腫瘤組織中的腫瘤細胞并不是均一的群體,其中存在一小部分細胞,這一小部分的細胞具有自我更新并產(chǎn)生異質(zhì)性腫瘤的能力,表現(xiàn)出干細胞樣特性,被稱為腫瘤干細胞(cancer stem cell,CSC)[1]。腫瘤干細胞的發(fā)現(xiàn)為闡明腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和耐藥提供了理論依據(jù)[2]。許多研究提示腫瘤干細胞可能是腫瘤發(fā)生、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和耐藥的根源,探索腫瘤干細胞的作用和調(diào)控機制,有望為開發(fā)靶向腫瘤干細胞的新的治療手段奠定基礎(chǔ)。微小RNA(micoRNA,miRNA)是一類非編碼的小分子RNA,長度約為19-22個核苷酸的小分子[3]。miRNA由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的大小約為70-90nt的單鏈前體經(jīng)過Dicer酶進行剪切加工生成,其通過與靶基因的3’非編碼區(qū)(3’untranslate region,3’UTR)堿性互補配對相結(jié)合,可以特異性抑制或降解靶基因的mRNA,進而抑制靶基因的翻譯,調(diào)節(jié)靶基因的表達[3,4]。越來越多的證據(jù)表明,micoRNA在許多腫瘤中表達異常,能夠參與腫瘤的形成、生長、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和耐藥等,其中一些miRNAs與肝癌干細胞特性維持有著密切的聯(lián)系[5,6]。因此,尋找在肝癌干細胞和肝癌非...

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
個人簡歷
摘要
Abstract
前言
第一部分 篩選及驗證肝癌干細胞中表達顯著下調(diào)的miRNA
    前言
    材料與方法
        1. 實驗材料
        2. 實驗方法
    實驗結(jié)果
        1.TCGA數(shù)據(jù)庫篩選肝癌組織中表達下調(diào)顯著的miRNA
        2. 篩選肝癌干細胞中中表達下調(diào)顯著特異的miRNA
        3.驗證miR-486-5p在肝癌和肝癌細胞中的表達情況
    討論
第二部分 miR4865p對肝癌干細胞生物學特性的影響
    前言
    材料和方法
        1. 實驗材料
        2. 實驗方法
    實驗結(jié)果
        1 miR4865p抑制肝癌干細胞的增殖和成瘤能力
        2. miR4865p抑制肝癌干細胞的干性
        3. miR4865p體外抑制肝癌干細胞的侵襲和遷移
        4.miR-486-5p對肝癌細胞耐藥性的影響
第三部分 miR4865p靶基因的篩選和鑒定
    前言
    材料與方法
        1. 材料
        2. 實驗方法
    實驗結(jié)果
        1. miR4865p靶基因篩選
        2. 熒光定量RT-PCR篩選mi R4865P的靶基因
        3. 在肝癌組織中驗證SIRT1是miR4865p的靶基因
        4. 雙熒光素酶報告實驗證實SIRT1是miR4865p的靶基因
    討論
第四部分 SIRT1對肝癌干細胞生物學特性的影響
    前言
    材料與方法
        1. 實驗材料
        2. 實驗方法
    實驗結(jié)果
        1. SIRT1慢病毒干涉載體的構(gòu)建
        2. 構(gòu)建穩(wěn)定RNA干涉SIRT1（shSIRT1）的肝癌細胞系
        3.SIRT1對肝癌細胞增殖能力的影響
        4. SIRT1對肝癌細胞耐藥性的影響
    討論
全文小結(jié)
Reference
附錄
縮略詞表
綜述 MicoRNA調(diào)節(jié)肝癌干細胞的功能及機制的研究
    參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間的成果
論文全文



本文編號：3737522