發(fā)布時間：2017-09-16 17:42

  本文關(guān)鍵詞：NCI-H446型SCLC細(xì)胞雞胚尿囊膜成瘤實(shí)驗(yàn)及其與MMP-9的關(guān)系研究

  更多相關(guān)文章： SCLC細(xì)胞 MMP-9 雞胚絨毛尿囊膜 腫瘤轉(zhuǎn)移

【摘要】：目的：通過將NCI-H446型小細(xì)胞肺癌(Small Cell Lung Cancer, SCLC)細(xì)胞接種至雞胚絨毛尿囊膜,觀察成瘤過程中雞胚中MMP-9含量變化及動態(tài)觀察腫瘤組織及瘤旁的血管形成情況。方法：①.NCI-H446型SCLC細(xì)胞原代培養(yǎng)24h后換液,去除雜質(zhì)及死細(xì)胞后,其余細(xì)胞貼壁良好且形態(tài)正常。對此細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),收集對數(shù)期細(xì)胞備用。②.雞胚尿囊膜SCLC細(xì)胞成瘤模型的建立。③.利用形態(tài)學(xué)方法動態(tài)觀察成瘤過程及瘤旁血管形成情況。④.收集各個不同時間點(diǎn)雞胚血清,通過酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測不同時間點(diǎn)雞胚模型血清中MMP-9的含量。結(jié)果：①. NCI-H446型SCLC傳代培養(yǎng)成功且隨著種植細(xì)胞濃度的增加可以成瘤。②.成功地建立了NCI-H446型SCLC細(xì)胞雞胚絨毛尿囊膜成瘤模型。③.與對照組相比,NCI-H446型SCLC細(xì)胞具有促進(jìn)MMP-9生成的作用。④.MMP-9的含量與SCLC細(xì)胞計(jì)數(shù)成正相關(guān)。5.MMP-9的含量與腫瘤周圍的血管數(shù)目成正相關(guān)。結(jié)論：①.SCLC細(xì)胞雞胚絨毛尿囊膜成瘤模型易于操作、便于控制、易于實(shí)現(xiàn),是研究腫瘤細(xì)胞種植成瘤的較好的動物模型。該模型試驗(yàn)周期短,便于動態(tài)觀察腫瘤的生長及腫瘤血管的生成,對SCLC細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移研究有重要意義。②.隨著種植SCLC細(xì)胞密度的增加,雞胚絨毛尿囊膜上逐漸穩(wěn)定成瘤。當(dāng)種植濃度達(dá)到4×106mL-1時,第三天,可導(dǎo)致雞胚血清中MMP-9的含量明顯升高,第七天達(dá)到最高值,說明SCLC細(xì)胞能通過產(chǎn)生MMP-9導(dǎo)致細(xì)胞的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。對MMP-9的抑制,是未來化療藥物研究的一個重要方向。③.MMP-9的含量與腫瘤周圍毛細(xì)血管的密度有密切關(guān)系。說明,MMP-9可能通過對血管生成的促進(jìn)作用來輔助腫瘤細(xì)胞的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,這種作用的具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：SCLC細(xì)胞 MMP-9 雞胚絨毛尿囊膜 腫瘤轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 中文摘要2-3
• 英文摘要3-7
• 符號說明7-8
• 前言8-11
• 材料與方法11-17
• 實(shí)驗(yàn)設(shè)備12-13
• 實(shí)驗(yàn)方法13-14
• 2.1 NCI-H446型SCLC細(xì)胞的培養(yǎng)13
• 2.2 細(xì)胞的消化、傳代13
• 2.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)13-14
• 2.4 細(xì)胞的凍存14
• 2.5 細(xì)胞的復(fù)蘇14
• 3 雞胚絨毛尿囊膜成瘤模型的建立14-16
• 3.1. 種蛋的選取及孵化14-15
• 3.2. 雞胚絨毛尿囊膜模型的制作15-16
• 4.雞胚血清中MMP-9的檢測16-17
• 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理17
• 結(jié)果17-18
• 討論18-20
• 經(jīng)驗(yàn)與反思20-21
• 參考文獻(xiàn)21-24
• 附表24-32
• 綜述32-41
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 致謝41-42
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄42-43

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本文編號：864510