目的:肺癌是呼吸系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率和死亡率在各系統(tǒng)腫瘤中均局首位。目前的研究認為,肺癌的發(fā)生不僅與細胞中異常啟動的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等有關(guān)的信號通路有關(guān),更與端粒酶活性的異常升高有著千絲萬縷的聯(lián)系。因此,全面理解肺癌細胞中端粒酶活性的調(diào)控機制,可為開發(fā)全新的腫瘤靶向藥物提供方向,為臨床診療提供新的思路。人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是一種小DNA病毒,大量流行病學證據(jù)表明人類多種良惡性疾病與HPV的感染有著密不可分的關(guān)系,而長期持續(xù)性的高危型HPV感染可能誘發(fā)宮頸癌。HPV16是常見的高危型HPV,E6/E7是HPV16的兩個主要致病癌蛋白,目前認為HPV16與非小細胞肺癌(NSCLC)的發(fā)生密切相關(guān),然而E6/E7在NSCLC的發(fā)生中作用機理尚不清楚。本人之前的研究發(fā)現(xiàn)E6/E7能夠引起抑癌基因LKB1的失活,而且LKB1能夠通過下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子SP1的轉(zhuǎn)錄活性而降低端粒酶中hTERT的表達。雖然我們已經(jīng)找到了E6/E7促進癌癥發(fā)生可能的路徑,而隱藏在此現(xiàn)象中的具體調(diào)控機制尚不清楚。我們課題組前期研究結(jié)果表明肺癌細胞中端粒酶的RNA模板hTE...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
2 材料和方法
    2.1 患者信息和標本
    2.2 細胞系
    2.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和小干擾RNA處理
    2.4 蛋白質(zhì)免疫印跡
    2.5 Quantitativereal-timePCR
    2.6 熒光素酶報告基因
    2.7 染色質(zhì)免疫共沉淀
    2.8 熒光原位雜交
    2.9 統(tǒng)計分析
3 結(jié)果
    3.1 E6/E7,LKB1,SP1,hTERC的mRNA表達和hTERC的異型擴增在臨床患者良惡性支氣管刷檢細胞中均有顯著差異
    3.2 肺癌患者支氣管刷檢細胞中SP1,hTERC的mRNA和hTERC的異型擴增與E6/E7mRNA呈正相關(guān),而LKB1與E6/E7,SP1,hTERC的mRNA和hTERC的異型擴增呈負相關(guān)
    3.3 E6/E7負向調(diào)控LKB1的表達并正向調(diào)控SP1和hTERC的表達和SP1的轉(zhuǎn)錄活性
    3.4 LKB1負向調(diào)控SP1、hTERC表達以及SP1的轉(zhuǎn)錄活性,并磷酸化SP1
    3.5 LKB1對SP1的磷酸化作用能夠以時間依賴的方式被E6/E7解除
    3.6 SP1通過與hTERC啟動子直接結(jié)合上調(diào)hTERC的轉(zhuǎn)錄
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3781091