TLR4對口腔鱗癌細胞增殖及細胞因子分泌的影響
發(fā)布時間:2017-06-07 02:13
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【摘要】:目的檢測Toll樣受體(TLRs)在人口腔鱗癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)Tca8113細胞株中的表達情況,研究TLR4對人口腔鱗癌Tca8113細胞株增殖和細胞因子分泌的影響,并探討其作用機制,為口腔鱗癌的免疫治療提供實驗依據。方法1、分別利用熒光定量PCR和流式細胞術檢測口腔鱗癌Tca8113細胞中TLRs m RNA和蛋白的表達情況;2、10μg/ml LPS刺激口腔鱗癌Tca8113細胞,分別在30 min、2 h、16 h,用熒光定量PCR和流式細胞術檢測TLR4 m RNA和蛋白的表達變化;3、不同濃度的LPS刺激口腔鱗癌Tca8113細胞24 h、48 h、72 h,用四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測LPS對口腔鱗癌Tca8113細胞增殖能力的影響;4、10μg/ml LPS刺激口腔鱗癌Tca8113細胞30 min、2 h、16 h,用Western blot法檢測LPS對口腔鱗癌Tca8113細胞中核因子-κB(NF-κB)信號通路的影響;5、10μg/ml LPS刺激口腔鱗癌Tca8113細胞16 h,用ELISA法檢測刺激前后IL-6、IL-8的分泌情況。結果1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR9在人口腔鱗癌Tca8113細胞中均有表達;TLR3、TLR4、TLR7、TLR9表達相對較高,TLR2、TLR5表達相對較低。2、人口腔鱗癌Tca8113細胞中TLR4 m RNA和蛋白水平在LPS的刺激下表達上調。3、MTT檢測結果顯示,1μg/ml和10μg/ml的LPS能夠明顯促進Tca8113細胞增殖,與未刺激組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。用2μg/ml anti-TLR4單克隆抗體預處理細胞30 min,再加入10μg/ml的LPS孵育72 h,細胞增殖受到明顯抑制(P0.05)。4、LPS能夠活化口腔鱗癌Tca8113細胞中的NF-κB信號通路。5、ELISA檢測結果顯示,LPS濃度為1μg/ml和10μg/ml時,明顯促進的Tca8113細胞分泌IL-6(P0.05)。僅當LPS濃度為10μg/ml時,能觀察到IL-8分泌增加(P0.05)。結論1、LPS可上調TLR4在口腔鱗癌Tca8113細胞中的表達。2、激活TLR4可促進口腔鱗癌Tca8113細胞增殖。3、激活TLR4能夠活化口腔鱗癌Tca8113細胞中的NF-κB信號通路,促進IL-6、IL-8的分泌。
【關鍵詞】:TLR4 LPS 口腔鱗狀細胞癌 IL-6 IL-8
【學位授予單位】:錦州醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R739.85
【目錄】:
- 中文論著摘要4-6
- 英文論著摘要6-8
- 英文縮略語表8-9
- 前言9-10
- 材料與方法10-16
- 實驗結果16-23
- 討論23-24
- 結論24-26
- 本研究創(chuàng)新性的自我評價26-27
- 參考文獻27-32
- 文獻綜述32-41
- 參考文獻36-41
- 在校期間科研成績41-42
- 致謝42-43
- 個人簡介43-44
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2 保森竹,孫[?[?,翁巧鳳,陳永賢;341例口腔鱗癌病例臨床分析[J];青海醫(yī)藥雜志;2001年07期
3 張雷,唐f展,
本文編號:427992
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