本文關(guān)鍵詞：共載長(zhǎng)春新堿和神經(jīng)酰胺的脂質(zhì)體的抗肝癌作用研究

  更多相關(guān)文章： 脂質(zhì)體 長(zhǎng)春新堿 ceramide 自噬

【摘要】：納米技術(shù)是化療領(lǐng)域的重大突破,也是當(dāng)前的研究熱點(diǎn),針對(duì)納米載體的修飾克服普通化療藥物細(xì)胞毒性強(qiáng)和體內(nèi)循環(huán)時(shí)間短的缺點(diǎn)。長(zhǎng)春新堿是一種肝癌常用的化療藥物,它能夠抑制細(xì)胞自噬,損壞細(xì)胞的保護(hù)性自噬過(guò)程。Ceramide能夠引起線粒體性自噬,促進(jìn)功能障礙的線粒體通過(guò)自噬降解,兩者聯(lián)用可以使細(xì)胞自噬阻斷,使細(xì)胞死亡。本研究在體外對(duì)兩種游離藥物對(duì)自噬蛋白的影響進(jìn)行了測(cè)定,發(fā)現(xiàn)VCR能夠抑制LC3和p62的表達(dá),證明其抑制自噬過(guò)程的成熟,而ceramide能夠使LC3表達(dá)增加,p62表達(dá)下降,說(shuō)明可以誘導(dǎo)自噬過(guò)程的發(fā)生。利用兩種藥物在體外的聯(lián)合殺傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們?cè)O(shè)計(jì)了脂質(zhì)體配方。然后,利用乙醇注入法和p H梯度法實(shí)現(xiàn)了長(zhǎng)春新堿和ceramide的共載,對(duì)制備的脂質(zhì)體進(jìn)行納米表征的測(cè)定,判斷脂質(zhì)體穩(wěn)定性。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)納米藥物L(fēng)ip-VCR-Cer及Lip-VCR對(duì)肝癌細(xì)胞的殺傷效果較游離VCR和游離VCR+ceramide的效果而言要弱。而對(duì)于不同處理時(shí)間的細(xì)胞存活率,不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與游離藥物不同,脂質(zhì)體通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞緩慢釋放發(fā)揮作用,到達(dá)腫瘤細(xì)胞的VCR和ceramide濃度增加,使藥物的利用率上升,增加對(duì)細(xì)胞的作用,而游離細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的作用快速而短暫,細(xì)胞毒性作用迅速體現(xiàn)。Lip-VCR-Cer的殺傷作用大于Lip-VCR,游離VCR+Ceramide的殺傷作用大于游離VCR,這可能與Ceramide對(duì)細(xì)胞發(fā)揮的作用有關(guān),Ceramide在細(xì)胞內(nèi)能夠通過(guò)特定信號(hào)通路誘導(dǎo)自噬,引起自噬蛋白LC3的表達(dá)增加,自噬流標(biāo)志蛋白p62表達(dá)降低,發(fā)揮誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的保護(hù)性作用。Ceramide通過(guò)不同的機(jī)制誘導(dǎo)保護(hù)性自噬和致死性自噬,保護(hù)性自噬實(shí)質(zhì)為線粒體自噬。線粒體能夠通過(guò)某種自噬的形式選擇性降解功能受損的線粒體,避免功能異常的線粒體產(chǎn)生活性氧物質(zhì)增多,不利于細(xì)胞生長(zhǎng),這種保護(hù)性自噬使腫瘤細(xì)胞能夠適應(yīng)內(nèi)外環(huán)境刺激,促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng),而VCR的存在使其誘導(dǎo)的保護(hù)性作用抑制,使細(xì)胞不能適應(yīng)環(huán)境刺激,發(fā)生死亡。這種自噬誘導(dǎo)劑的存在使腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥敏感性增強(qiáng),使VCR與Ceramide聯(lián)用產(chǎn)生了更強(qiáng)的殺傷效果。結(jié)論:Lip-VCR-Cer與Lip-VCR在基本表征,體外釋放和體外細(xì)胞毒性方面不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異。在體外殺傷效果弱于游離VCR和游離VCR+ceramide的細(xì)胞殺傷效果,四種藥物處理組的殺傷效果VCR+CeramideVCRLip-VCR-CerLip-VCR。VCR與Ceramide聯(lián)用增強(qiáng)了細(xì)胞殺傷效果,這可能與VCR抑制了ceramide誘導(dǎo)的保護(hù)性自噬作用有關(guān)。四種藥物處理方法在體內(nèi)抑制腫瘤的效果區(qū)別需要通過(guò)后續(xù)的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。
【關(guān)鍵詞】：脂質(zhì)體 長(zhǎng)春新堿 ceramide 自噬
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-13
• 第一部分 游離藥物影響肝癌自噬蛋白的表達(dá)及體外細(xì)胞毒性研究13-25
• 一、實(shí)驗(yàn)材料及儀器13-16
• 二、實(shí)驗(yàn)方法16-19
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-23
• 四、小結(jié)及結(jié)果討論23-25
• 第二部分 共載長(zhǎng)春新堿和神經(jīng)酰胺的脂質(zhì)體的制備及基本表征25-35
• 一、實(shí)驗(yàn)材料及儀器25-27
• 二、實(shí)驗(yàn)方法27-30
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-33
• 四、小結(jié)與結(jié)果討論33-35
• 第三部分 共載VCR和CERAMIDE脂質(zhì)體的體外細(xì)胞毒性35-40
• 一、實(shí)驗(yàn)儀器和材料35-36
• 二、實(shí)驗(yàn)方法36-37
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-38
• 四、小結(jié)及結(jié)果討論38-40
• 全文小結(jié)40-42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 綜述 自噬在肝癌中的作用：分子機(jī)制和潛在的治療靶點(diǎn)45-76
• 參考文獻(xiàn)58-76
• 在讀期間發(fā)表論文和參加工作情況說(shuō)明76-77
• 致謝77

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1 葉青;鄭民華;;自噬的分子機(jī)制與病理生理意義[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2007年04期

2 何韜;王海杰;譚玉珍;;自噬在細(xì)胞存活和死亡中的作用[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2008年01期

3 張志才;邵增務(wù);;自噬分子機(jī)制的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年01期

4 趙勇;師長(zhǎng)宏;伍靜;張海;;自噬的形態(tài)特征及分子調(diào)控機(jī)制[J];中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志;2010年10期

5 王梅;李慶林;;自噬與癌癥的治療[J];安徽醫(yī)藥;2010年08期

6 伍靜;趙勇;師長(zhǎng)宏;張海;;自噬的形態(tài)特征及分子調(diào)控[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年20期

7 王雄;譚璐;;自噬研究進(jìn)展[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2010年10期

8 卞龍艷;;運(yùn)動(dòng)與自噬的關(guān)系進(jìn)展研究[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年07期

9 王偉;徐忠東;陶瑞松;;腫瘤發(fā)生過(guò)程中自噬與凋亡關(guān)系的研究[J];合肥師范學(xué)院學(xué)報(bào);2011年06期

10 王光輝;;自噬與疾病[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2012年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 韋雪;漆永梅;張迎梅;;鎘、活性氧自由基與自噬發(fā)生的分子機(jī)制[A];中國(guó)活性氧生物學(xué)效應(yīng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集（第一冊(cè)）[C];2011年

2 秦正紅;粱中琴;陶陸陽(yáng);黃強(qiáng);劉春風(fēng);蔣星紅;倪宏;邢春根;;自噬在細(xì)胞生存與死亡中的作用[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

3 秦正紅;;自噬與腫瘤和神經(jīng)細(xì)胞生存——藥物作用的新靶位[A];全國(guó)生化與分子藥理學(xué)藥物靶點(diǎn)研討會(huì)論文摘要集[C];2008年

4 李芹;丁壯;;自噬功能研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

5 胡晨;張璇;滕衍斌;胡海汐;周叢照;;家蠶中自噬相關(guān)蛋白Atg8的結(jié)構(gòu)研究[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2009年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2009年

6 陳希;李民;Xiao-Ming Yin;李林潔;;通過(guò)不同途徑誘導(dǎo)自噬的化合物對(duì)Atg9的依賴性不同[A];細(xì)胞—生命的基礎(chǔ)——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2013年全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)·武漢論文摘要集[C];2013年

7 陳涓涓;敬靜;蔡元博;張俊龍;;針對(duì)活體細(xì)胞自噬行為的發(fā)光金屬配合物的設(shè)計(jì)[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第8分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年

8 寧曉潔;鐘自彪;王彥峰;付貞;葉啟發(fā);;缺血再灌注誘導(dǎo)小鼠肝細(xì)胞自噬[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

9 吳曉琦;李丹丹;鄧蓉;江山;楊芬;馮公侃;朱孝峰;;CaMKKβ磷酸化Beclin 1調(diào)控自噬及其在腫瘤治療中的作用[A];2011醫(yī)學(xué)科學(xué)前沿論壇第十二屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

10 周鴻雁;裴中;陳杰;申存周;錢(qián)浩;劉妍梅;冼文彪;鄭一帆;陳玲;;線粒體動(dòng)力改變參與了LRRK2突變導(dǎo)致的自噬[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 生命學(xué)院;俞立課題組在《科學(xué)》發(fā)文揭示自噬調(diào)控的重要機(jī)制[N];新清華;2012年

2 周飛 張粹蘭;花櫚木“自噬”可抗癌[N];廣東科技報(bào);2011年

3 張明永;水稻自噬基因研究取得新進(jìn)展[N];廣東科技報(bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 賈盛楠;轉(zhuǎn)錄因子p8調(diào)控自噬的功能研究[D];浙江大學(xué);2015年

2 皮會(huì)豐;DNM1L蛋白介導(dǎo)的線粒體自噬在鎘致肝臟毒性中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 李倩;miRNAs介導(dǎo)的自噬抑制在類鼻疽桿菌感染免疫逃逸中的作用機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 黎炳護(hù);激活TRPV1誘導(dǎo)自噬在血管平滑肌細(xì)胞泡沫化中作用及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 陳江偉;自噬在椎間盤(pán)退變中的作用及機(jī)制研究[D];上海交通大學(xué);2014年

6 易聰;乙�；谧允蛇^(guò)程中的功能和分子機(jī)制的研究[D];清華大學(xué);2012年

7 張艷林;自噬在氧化低密度脂蛋白誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷中的作用及其機(jī)制探討[D];蘇州大學(xué);2010年

8 陳英;自噬與凋亡分子水平相關(guān)關(guān)系的探討[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2001年

9 徐秋林;自噬在心肌缺血—再灌注損傷中的不同作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

10 潘耀柱;抑制自噬增加阿霉素對(duì)骨髓瘤細(xì)胞的促凋亡活性[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 匡紅;Jnk2通過(guò)smARF的降解來(lái)調(diào)控壓力誘導(dǎo)的線粒體自噬及組織損傷[D];浙江理工大學(xué);2015年

2 洪永桃;自噬在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞中的作用及甲氨蝶呤對(duì)自噬的影響[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

3 李寧;自噬在嗎啡心肌保護(hù)中的作用及機(jī)制研究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

4 劉冰;腦缺血預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后自噬及凋亡的影響[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

5 王存凱;microRNA-30a-5p通過(guò)抑制自噬阻止肝星狀細(xì)胞激活[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 張宇程;泛素連接酶HOIL-1L在線粒體自噬中的功能與機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

7 唐芙蓉;自噬對(duì)奶山羊雄性生殖干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

8 陳軍童;腎損傷分子1對(duì)高糖誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞自噬作用的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

9 包勇;Kap1在LBH589誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞MCF-7自噬形成中的作用[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

10 魏園玉;P53缺失型HL-60白血病細(xì)胞內(nèi)Nucleostemin下調(diào)對(duì)mTOR通路介導(dǎo)的自噬活性的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

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