癌癥是一種非�？膳碌募膊�,對(duì)人類(lèi)的生活和社會(huì)的發(fā)展都有一定的影響,每年都會(huì)有數(shù)百萬(wàn)人因此失去生命,且逐年遞增。為了提高癌癥患者的生存率,對(duì)癌癥的早期診斷尤為重要。因此,研究人員將重心放在了對(duì)腫瘤標(biāo)志物的超靈敏早期檢測(cè),從而診斷腫瘤細(xì)胞上。然而,由于假陰性或陽(yáng)性結(jié)果的存在,僅檢測(cè)一種腫瘤標(biāo)志物容易引起誤診,所以同時(shí)檢測(cè)兩種或兩種以上的標(biāo)志物就具有十分重要的意義。近年來(lái),越來(lái)越多的研究著眼于對(duì)腫瘤細(xì)胞的早期檢測(cè),并開(kāi)發(fā)創(chuàng)新了許多強(qiáng)大的監(jiān)測(cè)平臺(tái),簡(jiǎn)化分析過(guò)程,提高靈敏度、保持穩(wěn)定性和廣泛適用性等方面的基本優(yōu)勢(shì)。例如實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR),酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)微陣列分析(microarray analysis),熒光分析(fluorescence analysis)等,但這些方法需要復(fù)雜的操作程序、昂貴的儀器和專(zhuān)業(yè)的操作人員。目前,電化學(xué)分析(electrochemical analysis)中的分子信標(biāo)技術(shù)因其快速且便攜,儀器簡(jiǎn)單,成本...

【文章頁(yè)數(shù)】：139 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
內(nèi)容摘要
Abstract
試劑列表
儀器列表
第一章 緒論
    1 癌癥及其診斷
        1.1 癌癥
        1.2 癌癥的診斷
        1.3 腫瘤標(biāo)志物在癌癥檢測(cè)中的意義
    2 分子信標(biāo)及其對(duì)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的研究
        2.1 分子信標(biāo)
        2.2 新型電化學(xué)活性開(kāi)關(guān)分子信標(biāo)的應(yīng)用
        2.3 分子信標(biāo)對(duì)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的研究
    3 信號(hào)擴(kuò)增技術(shù)的研究
        3.1.鏈置換擴(kuò)增技術(shù)
        3.2.滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)
        3.3.酶的信號(hào)擴(kuò)增技術(shù)
        3.4.無(wú)酶信號(hào)擴(kuò)增技術(shù)
    4 多目標(biāo)/多信號(hào)生物傳感器的研究
        4.1.多目標(biāo)生物傳感器
        4.2.多信號(hào)生物傳感器
    5 本論文的研究意義和主要內(nèi)容
    參考文獻(xiàn)
第二章 分裂引物連接誘導(dǎo)分子信標(biāo)構(gòu)象的改變用于高特異性檢測(cè)肝癌細(xì)胞的相關(guān)mRNA:TK1(胸苷激酶1)和c-myc(原癌基因)
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 電化學(xué)檢測(cè)體系
        2.2.2 DNA的合成
        2.2.3 二茂鐵分子信標(biāo)的合成
        2.2.4 連接反應(yīng)
        2.2.5 凝膠電泳
        2.2.6 檢測(cè)HepG2和HL-7702細(xì)胞中TK1和c-myc
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 TK1和c-myc mRNA檢測(cè)的傳感機(jī)理
        2.3.2 分裂引物連接誘導(dǎo)分子信標(biāo)構(gòu)象改變的可行性
        2.3.3 條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
        2.3.4 Tk1和c-myc的定量檢測(cè)
        2.3.5 傳感器的特異性
        2.3.6 對(duì)肝癌細(xì)胞(HepG2)和正常肝細(xì)胞(HL-7702)的檢測(cè)
    2.4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三章 分裂引物連接觸發(fā)8-17酶輔助級(jí)聯(lián)滾環(huán)擴(kuò)增用于高效特異性檢測(cè)肝癌細(xì)胞的相關(guān)mRNA:胸苷激酶1(TK1)和原癌基因(c-myc)
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 電化學(xué)檢測(cè)體系
        3.2.2 DNA的合成
        3.2.3 二茂鐵分子信標(biāo)的合成
        3.2.4 連接反應(yīng)
        3.2.5 滾換擴(kuò)增反應(yīng)
        3.2.6 凝膠電泳
        3.2.7 檢測(cè)HepG2和HL-7702細(xì)胞中TK1和c-myc
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 TK1和c-myc mRNA檢測(cè)的傳感機(jī)理
        3.3.2 分裂引物連接誘導(dǎo)的8-17 DNAzyme輔助級(jí)聯(lián)滾環(huán)擴(kuò)增的可行性
        3.3.3 條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 Tk1和c-myc的定量檢測(cè)
        3.3.5 傳感器的特異性
        3.3.6 對(duì)肝癌細(xì)胞(HepG2)和正常肝細(xì)胞(HL-7702)的檢測(cè)
    3.4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第四章 基于分裂引物連接觸發(fā)催化發(fā)夾自組裝反應(yīng)的雙信號(hào)電化學(xué)傳感器對(duì)癌細(xì)胞的檢測(cè)
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 電化學(xué)檢測(cè)體系
        4.2.2 DNA的合成
        4.2.3 二茂鐵分子信標(biāo)的合成
        4.2.4 連接反應(yīng)
        4.2.5 催化發(fā)夾白組裝反應(yīng)
        4.2.6 凝膠電泳
        4.2.7 檢測(cè)HepG2,HL-7702,MCF-7和MCF-10A細(xì)胞中的mRNA
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 TK1和c-myc mRNA檢測(cè)的傳感機(jī)理
        4.3.2 分裂引物連接誘導(dǎo)催化發(fā)夾自組裝反應(yīng)的可行性
        4.3.3 條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
        4.3.4 兩組癌癥標(biāo)志物的定量檢測(cè)
        4.3.5 傳感器的特異性
        4.3.6 對(duì)四種細(xì)胞實(shí)樣的檢測(cè)
        4.3.7 建立對(duì)于四種細(xì)胞檢測(cè)的邏輯門(mén)
    4.4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第五章 基于空間阻滯和分子信標(biāo)構(gòu)象改變用于高特異性檢測(cè)肝癌細(xì)胞的相關(guān)mRNA: TK1(胸苷激酶1)和c-myc(原癌基因)
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 電化學(xué)檢測(cè)體系
        5.2.2 DNA的合成
        5.2.3 二茂鐵分子信標(biāo)的合成
        5.2.4 電極的組裝
        5.2.5 檢測(cè)HepG2和HL-7702細(xì)胞中TK1和c-myc
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 TK1和c-myc mRNA檢測(cè)的傳感機(jī)理
        5.3.2 基于空間阻滯和分子信標(biāo)構(gòu)象改變誘導(dǎo)電化學(xué)信號(hào)改變的可行性
        5.3.3 條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
        5.3.4 Tk1和c-myc的定量檢測(cè)
        5.3.5 傳感器的特異性
        5.3.6 對(duì)肝癌細(xì)胞(HepG2)和正常肝細(xì)胞(HL-7702)的檢測(cè)
    5.4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
附錄 博士期間科研成果
致謝



本文編號(hào)：3824049