本文關鍵詞：sTRAIL及TRAIL受體在DNT細胞抑制胰腺癌細胞中的作用及意義

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【摘要】：【目的】本課題組前期研究表明雙陰性T細胞(DNT)細胞對胰腺癌細胞有抑制作用,本研究旨在探討可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(s TRAIL)結合其受體TRAIL-R1、TRAIL-R2在DNT細胞殺傷胰腺癌細胞中的作用及意義。【方法】采用抗體吸附法培養(yǎng)從健康志愿者外周血中分離的DNT細胞,3-4天換液一次,第12天收獲細胞。ELISA法檢測體外擴增的過夜培養(yǎng)的DNT細胞上清液中的s TRAIL水平。采用q PCR、Western blot法分別從基因和蛋白水平檢測TRAIL-R1、TRAIL-R2在6株胰腺癌細胞中的表達水平,免疫組織化學法檢測48例來自安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院普外科手術治療的胰腺癌組織及相應的癌旁組織標本中TRAIL-R1、TRAIL-R2的表達情況,并分析兩種受體與臨床病理參數(shù)之間的關系�！窘Y果】體外培養(yǎng)DNT細胞隨著時間的推移數(shù)目逐漸增多,在第12天左右達到峰值。ELISA法檢測發(fā)現(xiàn)實驗組DNT細胞培養(yǎng)液中s TRAIL與對照組未含DNT細胞培養(yǎng)液相比濃度明顯升高(t=27.24,P0.05)。QPCR檢測在6株胰腺癌細結果顯示TRAIL-R1 m RNA在SW1990、PANC-1、BXPC-3、MIA Pa Ca-2、CFPAC-1和Capan-1的相對表達量分別為0.807、1、0.423、0.662、1.470和1.418;TRAIL-R2m RNA在6株細胞中相對表達量低依次為0.744(SW1990)、1(PANC-1)、0.999(BXPC-3)、0.658(MIA Pa Ca-2)、1.949(CFPAC-1)和1.077(Capan-1)。Western blot法檢測TRAIL-R1受體表達發(fā)現(xiàn)胰腺癌細胞系CFPAC-1表達最高,與之在同一水平上還有Capan-1細胞,在PANC-1和BXPC-3中較高,而SW1990、MIAPa Ca-2細胞系中表達非常低甚至不表達;檢測TRAIL-R2發(fā)現(xiàn)了同樣的趨勢,但其中TRAIL-R2在BXPC-3中未見明顯表達。免疫組化發(fā)現(xiàn)TRAIL-R1在胰腺癌組及癌旁組的陽性表達率分別為48%,75%(c2=7.43,P0.05);分析染色的強度胰腺癌組(23%)低于相應的癌旁組織中的陽性表達率(58%)(c2=12.48,P0.05);進一步分析臨床病理資料提示TRAIL-R1的表達與胰腺癌的分化程度(c2=8.60,P0.05)及T分級之間相關(c2=7.26,P0.05)即分化程度越低、T分級越晚TRAIL-R1表達水平越高。另外,我們在分析TRAIL-R2發(fā)現(xiàn),其在胰腺癌組織中染色強度中強陽性率低于相應的癌旁組織(17%,35%,c2=4.38,P0.05),胰腺癌分化程度越低,腫瘤組織中的TRAIL-R2越低(c2=7.704,P0.05)�！窘Y論】外周血來源的DNT細胞可分泌s TRAIL,s TRAIL可與胰腺癌細胞和組織所表達的TRAIL受體結合誘導細胞凋亡,可能是DNT細胞抑制胰腺癌細胞增殖的機制之一。
【關鍵詞】：胰腺癌 DNT細胞 TRAIL-R1 TRAIL-R2
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.9
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本文編號：868064