DNA)含量、完整性指數(shù)(DII)與分化程度、分期和有無轉(zhuǎn)移等臨床因素有關(guān)(P0.05),與性別、年齡、腫瘤部位和PS評(píng)分無關(guān)(P0.05)。CEA和CA199與分期和有無轉(zhuǎn)移因素相關(guān)(P0.05),和性別、年齡、腫瘤部位、分化程度和PS評(píng)分無關(guān)(P0.05)。2.循環(huán)DNA(Circulating DNA)含量、CEA和CA199在大腸癌患者、腸道良性疾病患者和健康人之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),三組人群的完整性指數(shù)(DII)則沒有明顯差異(P0.05)。3.循環(huán)DNA含量、CEA和CA199區(qū)分癌癥患者和非癌癥人群的AUC分別為是0.71、0.67和0.69。4.循環(huán)DNA含量、CEA和CA199診斷大腸癌的敏感性分別為62.21%、59.46%和43.92%;特異性分別為79.31%、68.97%和96.55%。5.手術(shù)大腸癌患者術(shù)后7天循環(huán)DNA含量較術(shù)前3天增高(P0.05),術(shù)后14天較術(shù)前3天和術(shù)后7天降低(P0.05);術(shù)后7天完整性指數(shù)(DII)較術(shù)前3天增大(P0.05),術(shù)后14天較術(shù)后7天降低(P0.05),但高于術(shù)前3天(P0.05);術(shù)后14天循環(huán)DNA含量和完整性指數(shù)(DII)仍高于健康人水平。6.CR+PR患者化療后循環(huán)DNA含量與化療前相比降低(P0.05),SD患者和PD患者化療后較化療前升高(P均0.05)。3組患者完整性指數(shù)(DII)化療前后的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。CR+PR組和SD組患者化療前后CEA、CA199含量的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05);而PD組患者化療后的CEA和CA199含量較化療前升高(P0.05)。結(jié)論1.循環(huán)DNA含量、完整性指數(shù)(DII)、CEA和CA199與大腸癌患者的分期和轉(zhuǎn)移相關(guān),提示檢測(cè)標(biāo)志物水平有助于評(píng)估疾病狀態(tài)。2.循環(huán)DNA含量、CEA和CA199具有區(qū)分大腸癌患者、腸道良性疾病患者和健康人群的潛在應(yīng)用價(jià)值,完整性指數(shù)(DII)則不具備這種價(jià)值。3.循環(huán)DNA含量、CEA和CA199在區(qū)分癌癥患者和非癌癥人群方面具有一定的價(jià)值,其中循環(huán)DNA含量的價(jià)值最大。4.循環(huán)DNA含量具有最高的診斷敏感性,CA199具有最高的診斷特異性。5.循環(huán)DNA含量、完整性指數(shù)(DII)在術(shù)后呈現(xiàn)出先上升后下降趨勢(shì),可以反應(yīng)大腸癌瘤體負(fù)荷的情況,在觀察期內(nèi)兩個(gè)標(biāo)志物均未恢復(fù)健康人水平。6.循環(huán)DNA含量、完整性指數(shù)(DII)、CEA和CA199中,循環(huán)DNA含量的變化可以最好的反應(yīng)化療療效。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)直腸癌 循環(huán)DNA 完整性 化療 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.34
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 主要符號(hào)表11-12
• 第一章 前言12-14
• 第二章 病例和方法14-22
• 2.1 臨床資料14
• 2.2 材料與試劑14-16
• 2.3 檢測(cè)方法16-20
• 2.4 療效評(píng)價(jià)20-21
• 2.5 數(shù)據(jù)處理21-22
• 第三章 結(jié)果22-28
• 3.1 大腸癌患者各腫瘤標(biāo)志物與臨床病理因素的關(guān)系22-23
• 3.2 各腫瘤標(biāo)志物在健康人、良性腸道疾病和大腸癌患者之間的比較23-24
• 3.3 各標(biāo)志物臨界值的確定24-25
• 3.4 各標(biāo)志物的診斷價(jià)值25
• 3.5 手術(shù)結(jié)直腸癌患者手術(shù)前后循環(huán)DNA含量與完整性比較25-26
• 3.6 化療結(jié)直腸癌患者化療前后標(biāo)志物的變化26-28
• 第四章 討論28-35
• 4.1 大腸癌介紹28-29
• 4.2 腫瘤標(biāo)志物CEA、CA199介紹29-30
• 4.3 循環(huán)DNA介紹30-32
• 4.4 LINE1基因介紹及本實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)勢(shì)32
• 4.5 各腫瘤標(biāo)志物與臨床病理因素關(guān)系的分析32-33
• 4.6 各腫瘤標(biāo)志物診斷價(jià)值的比較33
• 4.7 循環(huán)DNA反應(yīng)腫瘤負(fù)荷的價(jià)值33-34
• 4.8 循環(huán)DNA反應(yīng)腫瘤化療療效的價(jià)值34
• 4.9 缺點(diǎn)及不足34-35
• 第五章 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 附錄40-44
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果44-45
• 致謝45

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李道娟;李倩;賀宇彤;;結(jié)直腸癌流行病學(xué)趨勢(shì)[J];腫瘤防治研究;2015年03期

2 閆巍;張能維;徐智;阿民布和;朱斌;宮軻;尹剛;孫志鵬;;結(jié)直腸癌患者手術(shù)前后循環(huán)DNA水平的變化及其意義[J];中國普通外科雜志;2013年12期

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本文編號(hào)：982890