胃癌是消化系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤,發(fā)病率和死亡率在所有惡性腫瘤中也均位居前列,對(duì)患者身心造成巨大威脅的同時(shí)也消耗了極大的衛(wèi)生資源,為社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)。我國(guó)是胃癌高發(fā)區(qū),據(jù)統(tǒng)計(jì),胃癌每年新發(fā)病例和死亡病例占世界總數(shù)的40%左右。近年來(lái),胃癌的總體發(fā)病率和死亡率較前有所下降,但早發(fā)性胃癌和家族性胃癌(Familial Gastric Cancer,FGC)的發(fā)病率仍逐年攀升。大部分胃癌為散發(fā)病例,約10%表現(xiàn)為家族聚集性,家族性胃癌具有發(fā)病年齡早、預(yù)后差、腫瘤分化差等特點(diǎn),目前仍缺乏特異和靈敏的診斷方法。近年來(lái)分子生物學(xué)和遺傳學(xué)發(fā)展迅速,越來(lái)越多學(xué)者認(rèn)為在家族性胃癌的發(fā)病過(guò)程中遺傳因素發(fā)揮了重要作用。因此,探索家族性胃癌的發(fā)病因素,并研究其在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用和機(jī)制,有著重要的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)意義。受制于家族性胃癌家系尋找困難等因素,我國(guó)對(duì)家族性胃癌方面的研究起步較晚,除E-鈣粘素蛋白(CDH1)外,缺乏其他易感基因的相關(guān)報(bào)道,本研究前期在全國(guó)范圍內(nèi)收集了符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的16個(gè)家族性胃癌家系,進(jìn)行高通量全外顯子測(cè)序后,在其中6個(gè)家系發(fā)現(xiàn)了位于X染色體的腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)體2(adenine nu...

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一章 前言
    1.1 胃癌的流行病學(xué)分析
    1.2 胃癌病因及發(fā)病機(jī)制
        1.2.1 環(huán)境因素
        1.2.2 飲食因素
        1.2.3 幽門(mén)螺桿菌感染
        1.2.4 慢性胃病病史
        1.2.5 遺傳因素
    1.3 胃癌的病理分型
    1.4 胃癌的分期
    1.5 胃癌的診斷、治療及預(yù)后
    1.6 家族性胃癌概述
    1.7 胃癌易感基因研究現(xiàn)狀
        1.7.1 CDH1基因
        1.7.2 P53基因
        1.7.3 其他基因
    1.8 我國(guó)家族性胃癌研究現(xiàn)狀
    1.9 ANT2基因簡(jiǎn)介
    1.10 研究目的及意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 家族性胃癌家系來(lái)源
        2.1.2 細(xì)胞系來(lái)源
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要試劑
        2.1.5 胃癌組織及組織芯片來(lái)源
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 敲減及過(guò)表達(dá)載體的構(gòu)建及質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化
        2.2.2 質(zhì)粒提取(小提中量)
        2.2.3 DNA樣品瓊脂糖凝膠電泳
        2.2.4 DNA片段回收
        2.2.5 PCR擴(kuò)增目的cDNA序列
        2.2.6 DNA的限制性內(nèi)切酶消化
        2.2.7 Trizol法提取RNA
        2.2.8 RNA的反轉(zhuǎn)錄
        2.2.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.2.10 蛋白提取實(shí)驗(yàn)
        2.2.11 免疫印跡Western blot
        2.2.12 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        2.2.13 Transwell實(shí)驗(yàn)
        2.2.14 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.2.15 細(xì)胞平板克隆實(shí)驗(yàn)
        2.2.16 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.17 免疫組化實(shí)驗(yàn)
        2.2.18 裸鼠皮下移植瘤注射
        2.2.19 數(shù)據(jù)庫(kù)分析與ANT2相關(guān)的信號(hào)通路與蛋白
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 對(duì)所收集的家族性胃癌家系樣品進(jìn)行外顯子高通置測(cè)序及分析
    3.2 胃癌組織中ANT2的表達(dá)情況
    3.3 ANT2穩(wěn)定敲減胃癌細(xì)胞株及過(guò)表達(dá)細(xì)胞株的構(gòu)建及鑒定
    3.4 敲減及過(guò)表達(dá)ANT2對(duì)胃癌細(xì)胞體外克隆形成能力的影響
    3.5 敲減及過(guò)表達(dá)ANT2對(duì)胃癌細(xì)胞體外遷移能力的影響
    3.6 敲減及過(guò)表達(dá)ANT2對(duì)胃癌細(xì)胞體外增殖能力的影響
    3.7 ANT2在組織水平的表達(dá)情況
    3.8 ANT2的表達(dá)水平與預(yù)后相關(guān)性
    3.9 敲減ANT2對(duì)胃癌細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力的影響
    3.10 GSEA分析ANT2與凋亡相關(guān)信號(hào)通路相關(guān)性
    3.11數(shù)據(jù)庫(kù)分析與ANT2共作用的基因
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3766318