本文關鍵詞：白花丹素體內外抗Lewis肺癌的效果及機制研究

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【摘要】：目的:研究白花丹素(Plumbagin,PL)對Lewis肺癌的抑制作用。方法:1、CCK-8檢測白花丹素對Lewis肺癌(Lewis lung carc,LLC)細胞的增殖影響;2、流式細胞儀檢測Lewis肺癌細胞的凋亡率;3、qRT-PCR檢測Lewis肺癌細胞內VEGF mRNA表達水平;4、Western blot檢測Lewis肺癌細胞內Bcl-2和VEGF蛋白的表達水平;5、使用30只C57BL/6近交系小鼠,建立Lewis肺癌小鼠模型;造模后,分為5組,每組6只,分別使用生理鹽水、白花丹素(分小、中、大3個劑量組)及環(huán)磷酰胺(CTX)作用于動物模型;觀察各組腫瘤體積大小,稱取瘤重,并計算抑瘤率,應用免疫組化法檢測腫瘤組織VEGF表達情況。結果:1、CCK-8結果顯示白花丹素對Lewis肺癌細胞有明顯的抑制作用,各藥物濃度組與對照組比較(P0.05);2、當濃度為2.5μmol/L,5μmol/L和10μmol/L的白花丹素干擾Lewis肺癌細胞24h,細胞的凋亡率為(4.84±0.54)%、(10.37±1.15)%、(20.27±2.51)%,與空白對照組(2.45±1.09)%比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);3、白花丹素干擾Lewis肺癌細胞后VEGF mRNA水平與對照組比較明顯下調(P0.05);4、Western bolt結果顯示不同濃度白花丹素(2.5、5、10μmol/L)對Lewis肺癌細胞中Bcl-2和VEGF蛋白表達與對照組相比(P0.05),各藥物組間比較(P0.05);5、在瘤株接種的第10、13、16、19天,白花丹素小、中、大劑量組及CTX組的腫瘤體積與對照組比較(P0.05),白花丹素各劑量組之間腫瘤體積比較(P0.05);白花丹素(小、中、大劑量組)及CTX組對荷Lewis肺癌小鼠的腫瘤生長抑制率分別為14.48%、31.47%、48.27%、57.76%,各組之間瘤重的比較(F=33.253,P=0.000),白花丹素各劑量組之間瘤重比較(P0.05);對照組、白花丹素(小、中、大劑量組)及CTX組腫瘤組織中VEGF蛋白表達水平比較采用單因素方差分析(F=153.52,P=0.000),各藥物組與對照組比較(P0.05)。結論:⑴體外:白花丹素抑制Lewis肺癌細胞的增殖,下調Bcl-2、VEGF蛋白的表達,并誘導Lewis肺癌細胞凋亡。⑵體內:白花丹素下調Lewis肺癌腫瘤組織內VEGF蛋白表達,并延緩腫瘤的生長,結合體外實驗證實白花丹素對Lewis肺癌具有抑制作用。
【關鍵詞】：白花丹素 Lewis肺癌細胞 凋亡 肺癌移植瘤 VEGF Bcl-2
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 實驗材料與方法12-21
• 2.1 實驗材料12-13
• 2.1.1 動物及細胞株12
• 2.1.2 主要試劑和儀器12
• 2.1.3 實驗材料12-13
• 2.1.4 細胞培養(yǎng)相關試劑的配制13
• 2.2 實驗方法13-21
• 2.2.1 Lewis肺癌細胞的培養(yǎng)和傳代13-14
• 2.2.2 CCK-8 法檢測細胞的增殖14
• 2.2.3 AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡率14
• 2.2.4 qRT-PCR檢測VEGF mRNA的表達14-17
• 2.2.5 Western blot檢測Bcl-2、VEGF蛋白表達17-18
• 2.2.6 免疫檢測及分析18-19
• 2.2.7 建立荷Lewis肺癌小鼠模型、分組及給藥19
• 2.2.8 觀察各組荷Lewis肺癌小鼠生長情況19
• 2.2.9 計算腫瘤生長抑制率19
• 2.2.10 采用免疫組化法檢測腫瘤組織內VEGF蛋白的表達19-20
• 2.2.11 統(tǒng)計學方法20-21
• 第3章 結果21-28
• 3.1 白花丹素對Lewis肺癌細胞增殖的影響21-22
• 3.2 白花丹素誘導Lewis肺癌細胞凋亡的影響22-23
• 3.3 白花丹素對Lewis肺癌細胞VEGF mRNA表達的影響23-24
• 3.4 白花丹素對Lewis肺癌細胞中Bcl-2、VEGF蛋白表達的影響24-25
• 3.5 白花丹素對荷Lewis肺癌小鼠腫瘤體積的影響25
• 3.6 白花丹素對荷Lewis肺癌小鼠腫瘤質量的影響25-26
• 3.7 白花丹素對荷Lewis肺癌小鼠VEGF表達的影響26-28
• 第4章 討論28-31
• 第5章 結論31-32
• 第6章 展望32-33
• 致謝33-34
• 參考文獻34-36
• 攻讀學位期間的研究成果36-37
• 綜述 白花丹素抗腫瘤機制研究37-42
• 參考文獻41-42

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