背景:原發(fā)性肝癌是全球最常見的癌癥之一,早期肝癌主要且有效的根治方法是手術(shù)切除及肝臟移植,但臨床發(fā)現(xiàn)肝癌時多處于晚期,手術(shù)治療已不適用,化療往往是中晚期肝癌最常見的治療手段;然而當前化療藥物的耐藥性卻是影響化療療效的主要問題,因此積極的探索耐藥機制及找尋新的治療靶點尤為重要。LRH-1屬于核受體第五家族,目前已有報道證實LRH-1在人體多個器官中表達,本課題組及其他課題組均已證實LRH-1通過多個通路影響肝癌的發(fā)生及發(fā)展,因此進一步探討LRH-1是否參與臨床常規(guī)化療藥物奧沙利鉑對肝癌治療過程中耐藥機制的研究,有利于為臨床實際耐藥問題提供理論基礎(chǔ)。目的:通過在兩種肝癌細胞系中敲除及過表達LRH-1,分析兩種肝癌細胞系在奧沙利鉑中的生長及耐藥基因表達情況,初步探討LRH-1調(diào)節(jié)肝癌對奧沙利鉑耐藥的作用機制。方法:1、通過TALENs技術(shù)敲除LRH-1以及慢病毒介導的方式構(gòu)建過表達LRH-1細胞系,篩選并獲得穩(wěn)定細胞株模型HepG2LRH-1-以及Huh7LRH-1+,并用PCR或Western Blot方法進行驗證。2、通過qPCR法檢測不同奧沙利鉑濃度下,肝癌細胞株的LRH-1及MDR1...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料與方法
    2.1 材料
    2.2 方法
    2.3 統(tǒng)計分析
第3章 結(jié)果
    3.1 沉默表達細胞系HepG2^LRH-1-及過表達細胞系Huh7^LRH-1+的驗證
    3.2 不同濃度奧沙利鉑培養(yǎng)下,肝癌細胞中LRH-1及MDR1的表達結(jié)果
    3.3 沉默表達和過表達LRH-1不同細胞系的增殖能力
    3.4 沉默以及過表達LRH-1對不同細胞系的半抑制濃度(IC50)的影響
    3.5 敲除LRH-1能夠降低細胞耐藥蛋白(MDR1)的表達
    3.6 過表達LRH-1能夠增加細胞耐藥蛋白(MDR1)的表達
第4章 討論
第5章 全文總結(jié)
參考文獻
綜述
    參考文獻
中英文縮略表
攻讀學位期間成果
致謝



本文編號：3840971