本文關(guān)鍵詞：二甲雙胍在IL-6誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞EMT中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景:胃癌是目前人類最常見的消化道惡性腫瘤之一,其死亡率占相關(guān)腫瘤死亡率的第二位�，F(xiàn)階段胃癌的發(fā)病原因和機(jī)制尚未完全清楚,由于早期無較為明顯地癥狀,因此很多病人在前來確診時(shí)就已經(jīng)有局部或遠(yuǎn)處的浸潤和轉(zhuǎn)移,嚴(yán)重影響腫瘤患者的治療及預(yù)后。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial mesenchymal transition,EMT)是一系列生物學(xué)過程,是上皮細(xì)胞為適應(yīng)環(huán)境而引發(fā)的,其特征性表現(xiàn)為上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化,在多種惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移方面都起著至關(guān)重要的作用,尤其是上皮細(xì)胞來源的消化道腫瘤方面。因此,對EMT過程進(jìn)行深入探究,不僅為消化系腫瘤的預(yù)防和治療提供方向,也將為消化系腫瘤患者的預(yù)后和抗腫瘤藥物的應(yīng)用提供依據(jù)。二甲雙胍是一種臨床上廣泛使用的雙胍類降糖藥物,作為胰島素增敏劑主要針對2型糖尿病的治療。大量研究表明,二甲雙胍通過細(xì)胞能量代謝,細(xì)胞周期蛋白以及micro RNA的調(diào)節(jié)能抑制腫瘤細(xì)胞的生長。最新的研究進(jìn)展提示,二甲雙胍能抑制多種惡性腫瘤的EMT進(jìn)程,從而影響腫瘤進(jìn)展及預(yù)后。本研究通過檢測二甲雙胍對IL-6誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞EMT模型的生長,侵襲遷移能力的改變,相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)初步探討二甲雙胍對胃癌細(xì)胞EMT的影響。目的:探討雙胍類降糖藥二甲雙胍對IL-6誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞SGC7901上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用。方法:采用IL-6體外刺激的方法培養(yǎng)SGC7901,構(gòu)建EMT模型,于倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化;根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶GC7901細(xì)胞進(jìn)行分組,可分為SGC7901-ctr組,SGC7901+M組,SGC7901-IL-6組和SGC7901-IL-6+M組;MTT法檢測二甲雙胍對細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測二甲雙胍對SGC7901細(xì)胞周期的影響;細(xì)胞劃痕修復(fù)實(shí)驗(yàn)檢測二甲雙胍對細(xì)胞增殖及遷移的影響,RT-PCR及westernblot檢測EMT相關(guān)的重要標(biāo)志分子E-cadherin,N-cadherin,Vimentin和Twist1在m RNA和蛋白表達(dá)水平上的變化情況。結(jié)果:1.倒置顯微鏡下觀察各組實(shí)驗(yàn)細(xì)胞形態(tài)學(xué)差異,IL-6能誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞SGC-7901發(fā)生一系列形態(tài)學(xué)的改變,由典型的上皮細(xì)胞樣細(xì)胞形態(tài)向間質(zhì)細(xì)胞樣形態(tài)轉(zhuǎn)化,多數(shù)細(xì)胞排列較為松散,形態(tài)表現(xiàn)為類似成纖維狀,部分細(xì)胞呈梭形,紡錘體形,較之普通SGC7901細(xì)胞有典型的形態(tài)學(xué)變化。2.MTT法檢測各組實(shí)驗(yàn)細(xì)胞增殖能力的變化,二甲雙胍能顯著抑制胃癌細(xì)胞SGC7901的增殖促進(jìn)細(xì)胞凋亡,SGC7901-IL-6組較SGC7901-ctr組有明顯地生長增殖優(yōu)勢(P0.01),而SGC7901-IL-6+M組較之SGC7901-IL-6組又有生長抑制(P0.01)。3.劃痕修復(fù)實(shí)驗(yàn)比較各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞遷移能力,在劃痕后24h,SGC7901-IL-6組較之SGC7901-ctr組細(xì)胞缺口較小;在劃痕后48h,SGC7901-IL-6組細(xì)胞劃痕的缺口已逐漸縮小至接近愈合的狀態(tài),而對照組劃痕缺口仍比較寬。二甲雙胍處理過的SGC7901-IL-6與未處理組相比細(xì)胞缺口增大。流式細(xì)胞術(shù)檢測各組實(shí)驗(yàn)細(xì)胞細(xì)胞周期的變化,二甲雙胍能顯著影響胃癌細(xì)胞的周期分布且能明顯抑制胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力。4.PCR用于檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞EMT相關(guān)標(biāo)志分子m RNA的表達(dá)水平,PCR結(jié)果顯示,與對照組相比,IL-6處理過的SGC7901細(xì)胞E-Cadherin m RNA表達(dá)明顯降低,而N-Cadherin、Vimentin和Twist1 m RNA表達(dá)明顯增高(P0.01)。與未受二甲雙胍處理過的IL-6誘導(dǎo)的7901細(xì)胞相比,加用二甲雙胍干預(yù)的7901(IL-6)細(xì)胞E-Cadherin m RNA表達(dá)增高,而N-Cadherin、Vimentin和Twist1m RNA表達(dá)降低(P0.01)。5.Western blot用于檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞與EMT相關(guān)標(biāo)志分子的蛋白表達(dá)水平,結(jié)果表明,與對照組相比,IL-6處理過的SGC7901細(xì)胞E-Cadherin蛋白表達(dá)量明顯降低,而N-Cadherin、Vimentin和Twist1蛋白表達(dá)量明顯增高(P0.05)。二甲雙胍作用后E-cadherin蛋白表達(dá)量增加,而N-cadherin,Vimentin和Twist1蛋白表達(dá)量均降低(P0.05)。結(jié)論:1.IL-6能誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞SGC-7901發(fā)生EMT,使細(xì)胞的增殖和遷移能力增強(qiáng),EMT相關(guān)標(biāo)志分子的表達(dá)水平發(fā)生相應(yīng)變化。2.雙胍類降糖藥二甲雙胍能明顯抑制胃癌細(xì)胞SGC-7901的增殖和侵襲能力,同時(shí)抑制腫瘤細(xì)胞的EMT過程。
【關(guān)鍵詞】：EMT IL-6 二甲雙胍 胃癌細(xì)胞SGC-7901 E-Cadherin Vimentin
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-7
• abstract7-12
• 主要英文縮略詞索引12-13
• 前言13-15
• 1 材料與方法15-21
• 2 實(shí)驗(yàn)方法21-31
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-37
• 討論37-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 綜述部分 EMT與惡性腫瘤之間關(guān)系的研究進(jìn)展45-64
• 參考文獻(xiàn)55-64
• 個(gè)人簡歷及在讀期間發(fā)表的論文64-65
• 致謝65

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1 于成功,李敏,莫?jiǎng)χ?蕭樹東;胃癌細(xì)胞垂體腺苷環(huán)化酶激活肽相關(guān)受體分析[J];胃腸病學(xué);2000年02期

2 薛英威,耿敬姝,劉曉民,劉立人,高小敏,陳國林,張豈凡,趙家宏;胃癌細(xì)胞的流式分析及臨床意義[J];腫瘤防治研究;2000年03期

3 陳堅(jiān),林庚金,錢立平,程建,施冬云,張亞東,劉珊林;內(nèi)源性活性氧水平及錳型超氧化物歧化酶的表達(dá)與胃癌細(xì)胞分化、增殖相關(guān)[J];生物物理學(xué)報(bào);2003年02期

4 李瑩,藥立波,韓炯,王立峰,韓月恒,劉新平,林樹新,俞強(qiáng);胃癌細(xì)胞抗脫落凋亡的分子機(jī)制[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2004年02期

5 羅和生,王維,包鵬輝,張翼;核因子-κB活性增強(qiáng)參與胃癌細(xì)胞長春新堿耐藥[J];中華消化雜志;2004年08期

6 劉冀紅,曹偉新,紀(jì)玉寶,張軼,劉炳亞,朱正綱,燕敏,林言箴;右旋甲硫氨酸對胃癌細(xì)胞作用初探[J];腸外與腸內(nèi)營養(yǎng);2005年01期

7 齊元玲;于皆平;劉啟勝;鄧全軍;曹俊;于紅剛;;抑癌基因PTEN在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)及意義[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年03期

8 何必立;呂賓;徐毅;苗青;范一宏;;溫郁金對胃癌細(xì)胞的抑制作用及其對血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響[J];中醫(yī)藥學(xué)刊;2006年09期

9 郭強(qiáng);李榮;李慶芳;夏紹友;杜曉輝;王立生;;高表達(dá)鞘氨醇激酶對胃癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年12期

10 陳先來;肖曉旦;楊榮;劉建平;;基于誤差反向傳播神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的胃癌細(xì)胞識別研究[J];中國循證醫(yī)學(xué)雜志;2007年09期

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1 韓霜;雷婷;韓者藝;劉杰;郭雪艷;丁睿;吳開春;丁杰;樊代明;;分化抑制因子1對胃癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊）[C];2007年

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4 李娜;郭瑞芳;李文梅;邵建敏;汪浩;趙康;李書婷;王敬強(qiáng);王融;徐寧志;劉斯奇;呂有勇;;大蒜素處理在胃癌細(xì)胞中引發(fā)的蛋白質(zhì)表達(dá)響應(yīng)[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要論文集[C];2004年

5 ;多西紫杉醇對胃癌細(xì)胞作用及其機(jī)制的研究[A];第四屆中國腫瘤大會(huì)中國藥理學(xué)會(huì)腫瘤藥理專業(yè)委員會(huì)分會(huì)場學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

6 樓儷泓;;15-羥基前列腺素脫氫酶對胃癌細(xì)胞周期影響的試驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊）[C];2007年

7 朗瑋;;中藥方劑1號對胃癌細(xì)胞體外生長及細(xì)胞粘附分子的影響[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)消化專業(yè)第八次學(xué)術(shù)年會(huì)暨省中西醫(yī)結(jié)合消化系疾病新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2007年

8 鞏龍靜;馬君;周涵婧;鄭榮兒;;胃癌細(xì)胞的表面增強(qiáng)拉曼光譜研究[A];中國光學(xué)學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)大會(huì)摘要集[C];2011年

9 謝少茹;沈洪;趙崧;張國新;郝波;劉增巍;施瑞華;;黃芪多糖對胃癌細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)第十九次全國脾胃病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2007年

10 劉文超;任軍;張學(xué)庸;劉智廣;張曉楠;;防御素對胃癌細(xì)胞殺傷的體外實(shí)驗(yàn)研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2000年

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1 記者 陸葉清;發(fā)現(xiàn)抑制胃癌細(xì)胞的重要基因[N];上海科技報(bào);2010年

2 衣曉峰　喬蕤琳 記者 趙宇清;抑制胃癌細(xì)胞生長研究有新發(fā)現(xiàn)[N];黑龍江日報(bào);2010年

3 記者 衣曉峰　通訊員 喬蕤琳;維生素E衍生物能抑制胃癌細(xì)胞生長[N];健康報(bào);2010年

4 王振嶺;我國抑制胃癌細(xì)胞生長研究有重要發(fā)現(xiàn)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2002年

5 王振嶺;抗癌藥抑制胃癌細(xì)胞生長研究獲重要發(fā)現(xiàn)[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2002年

6 王振嶺;7種抗癌藥體外抑制胃癌細(xì)胞的研究有新發(fā)現(xiàn)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

7 張中橋;胃癌細(xì)胞MDR機(jī)制研究取得新進(jìn)展[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

8 吳一福 蘇玉軍;白藜蘆醇可誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞脫落凋亡[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

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1 李雙玲;IGF-1通過抑制Fox01核保留促進(jìn)胃癌細(xì)胞生長機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2015年

2 巨大維;白細(xì)胞介素8在胃癌細(xì)胞侵襲中的作用及消痰散結(jié)方的干預(yù)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

3 董召剛;瘦素對胃癌細(xì)胞侵襲和遷移的影響及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2013年

4 蔡愛珍;乙酰肝素酶調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞功能及其基因表達(dá)譜變化研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

5 宋舟;Sonic hedgehog信號通路在干樣胃癌細(xì)胞中的作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

6 李明;兩個(gè)新胃癌細(xì)胞表面分子標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)及鑒定[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

7 劉天舒;骨橋蛋白對胃癌細(xì)胞生長、侵襲以及對化療藥物敏感性的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

8 趙貴君;溶血磷脂酸對胃癌細(xì)胞的增殖遷移作用及其信號通路[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2012年

9 趙立杰;小白菊內(nèi)酯對胃癌細(xì)胞增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

10 何婷婷;高低分化的胃癌細(xì)胞內(nèi)高爾基體的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

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1 林光錟;CyclinA/CDK2介導(dǎo)BAG3 Ser291位點(diǎn)的磷酸化并影響胃癌細(xì)胞的增殖和凋亡[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 蔡洙哲;p12-LOX對胃癌細(xì)胞MKN-28的增殖和遷移的影響[D];延邊大學(xué);2015年

3 李龍;Her-2高表達(dá)對胃癌細(xì)胞侵襲、遷移的影響[D];長江大學(xué);2015年

4 趙婷婷;GPIbα對胃癌細(xì)胞粘附、遷移和侵襲能力的影響及其機(jī)制的初步探討[D];蘭州大學(xué);2015年

5 謝瑞霞;盤狀結(jié)構(gòu)域受體1調(diào)控上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃癌侵襲轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的研究[D];蘭州大學(xué);2015年

6 王東倉;NM23-H2通過抑制Wnt/β-catenin信號通路抑制胃癌細(xì)胞的侵襲遷移[D];蘭州大學(xué);2015年

7 朱瑞雪;NDRG2基因?qū)ξ赴┘?xì)胞惡性表型的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

8 董凱楠;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對胃癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

9 單爭爭;二甲雙胍在IL-6誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞EMT中的作用[D];鄭州大學(xué);2015年

10 田莉;NM23-H2通過誘導(dǎo)自噬抑制胃癌細(xì)胞EMT的發(fā)生[D];蘭州大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：二甲雙胍在IL-6誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞EMT中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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