本文關鍵詞：孟魯司特鈉對雄激素抵抗前列腺癌的作用及凋亡相關蛋白的研究

  更多相關文章： 前列腺癌 孟魯司特鈉 細胞增殖 細胞凋亡 Wnt/β-catenin

【摘要】：研究目的：研究孟魯司特鈉水合物對人前列腺癌細胞系的增殖、形態(tài)、凋亡的影響及相關機制,為臨床上雄激素抵抗性前列腺癌的治療提供新的藥物選擇方法及初步的實驗依據(jù)。方法：采用CCK-8法檢測孟魯司特鈉對于人雄激素抵抗性前列腺癌DU145、PC3細胞系,人雄激素依賴性前列腺癌LNCaP細胞系、人前列腺上皮RWPE-1細胞系細胞的生長抑制作用并計算其IC50值。在不同濃度的孟魯司特鈉作用細胞后,在普通光鏡和透射電鏡下觀察細胞形態(tài)變化；利用流式細胞術檢測孟魯司特鈉對前列腺癌細胞的凋亡作用,利用實時熒光定量PCR和Western blot技術對WNT5A、β-catenin、E-cadherin基因的mRNA表達和蛋白表達情況進行檢測。結果：(1)CCK-8實驗結果顯示,孟魯司特鈉對DU145細胞的IC50約為2.7μg/ml,PC3細胞的IC50約為3μg/ml,對LNCaP細胞的IC50約為7μg/ml,對RWPE-1細胞的IC50約為5 μg/ml。(2)孟魯司特鈉作用前列腺癌細胞后,在普通光鏡下觀察,空白組的前列腺癌細胞體積較大,核大類圓形,可見明顯核仁,細胞間連接緊密；藥物干擾組的細胞皺縮、變圓、脫落。在透射電鏡下觀察,藥物干預組的PC3、DU145、LNCaP細胞核固縮、染色質團塊狀、邊集明顯,核膜溶解,部分細胞內可見典型的凋亡小體。(3)流式細胞術實驗結果顯示,孟魯司特鈉作用后的DU145.PC3和LNCaP細胞的凋亡率均隨著藥物的濃度增高升高,并與藥物作用時間增加呈正比。其中,對DU145、PC3細胞的影響較LNCaP細胞更強。(4)實時熒光定量PCR結果顯示,對比空白組,48小時后的用藥組中,E-cadherin基因在DU145、PC3和LNCaP細胞中的表達均為上調,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。WNT5A基因在DU145細胞中的表達為上調,差異有統(tǒng)計學意義(p0.01),而在PC3與LNCaP細胞中的表達均為下調(p0.05)。 β-catenin基因在DU145細胞的表達與空白組相比,3μg/ml組有差異(p0.01)；在PC3與LNCaP細胞中的表達均為上調,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。(5) Western blot結果顯示,用藥48小時后,在PC3細胞中,3ug/ml組的E-cadherin蛋白的表達有統(tǒng)計學差異(p0.05)E-cadherin蛋白在DU145、 LNCaP細胞中的表達無統(tǒng)計學差異。β-catenin蛋白在DU145、LNCaP細胞中的表達,空白組與3ug/ml組相比有統(tǒng)計學差異(p0.01)。WNT5A蛋白在DU145細胞的1.5ug/ml組表達上調,對比于空白組差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)；在PC3細胞的1.5ug/ml組、3ug/ml組表達下調,相對于空白組有統(tǒng)計學差異(p0.01)；在LNCaP細胞的1.5ug/ml組中相對于空白組表達下調,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)結論：孟魯司特鈉對前列腺癌細胞生長有抑制作用,促使前列腺癌細胞發(fā)生凋亡。孟魯司特鈉對雄激素抵抗性前列腺癌DU145、PC3細胞的作用較人雄激素依賴性前列腺癌LNCaP細胞更明顯,可能通過干擾Wnt/β-catenin通路的信號傳遞,調控相關基因與蛋白的表達。
【關鍵詞】：前列腺癌 孟魯司特鈉 細胞增殖 細胞凋亡 Wnt/β-catenin
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 個人簡歷3-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-20
• 參考文獻16-20
• 第一部分 孟魯司特鈉對人前列腺癌細胞及人正常前列腺上皮細胞增殖的影響20-27
• 1. 材料與方法20-22
• 2. 結果22-24
• 3. 討論24-25
• 4. 小結25
• 參考文獻25-27
• 第二部分 孟魯司特鈉對人前列腺癌細胞及人正常前列腺上皮細胞形態(tài)的影響27-37
• 1. 材料與方法27-29
• 2. 結果29-34
• 3. 討論34-35
• 4. 小結35-36
• 參考文獻36-37
• 第三部分 孟魯司特鈉對前列腺癌細胞凋亡的影響37-45
• 1 材料與方法37-39
• 2. 結果39-42
• 3. 討論42-43
• 4. 小結43
• 參考文獻43-45
• 第四部分 孟魯司特鈉對前列腺癌細胞相關基因及蛋白表達的影響45-60
• 1. 材料與方法45-52
• 2. 結果52-54
• 3. 討論54-56
• 4. 小結56
• 參考文獻56-60
• 縮略詞簡表60-62
• 綜述62-76
• 一. 前列腺癌的研究現(xiàn)狀62-64
• 二. 虛擬篩選技術與生物信息數(shù)據(jù)庫建設的進展64-65
• 三. 孟魯司特鈉的研究進展65
• 四. 前列腺癌與E-cadherin,WNT5A,β-catenin蛋白的關系研究進展65-69
• 參考文獻69-76
• 致謝76-77
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文及成果77

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳瀛;楊健;;孟魯司特鈉合成路線圖解[J];中國醫(yī)藥工業(yè)雜志;2009年01期

2 李學艷;周曉英;;孟魯司特鈉致精神異常1例[J];醫(yī)藥導報;2011年01期

3 張瑋;蔣麗華;;孟魯司特鈉體外抑菌試驗的研究[J];中國藥物與臨床;2011年02期

4 袁麗君;;孟魯司特鈉防治小兒喘息性支氣管肺炎的臨床研究[J];中外醫(yī)療;2013年21期

5 劉萍萍;杜紅星;;孟魯司特鈉用于小兒毛細支氣管炎的可行性分析[J];中國醫(yī)藥導刊;2013年08期

6 唐年娥;;用孟魯司特鈉治療兒童咳嗽變異性哮喘的療效觀察[J];當代醫(yī)藥論叢;2014年11期

7 陳金月;茹愛珍;;患兒遺尿與孟魯司特鈉咀嚼片有關[J];藥物不良反應雜志;2007年03期

8 涂亞蘭;;孟魯司特鈉治療兒童咳嗽變異型哮喘療效觀察[J];中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥;2007年08期

9 歐敏;王棋;徐武夷;任冰穩(wěn);;孟魯司特鈉治療老年慢性喘息性支氣管炎療效觀察[J];實用老年醫(yī)學;2008年06期

10 陶麗;戚擁軍;馮海軍;孫淑霞;;孟魯司特鈉佐治兒童咳嗽變異性哮喘的臨床體會[J];中國實用醫(yī)藥;2009年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄭浩;華雪玲;徐琳玲;鄭耀輝;林小瓔;劉敏珍;;孟魯司特鈉治療兒童咳嗽變異性哮喘臨床觀察[A];中華醫(yī)學會第二次全國變態(tài)反應學術會議論文匯編[C];2004年

2 馬春英;;孟魯司特鈉治療兒童咳嗽變異性哮喘45例臨床觀察[A];中華醫(yī)學會第十七次全國兒科學術大會論文匯編（下冊）[C];2012年

3 溫志華;姚煦;;孟魯司特鈉在皮膚科的應用[A];中華醫(yī)學會2011年全國變態(tài)反應學術會議論文集[C];2011年

4 郭建萍;吳慶莉;林榮軍;王高燕;;孟魯司特鈉治療兒童咳嗽變異性哮喘的效果[A];中華醫(yī)學會第十七次全國兒科學術大會論文匯編（下冊）[C];2012年

5 郭建萍;吳慶莉;林榮軍;王高燕;;孟魯司特鈉治療兒童咳嗽變異性哮喘的效果[A];中華醫(yī)學會第十三屆全國兒科呼吸學術會議論文匯編[C];2012年

6 謝建春;敖日影;孫慶生;倪孔守;;孟魯司特鈉治療支氣管哮喘臨床療效觀察[A];中華醫(yī)學會第七屆全國哮喘學術會議暨中國哮喘聯(lián)盟第三次大會論文匯編[C];2010年

7 徐建新;;孟魯司特鈉治療小兒咳嗽變異性哮喘的臨床觀察[A];2011年浙江省醫(yī)學會兒科學分會學術年會暨兒內科疾病診治新進展國家級學習班論文匯編[C];2011年

8 張源;;黃芪顆粒和孟魯司特鈉治療兒童哮喘療效觀察[A];第十一次全國中西醫(yī)結合兒科學術會議論文匯編[C];2004年

9 趙子充;蔣琦;潘立瑾;王玉芳;;孟魯司特鈉治療咳嗽變異性哮喘效果觀察[A];第六屆江浙滬兒科學術會議暨兒科學基礎與臨床研究進展學術班論文匯編[C];2009年

10 張峰;姚紅兵;;孟魯司特鈉治療兒童腺樣體肥大的臨床療效觀察[A];中華醫(yī)學會第十三次全國耳鼻咽喉——頭頸外科學術會議論文匯編[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 齡訊;加拿大警示孟魯司特鈉導致的精神科不良反應[N];中國醫(yī)藥報;2010年

2 吳同林　記者 呂曉明;醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)十大項目建設進展迅速[N];牡丹江日報;2010年

3 伊默;ICS加孟魯司特鈉抗炎效果更好[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

4 王彩娟;FDA批準默克的孟魯司特鈉擴大適應癥[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳珊;白三烯受體拮抗劑孟魯司特鈉對異丙腎上腺素所致大鼠心肌損傷的保護作用[D];浙江大學;2003年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 任中煒;孟魯司特鈉合成方法研究[D];浙江大學;2014年

2 曹旭;孟魯司特鈉聯(lián)合舒利迭在哮喘慢阻肺重疊綜合征治療中的療效觀察[D];延安大學;2016年

3 陳盤余;孟魯司特鈉對雄激素抵抗前列腺癌的作用及凋亡相關蛋白的研究[D];廣西醫(yī)科大學;2016年

4 顧大業(yè);孟魯司特鈉口崩片的制備工藝及質量研究[D];安徽中醫(yī)藥大學;2015年

5 馮瑩;孟魯司特鈉制劑及質量控制研究[D];河南大學;2012年

6 王玉亮;孟魯司特鈉薄膜衣片的研究[D];華中科技大學;2012年

7 余思捷;孟魯司特鈉聯(lián)合吸入糖皮質激素治療兒童咳嗽變異性哮喘的臨床研究[D];重慶醫(yī)科大學;2014年

8 趙艷;孟魯司特鈉治療慢性阻塞性肺疾病的系統(tǒng)評價[D];蘭州大學;2013年

9 李靜潔;定喘湯加減聯(lián)合孟魯司特鈉治療小兒咳嗽變異性哮喘的臨床研究[D];河北醫(yī)科大學;2014年

10 魯斌;穴位埋線聯(lián)合孟魯司特鈉治療小兒CVA療效研究[D];河南中醫(yī)學院;2015年

，

本文編號：803111