本文關(guān)鍵詞：納米轉(zhuǎn)運系統(tǒng)介導microRNA靶向沉默HIF-1α和Survivin對鼻咽癌細胞增殖及放療敏感性的影響

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【摘要】：目的:通過運用納米顆粒作為基因轉(zhuǎn)染載體,將靶向缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)和生存素(Survivin)的小RNA(micro RNA)導入鼻咽癌CNEII細胞,以期從基因放射增敏的角度來阻斷腫瘤細胞的生長,從而為鼻咽癌的特異放射增敏基因治療的研究開辟一條新途徑及在其過程中載體的選擇提供一個新的研究思路,為今后進行系列基因放射增敏研究奠定良好的基礎(chǔ)。方法:設(shè)計合成靶向HIF-1α及Survivin的microRNA干擾質(zhì)粒,制備聚乙烯亞胺-四氧化三鐵(PEI-Fe3O4)磁性納米粒并用電子顯微鏡觀察其大小及表面形態(tài)特征;轉(zhuǎn)染包被miRNA-HIF-1α質(zhì)粒和miRNA-Survivin質(zhì)粒的PEI-Fe3O4磁性納米粒到CNEII細胞中;在熒光顯微鏡下觀察各組轉(zhuǎn)染效率;利用Real Time RT-PCR檢測HIF-1α及Survivin基因mRNA表達抑制情況;利用Western blot檢測HIF-1α和Survivin的蛋白表達抑制情況;MTT法檢測干擾質(zhì)粒對鼻咽癌CNEII細胞增殖的影響;使用流式細胞儀檢測轉(zhuǎn)染干擾質(zhì)粒后CNEII細胞的凋亡情況。結(jié)果:成功制備PEI-Fe3O4磁性納米粒。H組、S組、HS組轉(zhuǎn)染CNEII細胞的轉(zhuǎn)染率分別為55.3%±6.5%、48.1%±2.3%、46.6%±4.1%。HIF-1α基因的mRNA沉默效率H組為69%,HS組為84%,蛋白抑制率H組為69.4%,HS組為73.3%;Survivin基因的mRNA沉默效率S組為97%,HS組為93%,蛋白抑制率S組為82.5%,HS組為65%。轉(zhuǎn)染后S組、HS組與NC組相比,凋亡平均增加1.97倍、1.46倍;經(jīng)放射線照射后,H組、S組、HS組凋亡率相比于NC組分別平均增加4.00倍、3.40倍、3.67倍,H組、S組、HS組與對照組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),而上述結(jié)果中雙基因HS組較H組及S組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:成功轉(zhuǎn)染包被miRNA-HIF-1α質(zhì)粒和miRNA-Survivin質(zhì)粒的PEI-Fe3O4磁性納米粒到鼻咽癌CNEII細胞中,且在mRNA分子水平及蛋白水平均能沉默靶基因,沉默靶基因后的鼻咽癌細胞增殖抑制,凋亡增加,施以放射線照射后凋亡增加更為明顯。
【關(guān)鍵詞】：納米載體 HIF-1α Survivin 鼻咽癌細胞
【學位授予單位】：貴州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R739.63;R730.55
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-9
• 略縮詞表9-10
• 引言10-11
• 材料與方法11-18
• 結(jié)果18-26
• 討論26-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻31-34
• 綜述34-42
• 參考文獻40-42
• 作者簡歷42-43
• 致謝43-44
• 學位論文數(shù)據(jù)集44

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本文編號：653149