本研究旨在明確新城疫病毒(NDV)溶瘤作用是否依賴其復(fù)制水平,并改進NDV溶瘤機制研究模型。以NDV疫苗株LaSota感染人腫瘤細胞系HCT116、A549和人非腫瘤細胞系HEK293T為研究模型;RT-qPCR檢測NDV在各細胞系的基因組復(fù)制水平;Western blot檢測NDV在各細胞系的蛋白表達水平;利用流式細胞術(shù)檢測NDV感染對各細胞系的細胞周期和細胞凋亡的影響。結(jié)果表明,NDV在三個細胞系內(nèi)的基因組復(fù)制水平和蛋白表達水平?jīng)]有顯著差異,但對三個細胞系的溶瘤作用存在明顯差異;進一步流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn),NDV感染能誘發(fā)HEK293T和HCT116的細胞周期發(fā)生G1期停滯,但對A549的細胞周期沒有明顯影響;此外,NDV感染24 h后,A549細胞以早期凋亡為主,而HCT116細胞以壞死/晚期細胞凋亡為主。NDV的溶瘤作用并不依賴于其復(fù)制水平,而且NDV對不同類型腫瘤細胞的溶瘤作用存在不同機制。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 引物序列
    1.3 質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的構(gòu)建
    1.4 RT-qPCR
    1.5 檢測病毒基因組復(fù)制
    1.6 檢測病毒蛋白的表達水平
    1.7 顯微鏡觀察
    1.8 細胞凋亡檢測
    1.9 細胞周期檢測
    1.10 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 NDV在不同類型人細胞系中基因組復(fù)制水平的比較
    2.2 NDV在不同類型人細胞系中蛋白表達水平的比較
    2.3 NDV對不同類型人細胞系殺傷效果的比較
    2.4 NDV對各細胞系細胞周期的影響
    2.5 NDV感染細胞凋亡情況檢測
3 討 論
4 結(jié) 論



本文編號：3817310