發(fā)布時間：2017-09-14 15:23

  本文關鍵詞：hTERT調(diào)控Gli1的表達對胃癌侵襲遷移的影響及其分子機制研究

  更多相關文章： Hedgehog通路 Gli1 人端粒酶逆轉錄酶 胃癌 轉移

【摘要】：研究背景胃癌是全世界范圍內(nèi)惡性腫瘤導致死亡的原因之一。2012年Global Cancer Statistic的最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,胃癌每年的預計的新發(fā)病例男性約為631300例,女性約為320300例,而胃癌每年預計的死亡病例男性約為469000例,女性約為254100例[1,2]。盡管現(xiàn)代的診療技術對胃癌的診斷,治療和預后有一定的提高,但由于胃癌的轉移發(fā)生率較高,因此胃癌的預后仍然很差,5年生存率在所有癌癥中仍然較低[3]。進化保守的Hedgehog信號通路在早期胚胎的發(fā)育,成年組織穩(wěn)態(tài)的維持以及損損傷修復中都發(fā)揮著十分關鍵的作用[4-8]。Hedgehog信號通路的異常與多種腫瘤的發(fā)生相關,這其中包括成神經(jīng)管細胞瘤,橫紋肌肉瘤,黑色素瘤,基底細胞癌,乳腺癌,肺癌,肝癌,前列腺癌,胰腺癌與胃癌[9,10]。Gli1是Hedgehog信號通路中重要的轉錄因子,能夠調(diào)控Hh通路下游重要的靶基因[11-15]。本課題研究小組前期研究發(fā)現(xiàn),胃癌組織中Gli1顯著高表達,并且與淋巴結的轉移和遠端轉移成正相關,但其具體的細胞學機制并不清楚。另外還發(fā)現(xiàn)人端粒酶逆轉錄酶(Human telomerase reverse transcriptase,h TERT)在胃癌組織中也高表達,更重要的是,我們發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)h TERT與Gli1在胃癌組織中的表達兩者之間存在明顯的正相關,但兩者之間具體的調(diào)控關系并不清楚。目的本課題旨在探究Hedghog信號通路重要的轉錄因子Gli1在胃癌中發(fā)生發(fā)展中的作用機制,觀察hTERT對Gli1表達調(diào)控的影響,并進一步探討h TERT促進胃癌細胞侵襲轉移的分子機制,為基于h TERT的胃癌治療提供理論依據(jù)。方法1.構建siRNA干擾胃癌細胞株SGC-7901細胞Gli的表達,q RT-PCR和western blot檢測Gli1 m RNA和蛋白的表達水平。劃痕實驗和Transwell實驗檢測共轉染hTERT與siRNA后SGC-7901細胞的侵襲遷移能力。2.在胃癌細胞株SGC-7901中過表達h TERT,檢測h TERT和Gli1的mRNA和蛋白表達水平。構建含有Gli1啟動子序列的熒光素酶報告基因載體。共轉染h TERT載體和PGL3-basic-Gli1熒光素酶報告基因載體,檢測轉染后SGC-7901細胞的相對熒光素酶活性。結果1.轉染si RNA-Gli降低了Gli mRNA和蛋白表達水平。2.轉染si RNA-Gli顯著降低了過表達hTERT胃癌細胞株SGC-7901細胞在劃痕實驗中的遷移速度。3.轉染si RNA-Gli顯著降低了過表達hTERT胃癌細胞株SGC-7901細胞在Transwell實驗中的穿膜數(shù)目。4.過表達hTERT上調(diào)了胃癌細胞株SGC-7901細胞中hTERT和Gli1的mRNA和蛋白表達水平。5.過表達h TERT增強Gli1啟動子熒光素酶的相對活性。結論1.hTERT可通過促進Gli1的表達并進而促進胃癌細胞的侵襲與遷移。2.hTERT能夠正向調(diào)控Gli1的表達,其調(diào)控方式是直接靶向作用于Gli1的啟動子區(qū)域。
【關鍵詞】：Hedgehog通路 Gli1 人端粒酶逆轉錄酶 胃癌 轉移
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 縮略詞表4-6
• Abstract6-8
• 摘要8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 hTERT調(diào)控Gli1對胃癌細胞侵襲遷移的影響12-23
• 2.1 引言12
• 2.2 材料和方法12-18
• 2.3 實驗結果18-22
• 2.4 討論22-23
• 第三章 hTERT在胃癌中調(diào)控Gli1的分子機制研究23-39
• 3.1 引言23
• 3.2 材料與方法23-34
• 3.3 實驗結果34-37
• 3.4 討論37-39
• 全文總結39-40
• 參考文獻40-45
• 文獻綜述 Hedgehog-Gli信號通路與胃癌的研究進展45-55
• 參考文獻50-55
• 附件55-56
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文56-57
• 致謝57

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本文編號：850780