本文關(guān)鍵詞：PRMT2對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的影響及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶.2(protein.arginine.methyltransferase.2,PRMT2)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231侵襲與遷移的影響及可能的機(jī)制。方法:將構(gòu)建好的真核表達(dá)載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至MDA-MB-231細(xì)胞,Western Blot檢測EMT相關(guān)蛋白的表達(dá),觀察PRMT2對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的影響;建立PRMT2高表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞系MDA-MB-231-PRMT2,顯微鏡觀察PRMT2高表達(dá)后細(xì)胞形態(tài)的變化,Transwell及劃痕實(shí)驗(yàn)檢測PRMT2高表達(dá)對(duì)細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響,Western Blot檢測EMT相關(guān)蛋白的表達(dá),進(jìn)一步驗(yàn)證和分析PRMT2對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的影響;蛋白質(zhì)芯片技術(shù)檢測PRMT2影響細(xì)胞的可能信號(hào)通路,Western Blot檢測通路相關(guān)蛋白的表達(dá),初步探討PRMT2影響乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的機(jī)制。結(jié)果:1.Western Blot結(jié)果顯示PRMT2瞬時(shí)高表達(dá)后E-cadherin的表達(dá)水平下調(diào)(p0.05),Slug和Vimentin的表達(dá)水平上調(diào)(p0.05);PRMT2瞬時(shí)低表達(dá)后E-cadherin的表達(dá)水平上調(diào)(p0.05),Slug和Vimentin的表達(dá)水平下調(diào)(p0.05)。2.PRMT2穩(wěn)定高表達(dá)后,顯微鏡觀察到明顯的形態(tài)變化,Transwell實(shí)驗(yàn)表明四環(huán)素誘導(dǎo)組細(xì)胞侵襲率較無四環(huán)素誘導(dǎo)組增加(p0.001),劃痕實(shí)驗(yàn)顯示細(xì)胞遷移率無明顯改變(p0.05),對(duì)EMT相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響均與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的結(jié)果一致。3.蛋白質(zhì)芯片結(jié)果提示W(wǎng)nt/β-catenin可能為PRMT2影響細(xì)胞侵襲與遷移的信號(hào)通路,且磷酸化GSK-3β(Ser9)表達(dá)上調(diào)(p0.05),磷酸化β-catenin表達(dá)下調(diào)(p0.05)。結(jié)論:1.PRMT2促進(jìn)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞EMT形成。2.PRMT2促進(jìn)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲。3.PRMT2通過調(diào)控磷酸化β-catenin的表達(dá)而影響乳腺癌MDAMB-231細(xì)胞侵襲與遷移。
【關(guān)鍵詞】：乳腺癌細(xì)胞 蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2 侵襲 遷移
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-13
• 第1章 引言13-15
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料15-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)載體15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞15
• 2.3 實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 2.4 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備16-17
• 2.5 主要試劑的配制17-21
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法21-29
• 3.1 細(xì)胞培養(yǎng)及處理21
• 3.2 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染21-23
• 3.3 Western blot23-25
• 3.4 細(xì)胞形態(tài)觀察及圖像采集25
• 3.5 Transwell及劃痕實(shí)驗(yàn)25-26
• 3.6 蛋白質(zhì)芯片26-27
• 3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析27-29
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-37
• 4.1 PRMT2瞬時(shí)高表達(dá)及低表達(dá)對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的影響29-31
• 4.2 PRMT2穩(wěn)定高表達(dá)對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的影響31-35
• 4.3 PRMT2穩(wěn)定高表達(dá)后影響乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞侵襲與遷移的機(jī)制研究35-37
• 第5章 討論37-41
• 第6章 實(shí)驗(yàn)結(jié)論41-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 綜述47-57
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 科研成果57-58
• 致謝58

【共引文獻(xiàn)】

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄭芳霞;CD137L在非小細(xì)胞肺癌增殖、遷移、侵襲中的作用及機(jī)制[D];山東大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：483498