發(fā)布時間：2024-05-09 01:53

　　隨著生存環(huán)境的不斷惡化,重大流行病毒爆發(fā)和癌癥發(fā)病率的不斷提高,給社會造成巨大的恐慌與經濟損失。由于病毒侵染與癌癥發(fā)病機制尚不清楚,相關藥物開發(fā)相對滯后,迫切需要發(fā)展一種有效的病毒研究工具來揭示病毒侵染機制,并研究新型的腫瘤治療手段,突破癌癥治療的瓶頸。近年來,基于代謝工程的生物正交靶向技術憑借其無損、高效、特異的靶向標記能力,已廣泛應用于生物體的活體標記、示蹤及腫瘤靶向性治療等方面,并不斷在拓寬納米生物醫(yī)學研究的應用領域。本文即以典型的囊膜病毒(假型流感病毒,H5N1p)與非囊膜病毒(腸道病毒,EV71)為研究對象,針對病毒侵染過程中的關鍵事件,通過細胞代謝工程與生物正交化學建立一種普適性的病毒體內原位標記技術,將其用于捕獲病毒并追蹤其體內的動態(tài)侵染行為。同時,本研究基于T細胞糖代謝工程與生物正交靶向技術,開發(fā)一種安全、高效的T細胞病毒轉導技術,為臨床CAR-T細胞的制備提供了新思路。主要研究內容包括以下三個方面:1.假型流感病毒H5N1p的疊氮化脂類代謝修飾與活體原位生物正交熒光標記。(1)利用細胞脂類代謝將疊氮-膽堿衍生物(AE-Cho)嵌合到細胞膜中,子代病毒出芽時囊膜表面即可...

【文章頁數】：141 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.2生物發(fā)光成像（Bioluminescenceimaging）動態(tài)示蹤IAV-Luc病毒在小鼠體內的感染過程（Nat.Comm.,2013）

目前，研究病毒在體內的侵染行為方法主要通過在不同驗動物,獲得間斷的實驗數據，其操作非常繁瑣，結果穩(wěn)定性差術是在不傷害實驗動物的前提下對同一實驗對象進行實時、連續(xù)析，是一種理想的可視化研究策略。目前在活體熒光成像研究中光（Bioluminescence）、熒光報告基因（熒光蛋白、....

圖1.3細胞糖類代謝標記在成像示蹤與靶向藥物遞送方面的應用（Molecules,2013）

圖1.3細胞糖類代謝標記在成像示蹤與靶向藥物遞送方面的應用（Molecules,2013）。.1.4生物正交化學在標記領域中的應用生物正交化學(BioorthogonalChemistry)，這個概念最早由美國斯坦福大CarolynR.Bertozzi教授在200....

圖1.4基于生物代謝工程的生物正交標記原理（Nat.Chem.Biol.,2005）

圖1.4基于生物代謝工程的生物正交標記原理（Nat.Chem.Biol.,2005）。鑒于病毒外部結構成分，如病毒囊膜、衣殼均來源于宿主細胞的糖類、蛋白與脂類成分，因此，病毒在進行復制與組裝時，可通過細胞代謝工程將攜帶報告基團的代謝衍生物嵌入到病毒的衣殼、囊膜等結構中....

圖1.5主要化學報告基團間的生物正交化學反應

圖1.5主要化學報告基團間的生物正交化學反應。上述研究，本研究可以利用細胞代謝修飾與生物正交反應所異、穩(wěn)定等諸多優(yōu)勢，合成并制備具有生物正交報告基團的細展針對宿主體內活病毒的熒光標記與示蹤技術，實現對宿主體記與可視化研究，從而揭示病毒粒子在細胞與活體內的侵染行（圖1.6）。....

本文編號：3968141