目的:膀胱癌是人類常見的惡性腫瘤之一,在世界范圍內(nèi),其在男性中的發(fā)生率位居第6,女性則為第16[1,2],常見的95%以上的膀胱癌為尿路移行上皮腫瘤。因其多中心和多器官的發(fā)病特點(diǎn),該病在治療后易復(fù)發(fā)。雖然國內(nèi)外專家學(xué)者對膀胱癌進(jìn)行了廣泛的臨床和實(shí)驗(yàn)研究,仍尚不清楚其發(fā)病機(jī)理,可以確定的是膀胱癌的發(fā)生與發(fā)展是多因素作用的結(jié)果。當(dāng)前階段仍很難對腫瘤患者做到療效監(jiān)測以及預(yù)后評價。目前有研究發(fā)現(xiàn)人體的血鋅以及尿鋅的含量與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),以上的研究結(jié)果表明鋅的代謝在膀胱癌患者中可能存在異常,肌層浸潤性膀胱癌患者的尿鋅含量要高于非肌層浸潤性膀胱癌患者以及健康人群,研究同時發(fā)現(xiàn)腫瘤組織內(nèi)的鋅含量在膀胱癌發(fā)生的早期已經(jīng)發(fā)生了下降,我們據(jù)此推測在膀胱癌的發(fā)生發(fā)展過程中,鋅的轉(zhuǎn)運(yùn)可能起到了關(guān)鍵的作用。人體內(nèi)有200多種酶具有鋅指結(jié)構(gòu),同時鋅也是轉(zhuǎn)錄因子保持活性并參與細(xì)胞結(jié)構(gòu)組成及催化活性的關(guān)鍵元素,是人體必須的微量營養(yǎng)元素之一[3,4]。諸多研究表明發(fā)育遲緩、DNA合成受損、免疫功能缺陷、皮肌炎等疾病均與鋅缺乏有關(guān),當(dāng)前研究進(jìn)一步顯示在缺氧、血管生成、細(xì)胞增殖和腫瘤轉(zhuǎn)移中,鋅相關(guān)的一些酶扮有重要...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 ZNT1在膀胱癌組織中的表達(dá)及臨床意義
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與主要試劑、儀器
            2.1.1 標(biāo)本
            2.1.2 主要試劑及溶液配制
            2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 免疫組化(SP法)
            2.2.2 Real-Time RTPCR
            2.2.3 Western Blot
    3 統(tǒng)計方法
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 免疫組化
        4.2 Real Time RT-PCR
        4.3 Western Blot
    5 討論
    6 結(jié)論
第二部分 siRNA干擾ZNT1表達(dá)對膀胱癌BIU87細(xì)胞株生物學(xué)行為的影響
    1 前言
    2 材料、儀器和方法
        2.1 材料
            2.1.1 細(xì)胞株
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 D-Hank's液配置
            2.2.2 0.25%胰酶配制
            2.2.3 細(xì)胞凍存液配制
            2.2.4 HEPES液配制
            2.2.5 MTT溶液的配制
            2.2.6 細(xì)胞培養(yǎng),傳代和凍存
            2.2.7 免疫熒光方法檢測膀胱癌細(xì)胞系中ZNT1蛋白的亞細(xì)胞定位情況
            2.2.8 瞬時轉(zhuǎn)染
            2.2.9 MTT實(shí)驗(yàn)
            2.2.10 侵襲實(shí)驗(yàn)
            2.2.11 劃痕實(shí)驗(yàn)
    3 統(tǒng)計方法
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 ZNT1蛋白在不同膀胱細(xì)胞系中的表達(dá)情況
            4.1.1 免疫熒光方法檢測不同膀胱細(xì)胞系中ZNT1蛋白的定位情況
            4.1.2 ZNT1 mRNA在膀胱細(xì)胞SV-HUC-Ⅰ、BIU87,T24,5637中的表達(dá)情況
            4.1.3 ZNT1蛋白在4種膀胱細(xì)胞系中的表達(dá)情況
        4.2 使用三組ZnT1 siRNA序列轉(zhuǎn)染24小時后檢測其對BIU87細(xì)胞ZNT1mRNA抑制情況
        4.3 轉(zhuǎn)染48小時后檢測ZNT1蛋白的表達(dá)
        4.4 MTT檢測ZNT1-siRNA對細(xì)胞增殖的影響
        4.5 侵襲實(shí)驗(yàn)
        4.6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
    5 討論
    6 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡介



本文編號：3740203