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雙酚A對胃癌細胞生長及侵襲影響的研究

發(fā)布時間:2017-08-08 20:29

  本文關(guān)鍵詞:雙酚A對胃癌細胞生長及侵襲影響的研究


  更多相關(guān)文章: 雙酚A 胃癌 雌激素受體 生長 侵襲 MMP-9


【摘要】:目的:探討環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A(BPA)對胃癌細胞生長、侵襲的影響及機制分析。方法:本研究選用人中分化和低分化胃癌細胞株SGC-7901和MKN-45進行體外貼壁培養(yǎng)。選用10-10~10-4mol/L BPA處理細胞,分別在24、48、72小時觀察細胞生長和形態(tài)學改變,并采用CCK-8法檢測細胞增殖或抑制情況。采用Transwell侵襲實驗研究BPA對胃癌細胞侵襲能力的改變,RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng))檢測胃癌侵襲相關(guān)基因MMP-9 mRNA表達水平的改變。為研究雌激素受體通路和BPA誘導的胃癌細胞侵襲能力增強之間的關(guān)系,使用雌激素受體拮抗劑氟維司群(ICI 182,780)作為對照研究。結(jié)果:10-10~10-5mol/L BPA限制兩種胃癌細胞生長,并且隨著濃度梯度增大,細胞更趨于離散,細胞之間連接變?nèi)、接觸變少,并且10-4 mol/L BPA對細胞有毒性作用。Transwell侵襲實驗中,胃癌細胞株SGC-7901:BPA組侵襲能力較對照組增強(134.60%?14.91%vs 100.00%?16.16%,p0.01,n=3),而BPA+ICI組與BPA組比較、ICI組與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(p0.05,n=3);胃癌細胞株MKN-45:BPA組細胞侵襲能力較對照組增強(120.06%?15.19%vs100.00%?16.26%,p0.05,n=3),而BPA+ICI組與BPA組比較、ICI組與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(p0.05,n=3);蜓芯繉用,胃癌細胞株SGC-7901:與對照組比較,10-5 mol/L和10-6 mol/L BPA組MMP-9 mRNA表達增高有統(tǒng)計學意義(p0.05,n=3),BPA+ICI組與BPA組比較,MMP-9 mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義(p0.05,n=3);胃癌細胞株MKN-45:10-5 mol/L、10-6 mol/L和10-7 mol/L BPA組與對照組比較,MMP-9 mRNA表達增高有統(tǒng)計學意義(p0.01,n=3)。BPA+ICI組與BPA組比較,MMP-9 m RNA表達差異無統(tǒng)計學意義(p0.05,n=3)。結(jié)論:在一定濃度范圍內(nèi),BPA可以引起胃癌細胞生長異常改變,隨著BPA濃度增大胃癌細胞侵襲能力增強,侵襲相關(guān)基因MMP-9參與了BPA誘導的胃癌細胞侵襲過程,ER通路可能未參與其中。
【關(guān)鍵詞】:雙酚A 胃癌 雌激素受體 生長 侵襲 MMP-9
【學位授予單位】:蘭州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R735.2
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • Abstract4-6
  • 英文縮略詞6-10
  • 第一章 前言10-15
  • 1.1 胃癌的流行病學特點及治療現(xiàn)狀10
  • 1.2 雌激素與胃癌的關(guān)系10-12
  • 1.2.1 雌激素的作用機制11
  • 1.2.2 胃癌-雌激素可能相關(guān)性腫瘤11-12
  • 1.2.3 ER在胃癌的分布及作用12
  • 1.3 環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A(BPA)及其致瘤機制12-15
  • 1.3.1 BPA概述12-13
  • 1.3.2 BPA致瘤機制13-15
  • 第二章 材料和方法15-23
  • 2.1 實驗材料15-16
  • 2.1.1 胃癌細胞系15
  • 2.1.2 主要實驗試劑15
  • 2.1.3 主要試劑配制15-16
  • 2.1.4 主要實驗儀器16
  • 2.2 實驗方法16-22
  • 2.2.1 細胞復蘇16-17
  • 2.2.2 細胞傳代17
  • 2.2.3 細胞凍存17
  • 2.2.4 BPA對胃癌細胞生長的影響17-18
  • 2.2.5 細胞侵襲能力檢測18-19
  • 2.2.6 BPA對胃癌細胞MMP-9 m RNA表達的影響19-21
  • 2.2.7 ICI 182,780 對胃癌細胞MMP-9 m RNA表達的影響21-22
  • 2.2.8 統(tǒng)計學處理22
  • 附 技術(shù)路線圖22-23
  • 第三章 結(jié)果23-33
  • 3.1 BPA對胃癌細胞生長的影響23-27
  • 3.1.1 SGC-7901 細胞形態(tài)學觀察23
  • 3.1.2 MKN-45 細胞形態(tài)學觀察23
  • 3.1.3 SGC-7901 細胞生長曲線23
  • 3.1.4 MKN-45 細胞生長曲線23-27
  • 3.2 Tranwell模型檢測細胞體外侵襲能力27-30
  • 3.3 RT-PCR檢測細胞MMP-9 m RNA表達水平30-33
  • 3.3.1 SGC-7901 中MMP-9 m RNA表達水平30
  • 3.3.2 MKN-45 中MMP-9 m RNA表達水平30-33
  • 第四章 討論33-39
  • 4.1 BPA改變胃癌細胞生長33-34
  • 4.2 BPA促進胃癌細胞侵襲34-35
  • 4.3 BPA對胃癌細胞作用機制分析35-39
  • 第五章 結(jié)論39-40
  • 5.1 結(jié)論39
  • 5.2 研究展望39-40
  • 參考文獻40-48
  • 附綜述 雙酚A及其相關(guān)性疾病的研究進展48-62
  • 1. 各個生命階段的接觸源48-49
  • 2. 與BPA暴露相關(guān)的疾病49-52
  • 2.1 糖尿病和肥胖49
  • 2.2 心腦血管疾病49
  • 2.3 慢性腎病49
  • 2.4 出生缺陷和發(fā)育障礙49-50
  • 2.5 不孕不育50
  • 2.6 慢性呼吸系統(tǒng)疾病50
  • 2.7 癌癥50-52
  • 3. BPA暴露的致病機制52-55
  • 3.1 基因損傷52-53
  • 3.2 BPA的表觀遺傳學效應(yīng)53
  • 3.3 內(nèi)分泌干擾效應(yīng)53-54
  • 3.4 氧化應(yīng)激和線粒體功能障礙54-55
  • 4. 結(jié)論和展望55
  • 參考文獻55-62
  • 在學期間的研究成果62-63
  • 致謝63

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