本文關鍵詞：淫羊藿素聯(lián)合氟尿嘧啶對人肝癌HepG2細胞增殖的抑制作用

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【摘要】：目的：以人肝癌HepG2細胞為研究材料,探討淫羊藿素聯(lián)合氟尿嘧啶對人肝癌HepG2細胞增殖的抑制作用和抑制其遷移及修復,為淫羊藿素聯(lián)合氟尿嘧啶作為聯(lián)合用藥抗腫瘤提供理論依據(jù)。方法：以不同藥物處理體外培養(yǎng)的人肝癌HepG2細胞,倒置顯微鏡下觀察細胞貼壁情況和形態(tài)變化；用微量移液器20ul槍頭做細胞劃痕,于不同時間段觀察不同藥物處理后HepG2細胞的修復及遷移情況；在藥物作用不同時間段后用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測細胞生長抑制情況,并計算其生長抑制率(IR)和藥物相互作用系數(shù)(CDI)；用流式細胞儀檢測分析不同藥物處理后細胞凋亡；用流式細胞儀檢測分析不同藥物處理后細胞周期。統(tǒng)計學方法處理：所有數(shù)據(jù)應用SPSS 18.0進行統(tǒng)計分析,計量資料的描述用均數(shù)±標準差表示(x±s),單處理因素各組間樣本均數(shù)的多重比較采用單因素方差分析和LSD-t檢驗,兩組比較采用成組t檢驗。檢驗水準α=0.05,定義P0.05有統(tǒng)計學意義。結果：1.倒置顯微鏡下發(fā)現(xiàn)正常HepG2細胞生長狀態(tài)良好,細胞輪廓清楚。5-FU組、ICT組及ICT+5-FU組隨著藥物作用時間的增加,細胞形態(tài)逐漸變的不規(guī)則,數(shù)目不斷減少,偽足不斷增多,胞漿內出現(xiàn)空泡,細胞逐漸貼壁不良,不斷出現(xiàn)凋亡小體,細胞脫落死亡逐漸增多,細胞碎片增多。2.MTT比色檢測法發(fā)現(xiàn)ICT.5-FU、ICT+5-FU各組作用于人肝癌HepG2細胞有明顯的抑制增殖的作用,且具有時間依賴性。同時亦發(fā)現(xiàn)在10～80umol/l濃度范圍內ICT單獨及聯(lián)合5-FU對人肝癌HepG2細胞增殖的抑制作用亦呈濃度依賴性；不同濃度的ICT與5-Fu聯(lián)合運用后對人肝癌HepG2細胞增殖的抑制作用均較各相應單藥組明顯增加(P0.05)。ICT (10umol/l、20umol/l、40umol/l)與5-FU聯(lián)合作用人肝癌HepG2細胞24h、48h、72h,兩藥具有協(xié)同作用(CDI1),而ICT(80umol/l)與5-FU聯(lián)合作用人肝癌HepG2細胞48h、72h,兩藥具有拮抗作用(CDI1)。3.流式細胞儀檢測周期結果5-FU、ICT均對人肝癌HepG2細胞的S期周期有阻滯作用,并發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥后對HepG2細胞的S期周期阻滯作用與各相應單用藥物組比較,其阻滯作用增強。4.流式細胞檢測凋亡結果可見各組藥物對人肝癌HepG2細胞均有促進凋亡的作用。其中聯(lián)合用藥組與各相應單用藥物組對人肝癌HepG2細胞細胞凋亡數(shù)量明顯增加。5.細胞劃痕實驗發(fā)現(xiàn)各組藥物均對HepG2細胞有明顯的抑制遷移和修復的作用,隨著各組藥物作用時間的延長,其作用越明顯。其中聯(lián)合用藥組與各相應單用藥物組對人肝癌HepG2細胞遷移和修復的抑制作用明顯增強。結論：淫羊藿素對人肝癌HepG2細胞增殖具有抑制作用,且呈時間-濃度依賴性,聯(lián)合5-FU后其抑制作用更加顯著。淫羊藿素對人肝癌HepG2細胞的S期周期阻滯,聯(lián)合5-FU后其對S期周期阻滯作用增強。淫羊藿素對人肝癌HepG2細胞有促進凋亡的作用,聯(lián)合5-FU后其促進凋亡的作用增強。淫羊藿素、氟尿嘧啶對人肝癌HepG2細胞具有抑制其遷移和修復的能力,聯(lián)合5-FU后其抑制其遷移和修復的能力增強。
【關鍵詞】：淫羊藿素 氟尿嘧啶 HepG2細胞 肝癌 抑制
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-24
• 1. 實驗材料14-17
• 2. 實驗方法17-23
• 3. 統(tǒng)計學處理23-24
• 實驗結果24-35
• 1、普通顯微鏡下的HEPG2細胞形態(tài)學改變24-27
• 2、MTT檢測不同藥物對HEPG2細胞增殖的影響27-29
• 3、不同藥物對HEPG2細胞遷移的影響29-32
• 4、不同用藥對HEPG2細胞周期的影響32-33
• 5、不同藥物對HEPG2細胞凋亡的影響33-35
• 討論35-39
• 總結與展望39-40
• 1、課題總結39
• 2、課題展望39-40
• 參考文獻40-43
• 綜述43-50
• 參考文獻48-50
• 攻讀碩士研究生期間發(fā)表論文情況50-51
• 致謝51

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：974990