本文關(guān)鍵詞：Hsa-miR-146a通過(guò)抑制NF-κB通路誘導(dǎo)去勢(shì)抵抗性前列腺癌凋亡的研究

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【摘要】：目的：研究表明hsa-miR-146a可能與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān),本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)探討hsa-miR-146a對(duì)去勢(shì)抵抗性前列腺癌細(xì)胞株DU145及PC3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,鑒定hsa-miR-146a調(diào)控的下游靶基因,系統(tǒng)的揭示hsa-miR-146a在前列腺癌發(fā)生發(fā)展中的相關(guān)分子機(jī)制,并初步探討hsa-miR-146a增強(qiáng)去勢(shì)抵抗性前列腺癌細(xì)胞對(duì)TRAIL促凋亡作用的敏感性。方法：應(yīng)用MicroRNAs芯片及實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)去勢(shì)抵抗前列腺癌和激素依賴(lài)前列腺癌組織中hsa-miR-146a的表達(dá)差異。通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染hsa-miR-146a/NC對(duì)前列腺癌細(xì)胞株凋亡的影響；通過(guò)靶基因預(yù)測(cè)軟件TargetScan等預(yù)測(cè)hsa-miR-146a在前列腺癌的潛在靶基因,熒光素酶報(bào)告基因(Luciferase)檢測(cè)hsa-miR-146a與潛在靶基因3'UTR的結(jié)合能力,通過(guò)Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其靶基因表達(dá);體外用TRAIL、 hsa-miR-146a干預(yù)前列腺癌細(xì)胞株DU145和PC3,通過(guò)四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)細(xì)胞活性；通過(guò)Hoechst染色方法觀察高表達(dá)miRNA-146a、TRAIL對(duì)前列腺癌細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果：MicroRNAs芯片結(jié)果顯示,在去勢(shì)抵抗性前列腺癌組織中hsa-miR-146a的表達(dá)水平相比于激素依賴(lài)性前列腺癌組織中的表達(dá)水平相比顯著下降,實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證了芯片結(jié)果(P0.05)；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,結(jié)果顯示miR-146a組DU145和PC3細(xì)胞凋亡率顯著高于NC組；預(yù)測(cè)軟件及熒光素酶報(bào)告基因(Luciferase)實(shí)驗(yàn)證實(shí)hsa-miR-146a與TRAF6、IRAK1的3'UTR直接結(jié)合；Western Blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)hsa-miR-146a抑制TRAF6、IRAK1的表達(dá)。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示隨著TRAIL劑量增大,細(xì)胞活性降低,hsa-miR-146a組細(xì)胞活性顯著低于陰性對(duì)照(NC)組；Hoechst染色顯示在應(yīng)用TRAIL干預(yù)的前列腺癌細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染hsa-miR-146a后細(xì)胞凋亡率顯著高于陰性對(duì)照(NC)組。結(jié)論：以上結(jié)果表明hsa-miR-146a在去勢(shì)抵抗性前列腺癌組織中低表達(dá),TRAF6、 IRAK1是hsa-miR-146a的潛在靶基因,并且hsa-miR-146a抑制其靶基因的表達(dá),促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的凋亡；TRAIL能夠促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞凋亡,而且hsa-miR-146a能夠增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞對(duì)TRAIL促凋亡作用的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：hsa-miR-146a DU145 PC3 去勢(shì)抵抗性前列腺癌 TRAIL TRAF6 IRAK1 凋亡
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.25
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-14
• 第一章 文獻(xiàn)綜述14-19
• 第二章 材料與方法19-45
• 第三章 結(jié)果45-52
• 第四章 討論52-56
• 結(jié)論56-57
• 參考文獻(xiàn)57-60
• 作者簡(jiǎn)介60-61
• 致謝61

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1 蔣亮;Hsa-miR-146a通過(guò)抑制NF-κB通路誘導(dǎo)去勢(shì)抵抗性前列腺癌凋亡的研究[D];東南大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：720839