本文關(guān)鍵詞：葉酸受體靶向型熒光碳點(diǎn)在腫瘤細(xì)胞成像中的應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 熒光碳點(diǎn) 靶向 腫瘤細(xì)胞成像 PEI 葉酸受體

【摘要】：近年來(lái),熒光碳點(diǎn)(Carbon Dots,CDs)因其相對(duì)于有機(jī)熒光染料和傳統(tǒng)的量子點(diǎn)生物毒性低且抗光漂白等優(yōu)異特性,而在材料、化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域備受關(guān)注。本論文基于葉酸(FA)對(duì)碳點(diǎn)(CDs)熒光的猝滅作用,采用聚合物包裹非共價(jià)鍵連接碳點(diǎn)和葉酸(FA)的策略,制備出靶向葉酸受體的turn-on型熒光探針FA-PEI-CDs,發(fā)展了一種高效快速靶向葉酸受體過(guò)量表達(dá)癌癥細(xì)胞的檢測(cè)方法,用于葉酸受體過(guò)量表達(dá)癌癥細(xì)胞的成像分析。主要內(nèi)容和結(jié)果如下:1.CDs、PEI-CDs、FA-PEI-CDs的制備及表征:通過(guò)一步水熱合成法制備熒光碳點(diǎn),將其表面包裹上帶正電荷的PEI,最后將葉酸通過(guò)靜電作用吸附在PEI-CDs表面,制得turn-on型的熒光探針FA-PEI-CDs。利用TEM、Zeta電勢(shì)、AFM、IR、FL、UV等手段對(duì)它們的形貌、粒徑、表面電位、分散性、紫外吸收和熒光光譜等性能進(jìn)行分析表征,驗(yàn)證了PEI和葉酸確實(shí)通過(guò)靜電作用包裹在碳點(diǎn)上,初步驗(yàn)證了葉酸/葉酸受體對(duì)PEI-CDs熒光的猝滅與恢復(fù)特性。2.葉酸/葉酸受體對(duì)PEI-CDs熒光的猝滅與恢復(fù)性能:系統(tǒng)考察了不同濃度葉酸FA對(duì)PEI-CDs的熒光淬滅響應(yīng)性能,以及不同濃度葉酸受體FR對(duì)FA-PEI-CDs已猝滅熒光的恢復(fù)響應(yīng)性能。優(yōu)化了pH、鹽濃度、反應(yīng)時(shí)間、探針濃度等實(shí)驗(yàn)條件,并繪制線性響應(yīng)曲線。初步探究了葉酸猝滅碳點(diǎn)熒光的原因。發(fā)現(xiàn)包裹PEI后的PEI-CDs仍然發(fā)光,表面結(jié)合葉酸后的FA-PEI-CDs熒光猝滅,但其熒光可以被葉酸受體重新恢復(fù)。是由于葉酸受體與葉酸之間有更強(qiáng)的親和力,使葉酸從納米粒子復(fù)合物上解吸下來(lái),從而使PEI-CDs重新恢復(fù)熒光。3.FA-PEI-CDs對(duì)葉酸受體高表達(dá)癌癥細(xì)胞的成像分析:將FA-PEI-CDs與葉酸受體表達(dá)不同的HeLa、HepG2和MCF-7癌癥細(xì)胞一同孵育,激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞熒光成像情況。結(jié)果表明,FA-PEI-CDs與細(xì)胞孵育10min即可快速、特異性的對(duì)葉酸受體過(guò)量表達(dá)的癌癥細(xì)胞進(jìn)行靶向熒光標(biāo)記并成像。而之前的研究中都需要幾個(gè)小時(shí)甚至幾天的時(shí)間對(duì)細(xì)胞進(jìn)行孵育,非常不利于生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用。本論文的研究結(jié)果為癌癥細(xì)胞靶向、快速熒光標(biāo)記成像分析,提供了更加有效的方法,有望在生物醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)研究中獲得應(yīng)用。
【關(guān)鍵詞】：熒光碳點(diǎn) 靶向 腫瘤細(xì)胞成像 PEI 葉酸受體
【學(xué)位授予單位】：北京理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：O657.3;R730.4
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第1章 緒論9-20
• 1.1 引言9
• 1.2 癌癥檢測(cè)與成像9-12
• 1.2.1 癌癥概述9-10
• 1.2.2 腫瘤標(biāo)志物10-12
• 1.2.3 腫瘤的診斷成像技術(shù)12
• 1.3 熒光探針的發(fā)展及制備方法12-17
• 1.3.1 熒光分子探針12-13
• 1.3.2 常用的熒光分子標(biāo)記物13-14
• 1.3.3 靶向性熒光碳點(diǎn)的制備策略14-17
• 1.4 選題依據(jù)及目的17-18
• 1.5 研究方案和研究?jī)?nèi)容18-20
• 第2章 CDs、PEI-CDs和FA-PEI-CDs的制備及表征20-29
• 2.1 引言20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分20-22
• 2.2.1 儀器及試劑20-21
• 2.2.2 CDs、PEI-CDs和FA-PEI-CDs的制備21
• 2.2.3 CDs、PEI-CDs和FA-PEI-CDs的表征方法21-22
• 2.3 結(jié)果與討論22-27
• 2.3.1 TEM分析22-24
• 2.3.2 Zeta電勢(shì)分析24
• 2.3.3 AFM分析24-25
• 2.3.4 IR分析25-26
• 2.3.5 UV/Vis吸收光譜和FL熒光光譜分析26-27
• 2.4 小結(jié)27-29
• 第3章 葉酸/葉酸受體對(duì)PEI-CDs熒光性能的影響29-42
• 3.1 引言29-30
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分30-31
• 3.2.1 儀器與試劑30
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法30-31
• 3.3 結(jié)果與討論31-40
• 3.3.1 PEI-CDs的穩(wěn)定性測(cè)試31-33
• 3.3.1.1 pH對(duì)PEI-CDs的熒光性能的影響31-32
• 3.3.1.2 鹽濃度對(duì)PEI-CDs熒光的影響32
• 3.3.1.3 儲(chǔ)存時(shí)間對(duì)PEI-CDs熒光的影響32-33
• 3.3.2 葉酸對(duì)PEI-CDs熒光性能測(cè)試33-35
• 3.3.3 葉酸受體對(duì)FA-PEI-CDs熒光性能測(cè)試35-38
• 3.3.4 FA-PEI-CDs選擇性測(cè)試38
• 3.3.5 FA對(duì)PEI-CDs熒光猝滅的機(jī)理探究38-40
• 3.4 小結(jié)40-42
• 第4章 FA-PEI-CDs對(duì)葉酸受體高表達(dá)癌細(xì)胞的靶向標(biāo)記42-46
• 4.1 引言42
• 4.2 實(shí)驗(yàn)部分42-43
• 4.2.1 儀器與試劑42-43
• 4.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)43
• 4.2.3 成像分析43
• 4.3 結(jié)果與討論43-44
• 4.4 小結(jié)44-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文與研究成果清單52-53
• 致謝53

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本文編號(hào)：823801