本文關鍵詞：SDF-1激活PI3K-Akt通路在卵巢癌細胞增殖和侵襲中的作用

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【摘要】：目的通過觀察基質細胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor l,SDF-1)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信號傳導通路抑制劑LY294002對卵巢癌細胞SKOV3和CAOV3增殖和侵襲能力的影響,探討SDF-1對上皮性卵巢癌細胞的增殖和侵襲產生影響的分子機制中是否有PI3K/Akt信號傳導通路的作用。方法1.將卵巢癌細胞SKOV3和CAOV3分別分為以下4組:(1)空白對照組,(2)實驗組1(含100ng/ml SDF-1的培養(yǎng)液),(3)實驗組2(含50μmol/L LY294002的培養(yǎng)液),(4)實驗組3(預先用含50μmol/L LY294002的培養(yǎng)液作用卵巢癌細胞0.5h后再加入含100ng/ml SDF-1的培養(yǎng)液)。2.將卵巢癌細胞SKOV3和CAOV3分別在不同藥物處理條件下培養(yǎng)24h、48h和72h后,應用四甲基偶氨唑藍比色(MTT)法檢測兩種卵巢癌細胞在不同藥物處理條件下培養(yǎng)不同時間的細胞增殖能力。3.將卵巢癌細胞SKOV3和CAOV3分別在不同藥物處理條件下培養(yǎng)48h后運用體外微孔隔離室板(Transwell)法檢測兩種卵巢癌細胞的侵襲能力。4.運用蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測卵巢癌細胞SKOV3和CAOV3分別在不同藥物處理條件下培養(yǎng)48h后,Akt的磷酸化程度和基質金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的分泌情況。結果1.不同藥物處理條件下卵巢癌細胞SKOV3的MTT結果:不同藥物作用24h對卵巢癌細胞SKOV3的增殖作用無明顯影響,四組卵巢癌細胞吸光度值之間的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。不同藥物作用48h和72h時,SDF-1組(實驗組1)與對照組進行比較,SDF-1可以明顯促進卵巢癌細胞SKOV3的增殖(P0.05);50μmol/L的LY294002組(實驗組2)以及預先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組(實驗組3)分別與對照組進行比較,卵巢癌細胞SKOV3的增殖能力明顯減弱(P0.05);而預先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組(實驗組3)與100ng/ml的SDF-1組(實驗組1)進行比較,SDF-1對卵巢癌細胞SKOV3促進增殖的作用明顯被抑制(P0.05),同時預先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組(實驗組3)與50μmol/L的LY294002組(實驗組2)進行比較,兩組卵巢癌細胞吸光度值之間的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。不同藥物處理條件下卵巢癌細胞CAOV3的MTT結果:不同藥物分別作用于卵巢癌細胞CAOV3 24h、48h和72h時,100ng/ml的SDF-1組與對照組進行比較,SDF-1可以明顯促進卵巢癌細胞CAOV3的增殖(P0.05);50μmol/L的LY294002組以及預先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細胞CAOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組分別與對照組進行比較,卵巢癌細胞CAOV3的增殖能力明顯減弱(P0.05);而預先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細胞CAOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組與100ng/ml的SDF-1組進行比較,SDF-1對卵巢癌細胞CAOV3的促進增殖的作用明顯被抑制(P0.05),同時預先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細胞CAOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組與50μmol/L的LY294002組進行比較,兩組卵巢癌細胞吸光度值之間的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.體外細胞侵襲實驗結果:100 ng/ml的SDF-1組與對照組進行比較,SDF-1可以明顯促進兩種卵巢癌細胞的侵襲(P0.05);50μmol/L的LY294002組以及預先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細胞后再加入100ng/ml的SDF-1組分別與對照組進行比較,兩種卵巢癌細胞的侵襲能力明顯減弱(P0.05);而預先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細胞后再加入100ng/ml的SDF-1組與100ng/ml的SDF-1組進行比較,SDF-1對兩種卵巢癌細胞促進侵襲的作用明顯被抑制(P0.05),同時預先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細胞后再加入100ng/ml的SDF-1組與50μmol/L的LY294002組進行比較,兩種卵巢癌細胞的侵襲能力無明顯差異(P0.05)。3.Western Blot結果:卵巢癌細胞SKOV3和CAOV3在不同藥物處理48h后表達Akt、p-Akt和MMP-9蛋白量的變化基本一致,在基礎狀態(tài)下兩種卵巢癌細胞內均有一定程度的PI3K/Akt信號傳導通路的激活以及MMP-9蛋白的分泌,而且兩種卵巢癌細胞在不同藥物處理條件下表達Akt蛋白的量均無明顯差異(P0.05)。100ng/ml的SDF-1組與對照組進行比較,SDF-1對PI3K/Akt信號傳導通路中Akt的活化以及MMP-9蛋白的分泌起到促進作用(P0.05);50μmol/L的LY294002組以及預先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細胞后再加入100ng/ml的SDF-1組分別與對照組進行比較,表達p-Akt和MMP-9蛋白的量均明顯減少(P0.05);而預先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細胞后再加入100ng/ml的SDF-1組與100ng/ml的SDF-1組進行比較,SDF-1對Akt活化和MMP-9蛋白分泌的促進作用明顯被抑制(P0.05),同時預先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細胞后再加入100ng/ml的SDF-1組與50μmol/L的LY294002組進行比較,Akt的活化程度以及MMP-9蛋白分泌之間的差異均無明顯統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論1.SDF-1對人卵巢癌細胞系SKOV3和CAOV3的增殖和侵襲起促進作用;2.PI3K/Akt信號傳導通路抑制劑LY294002對人卵巢癌細胞系SKOV3和CAOV3的增殖和侵襲起抑制作用;3.阻斷PI3K/Akt信號傳導通路后,SDF-1對人卵巢癌細胞系SKOV3和CAOV3增殖和侵襲的促進作用被抑制;4.PI3K/Akt信號傳導通路參與了刺激人卵巢癌細胞系SKOV3和CAOV3分泌MMP-9蛋白的過程;5.SDF-1促進人卵巢癌細胞系SKOV3和CAOV3增殖和侵襲的作用可能是通過PI3K/Akt信號傳導通路刺激MMP-9蛋白表達的作用機制而實現(xiàn)的。
【關鍵詞】：卵巢惡性腫瘤 基質細胞衍生因子-1 基質金屬蛋白酶-9 細胞增殖 細胞侵襲 PI3K/Akt 信號傳導通路
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 英文縮略詞表12-13
• 引言13-17
• 材料與方法17-30
• 結果30-35
• 討論35-40
• 結論40-41
• 參考文獻41-43
• 綜述43-52
• 參考文獻49-52
• 個人簡歷52-53
• 致謝53

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 尹東;張佐;高素;李斌;;趨化因子受體CXCR4及其配體CXCL12在口腔鱗狀細胞癌細胞增殖和遷移中的作用[J];華西口腔醫(yī)學雜志;2013年01期

2 郎志芳;劉蘭濤;王瑩;李文媛;吳琦;;腫瘤轉移相關蛋白1的表達與人直腸癌組織淋巴管轉移及預后關系[J];解剖科學進展;2013年06期

3 楊飛;周意;;喉癌患者血清、唾液及組織VEGF及MMP的變化[J];海南醫(yī)學院學報;2014年10期

4 吳靖芳;黃靜;薛剛;張靜;張文靜;張小俊;;TFF3和SDF-1在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及臨床意義[J];天津醫(yī)藥;2013年09期

5 陳琛;李勝澤;;SDF-1/CXCR4生物學軸在宮頸癌中的研究進展[J];中華全科醫(yī)學;2014年03期

6 杜聃;鄭力維;;喉癌患者血清、唾液及組織中VEGF及MMP的表達及其臨床意義[J];實用癌癥雜志;2014年12期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 郭清;CXCL12-CXCR4生物軸與卵巢上皮性癌腹腔轉移關系的研究[D];河北醫(yī)科大學;2009年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 吉向麗;趨化因子受體CXCR4對卵巢上皮性癌生長及侵襲轉移的影響[D];河北醫(yī)科大學;2009年

2 徐嬰花;CXCR4與NF-κB p65在宮頸癌中的表達及臨床意義[D];中南大學;2009年

3 常春艷;趨化因子受體CCR5, CCR7和CXCR4在子宮內膜異位癥中的表達[D];佳木斯大學;2009年

4 董正華;CXCR4、SDF-1和VEGF在小兒腎母細胞瘤中的表達及意義[D];鄭州大學;2009年

5 湯容;siRNA抑制人卵巢癌SW626細胞CXCR4基因的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

6 董國偉;CXCL12/CXCR4生物學軸對舌鱗癌Tca8113細胞生物學行為的研究及AMD3100對其的干預[D];鄭州大學;2012年

7 陳琛;SDF-1和CXCR4在宮頸癌組織中的表達及臨床意義[D];蚌埠醫(yī)學院;2014年

8 王會軍;通路抑制劑LY294002、PD98059對SDF-1介導的卵巢癌細胞增殖和侵襲能力的影響[D];鄭州大學;2014年

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本文編號：519370