本文關鍵詞：長鏈非編碼RNA作為胃癌早期診斷標志物的可行性研究

  更多相關文章： 長鏈非編碼RNA 胃癌 LINC00152 腫瘤標志物 外泌體

【摘要】：目的:先通過在胃癌細胞株、胃癌組織中測定LINC00152的表達量證實它為胃癌相關長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA);再通過測定早期胃癌患者和進展期胃癌患者血漿中LINC00152的水平,探索其作為胃癌早期診斷標志物的可行性;最后通過測定血漿外泌體中LINC00152的水平,探索lncRNA在血漿中穩(wěn)定存在的主要機制。方法:(1)運用實時定量逆轉錄-聚合酶鏈反應(quantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction,qRT-PCR)測定4株人類胃癌細胞株、1株正常人類胃黏膜上皮細胞株、成對胃癌組織及癌旁組織中LINC00152的表達量。(2)運用qRT-PCR測定胃癌患者術前、術后血漿中LINC00152的水平和胃黏膜異性增生患者血漿中LINC00152的水平,并與健康體檢者比較;最后用受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線評估血漿LINC00152對胃癌診斷的靈敏度與特異度。(3)在等量血漿中提取外泌體,測定血漿及外泌體中LINC00152水平,并用電鏡確定外泌體。結果:(1)LINC00152在胃癌細胞株BGC-823、MGC-803和SGC-7901中表達升高。(2)LINC00152在胃癌組織中表達升高。(3)胃癌患者血漿中LINC00152水平明顯高于健康體檢者。(4)早期胃癌患者血漿中LINC00152水平也明顯高于健康體檢者。(5)胃黏膜異性增生患者血漿LINC00152水平與健康體檢者相比無明顯差異。(6)胃癌患者術后血漿LINC00152水平明顯不同于術前。(7)血漿LINC00152作為腫瘤標志物的靈敏度和特異度分別為48.1%和85.2%。(8)外泌體對血漿lncRNA有保護作用。結論:LINC00152作為胃癌相關lncRNA之一有可能成為一種新型胃癌標志物應用于胃癌的早期診斷。LncRNA能在血漿中穩(wěn)定存在的可能機制是包裹于外泌體中,這一特性有利于臨床分析lncRNA型腫瘤標志物。
【關鍵詞】：長鏈非編碼RNA 胃癌 LINC00152 腫瘤標志物 外泌體
【學位授予單位】：寧波大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-11
• 1 研究內容和技術路線11-13
• 1.1 研究內容11-12
• 1.1.1 證實LINC00152為胃癌相關lncRNA11
• 1.1.2 證明血漿中存在LINC0015211
• 1.1.3 分析胃癌患者血漿中LINC00152的水平變化11
• 1.1.4 分析胃癌前病變患者的血漿LINC00152的水平11
• 1.1.5 探索血漿中l(wèi)ncRNA穩(wěn)定存在的機制11-12
• 1.2 技術路線12-13
• 2 方法和材料13-22
• 2.1 材料13-15
• 2.1.1 實驗設備13
• 2.1.2 實驗試劑13-14
• 2.1.3 主要試劑配制14-15
• 2.1.4 臨床標本15
• 2.1.5 細胞株15
• 2.2 實驗方法15-22
• 2.2.1 標本取材與處理15
• 2.2.2 細胞培養(yǎng)15-17
• 2.2.3 血漿外泌體提取17
• 2.2.4 總RNA抽提17-18
• 2.2.5 總RNA的定量與完整性檢測18-19
• 2.2.6 實時定量逆轉錄PCR19-20
• 2.2.7 克隆測序20-21
• 2.2.8 電鏡觀察外泌體21
• 2.2.9 統(tǒng)計學分析21-22
• 3 實驗結果22-32
• 3.1 RNA的完整性22
• 3.2 證實LINC00152為胃癌相關lncRNA22-24
• 3.3 血漿lncRNA存在性的檢測24-25
• 3.4 胃癌患者的血漿LINC00152水平25-27
• 3.5 血漿LINC00152水平與胃癌患者臨床病理因素的關系27-28
• 3.6 ROC曲線分析血漿LINC00152對胃癌診斷的價值28
• 3.7 胃癌前病變患者的血漿LINC00152水平28-29
• 3.8 胃癌患者術后血漿LINC00152的水平變化29-30
• 3.9 血漿LINC00152存在于外泌體中30-32
• 4 討論32-35
• 5 總結35-36
• 參考文獻36-40
• 附錄A 縮略詞40-41
• 附錄B 綜述41-54
• 參考文獻48-54
• 在學研究成果54-55
• 致謝55

【參考文獻】

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本文編號：653304