本文關(guān)鍵詞：鈉鈣交換蛋白（NCX1）在食管鱗狀細(xì)胞癌上的表達(dá)及其與臨床參數(shù)的關(guān)系

  更多相關(guān)文章： NCX1 食管鱗狀細(xì)胞癌 RT-PCR 鈣離子 Western blot

【摘要】：目的:食管癌是我國(guó)常見的消化道惡性腫瘤之一,由于其早期癥狀不明顯,當(dāng)病人出現(xiàn)癥狀就診時(shí)已處于中晚期,已失去手術(shù)根治治療的可能,嚴(yán)重危害人們的身體健康,但其發(fā)病的分子機(jī)制目前還不清楚。上個(gè)世紀(jì)70年代,Reuter和Seitz在心肌缺血再灌注損傷研究過(guò)程中首次在豚鼠心肌中發(fā)現(xiàn)鈉鈣交換蛋白(Na+/Ca2+exchanger,NCX1)。在未來(lái)的數(shù)十年里,人們?cè)谛募∪毖俟嘧⒓澳X缺血上,對(duì)NCX進(jìn)行了大量的研究。NCX1是一非ATP依賴的雙向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,廣泛存在于人體各種細(xì)胞膜表面。它有兩種工作模式:其一是Ca2+外流模式,其二為Ca2+內(nèi)流模式。NCX1轉(zhuǎn)運(yùn)的比例是3個(gè)Na+和1個(gè)Ca2+。細(xì)胞正常情況下,NCX1啟動(dòng)正向的轉(zhuǎn)運(yùn)模式,從細(xì)胞中排除鈣離子,轉(zhuǎn)入鈉離子。人們研究中發(fā)現(xiàn),當(dāng)腦組織及心肌組織缺血缺氧的情況下,NCX1會(huì)啟用其反向轉(zhuǎn)運(yùn)模式[1,2,3,4],此外,細(xì)胞在缺血缺氧的情況下,會(huì)發(fā)生糖酵解來(lái)供能,產(chǎn)生乳酸鹽和氫離子,氫離子被鈉氫交換蛋白(NHX1)排除胞外,同時(shí)轉(zhuǎn)入鈉離子,鈉離子濃度的上升,也刺激NCX1反向模式的啟動(dòng),最終導(dǎo)致明顯的增加鈣離子的內(nèi)流,使心肌或腦細(xì)胞發(fā)生功能障礙,甚至調(diào)亡。NCX1在細(xì)胞生命活動(dòng)中究竟啟動(dòng)哪種模式,主要取決于細(xì)胞膜倆側(cè)的Ca2+、Na+、H+離子的濃度[5],另外缺血缺氧產(chǎn)生的自由基使NCX1啟動(dòng)反向轉(zhuǎn)運(yùn)模式[3]。我們知道,腫瘤組織由于腫瘤細(xì)胞增殖速度要快于其再生血管的速度,造成腫瘤組織中血管分布不均,形成腫瘤組織中的缺氧區(qū),有研究表明腫瘤組織中有超過(guò)50%以上的缺氧區(qū),可能是腫瘤細(xì)胞對(duì)低氧環(huán)境適應(yīng)的原因,其優(yōu)先利用糖酵解而非氧化磷酸來(lái)獲取ATP,即使處于有氧環(huán)境中也是如此,腫瘤這種能量代謝特征早在上個(gè)世紀(jì)20年代由化學(xué)家Warburg首次發(fā)現(xiàn),并命名為Warburg效應(yīng)[6]。腫瘤糖酵解產(chǎn)生的乳酸鹽及氫離子[7-9],經(jīng)研究顯示氫離子同樣經(jīng)NHX1排除,并轉(zhuǎn)入鈉離子,細(xì)胞內(nèi)鈉離子濃度上升。大量研究證實(shí)NHX1在多種腫瘤上表達(dá)上調(diào)[10-12]。至此我們發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞有著激活NCX1反向轉(zhuǎn)運(yùn)模式、引起鈣離子內(nèi)流的先天自身?xiàng)l件,即缺氧和特殊的糖酵解代謝供能方式。由于鈣離子內(nèi)流在細(xì)胞生命周期中的作用十分豐富。鈣離子的內(nèi)流在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到了重要作用,并在前列腺癌、乳腺癌等腫瘤上得到了證明[13-16]。有研究已經(jīng)證實(shí)NCXl通過(guò)調(diào)節(jié)鈣離子的內(nèi)流參與了胰腺癌的發(fā)生及發(fā)展,那么NCX1在食管鱗狀細(xì)胞癌生長(zhǎng)過(guò)程中的活性及表達(dá)情況、能否引起鈣離子的內(nèi)流,內(nèi)流的鈣離子又參與什么生命活動(dòng)?這些問(wèn)題目前還未見有關(guān)報(bào)道。經(jīng)查閱大量文獻(xiàn)我們發(fā)現(xiàn)食管癌以糖酵解的供能方式非�；钴S[17],且NHX1與食管癌的發(fā)展也有著密切關(guān)系[18]。本研究初步目的:鈉鈣交換蛋白(NCX1)在食管鱗狀細(xì)胞癌上的表達(dá)情況及其與臨床參數(shù)的關(guān)系。方法:收集79例手術(shù)切除的食管鱗狀細(xì)胞癌組織及癌旁正常組織,分別用RT-PCR及Western blot技術(shù)來(lái)見檢測(cè)NCX1的m RNA及蛋白表達(dá)情況,利用免疫組化技術(shù)檢測(cè)ncx1的表達(dá)區(qū)域及表達(dá)量情況,并將癌組織與正常組織的NCX1蛋白及m RNA的表達(dá)情況與相關(guān)臨床參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,本研究資料統(tǒng)計(jì)方法:采用SPSS13.0版軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用χ2或校正χ2檢驗(yàn)。結(jié)果:1 NCX1的m RNA在食管鱗狀細(xì)胞癌組織和相應(yīng)的癌旁正常食管組織中的表達(dá)及其與食管鱗狀細(xì)胞癌患者臨床病理學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系79例食管鱗狀細(xì)胞癌組織與相應(yīng)的癌旁正常食管組織中均見到NCX1的m RNA的表達(dá),但79例食管鱗狀細(xì)胞癌患者中,52例患者癌組織NCX1的m RNA的表達(dá)水平明顯高于與其相對(duì)應(yīng)的癌旁正常食管組織,27例患者癌組織NCX1的m RNA的表達(dá)水平與其相對(duì)應(yīng)的癌旁正常食管組織相比,未見明顯增高。異常增高表達(dá)率達(dá)65.8%。NCX1 m RNA的表達(dá)水平與食管鱗狀細(xì)胞癌患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小、吸煙史、腫瘤生長(zhǎng)部位呈正相關(guān)。臨床分期高的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達(dá)率高于臨床分期低的患者(χ2=9.712,P=0.008);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達(dá)率要高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(χ2=6.381,P=0.012);腫瘤體大的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達(dá)率高于腫瘤體較小的患者(χ2=9.465,P=0.009);有吸煙史的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達(dá)率高于無(wú)吸煙史的患者(χ2=7.098,P=0.008);此外下、中段食管生長(zhǎng)腫瘤的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達(dá)率高于上段食管腫瘤患者(χ2=10.26,P=0.006);NCX1 m RNA的表達(dá)水平與食管鱗狀細(xì)胞癌患者的年齡(χ2=1.649,P=0.199)、性別(χ2=0.238,P=0.626)、腫瘤分化程度(χ2=3.365,P=0.186)、飲酒史(χ2=0.201,P=0.654)均無(wú)相關(guān)性。2 NCX1的蛋白在食管鱗狀細(xì)胞癌組織和相應(yīng)的癌旁正常食管組織中的表達(dá)及其與食管鱗狀細(xì)胞癌患者臨床病理學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系免疫組化結(jié)果顯示NCX1蛋白主要表達(dá)在細(xì)胞膜上,79例食管鱗狀細(xì)胞癌組織與相應(yīng)的癌旁正常食管組織中均見到NCX1蛋白的表達(dá),但79例食管鱗狀細(xì)胞癌患者中,53例患者癌組織NCX1蛋白的表達(dá)水平明顯高于與其相對(duì)應(yīng)的癌旁正常食管組織,26例患者癌組織NCX1蛋白的表達(dá)水平與其相對(duì)應(yīng)的癌旁正常食管組織相比,未見明顯改變。異常增高表達(dá)率達(dá)67.08%。NCX1蛋白的表達(dá)水平與食管鱗狀細(xì)胞癌患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小、吸煙史、腫瘤生長(zhǎng)部位呈正相關(guān)。臨床分期高的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達(dá)率高于臨床分期低的患者(χ2=15.332,P=0.000);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達(dá)率要高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(χ2=7.905,P=0.005);腫瘤體大的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達(dá)率高于腫瘤體較小的患者(χ2=10.418,P=0.005);有吸煙史的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達(dá)率高于無(wú)吸煙史的患者(χ2=4.665,P=0.031);此外下、中段食管生長(zhǎng)腫瘤的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達(dá)率高于上段食管腫瘤患者(χ2=6.706,P=0.035);NCX1蛋白的表達(dá)水平與食管鱗狀細(xì)胞癌患者的年齡(χ2=1.070,P=0.301)、性別(χ2=0.145,P=0.703)、腫瘤分化程度(χ2=0.869,P=0.648)、飲酒史(χ2=0.051,P=0.821)均無(wú)相關(guān)性。結(jié)論:1 NCX1在食管鱗狀細(xì)胞癌上的表達(dá)上調(diào)可能是食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展中的一個(gè)重要機(jī)制。2 NCX1可能是通過(guò)提高細(xì)胞中鈣的含量,打破了細(xì)胞中的原有的鈣平衡,來(lái)實(shí)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的增值、轉(zhuǎn)移的。3 NCX1在食管鱗狀細(xì)胞癌的表達(dá)水平情況可能與臨床預(yù)后有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：NCX1 食管鱗狀細(xì)胞癌 RT-PCR 鈣離子 Western blot
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.1
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-12
• 英文縮寫12-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-25
• 結(jié)果25-27
• 附圖27-31
• 附表31-34
• 討論34-37
• 結(jié)論37
• 參考文獻(xiàn)37-43
• 綜述腫瘤鈣信號(hào)調(diào)節(jié)機(jī)制的改變與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展43-55
• 參考文獻(xiàn)49-55
• 致謝55-56
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷56

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉劍;王峰;何煒;王留興;樊青霞;;鈉氫交換蛋白1基因在體外對(duì)食管癌KYSE-70細(xì)胞增殖和侵襲作用的影響[J];腫瘤;2013年02期

2 James T Taylor;Jonathan E Pottle;Kevin Lee;Alun R Wang;Stephenie G Yi;Jennifer A S Scruggs;Suresh S Sikka;;Calcium signaling and T-type calcium channels in cancer cell cycling[J];World Journal of Gastroenterology;2008年32期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 于蓮珍;消化道腫瘤（胃癌、食管癌）的代謝特征和代謝標(biāo)志物的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：848441