目的 成功沉默結(jié)腸癌SW480細(xì)胞中神經(jīng)纖毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)后,對 TGF-β1 誘導(dǎo)的結(jié)腸癌上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithlial mesenchymal transition,EMT)以及對結(jié)腸癌增殖、遷移的影響。方法 培養(yǎng)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞至對數(shù)生長期后,對細(xì)胞進(jìn)行如下處理:1分別用Ong/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL濃度的轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)刺激結(jié)腸癌SW480細(xì)胞24h及48h誘導(dǎo)其EMT過程后,采用CCK-8實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞的增殖情況;并用Western blot檢測E-鈣粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表達(dá)量的變化。2用lip2000將siRNA轉(zhuǎn)染至SW480細(xì)胞中,根據(jù)轉(zhuǎn)染物質(zhì)的不同,實(shí)驗(yàn)分為了三組,即空白對照組,無意義序列組(轉(zhuǎn)染siRNA-NControl)和轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染siRNA-NRP-1)。轉(zhuǎn)染后常規(guī)培養(yǎng)48h,分別通過實(shí)時熒光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和 Western blot檢測每組細(xì)胞中 NRP-1的mRNA和...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
    1.1 材料與方法
        1.1.1 相關(guān)材料
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.2.1 TGF-β1對細(xì)胞增殖情況的影響
        1.2.2 檢測E-cadherin、Vimentin的蛋白表達(dá)量驗(yàn)證SW480細(xì)胞是否發(fā)生EMT
        1.2.3 轉(zhuǎn)染SiRNA-NRP-1后,NRP-1的mRNA相對表達(dá)量
        1.2.4 轉(zhuǎn)染siRNA-NRP-1后,NRP-1的蛋白含量
        1.2.5 檢測NRP-1表達(dá)量的不同對TGF-β1誘導(dǎo)EMT的影響
        1.2.6 沉默NRP-1對TGF-β1刺激細(xì)胞增殖的影響
        1.2.7 沉默NRP-1對TGF-β1刺激細(xì)胞遷移能力的影響
    1.3 討論
        1.3.1 NRP-1與腫瘤
        1.3.2 siRNA沉默結(jié)腸癌SW480細(xì)胞株中NRP-1的高表達(dá)
        1.3.3 TGF-β1對結(jié)腸癌SW480細(xì)胞增殖的作用及誘導(dǎo)其發(fā)生EMT過程
        1.3.4 沉默NRP-1對TGF-β1誘導(dǎo)的結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的影響。
    1.4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
第2章 綜述 NRPs調(diào)控腫瘤上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展
    2.1 NRPs概述
    2.2 NRPs與TGF-β
        2.2.1 TGF-β概述
        2.2.2 TGF-β與腫瘤
        2.2.3 NRPs對TGF-β通路的調(diào)節(jié)
    2.3 NRPs與EMT
        2.3.1 EMT概述
        2.3.2 EMT與腫瘤
        2.3.3 NR-Ps對EMT的調(diào)節(jié)
    2.4 展望
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間研究成果



本文編號：3754564