發(fā)布時(shí)間：2017-05-16 16:02

  本文關(guān)鍵詞：極性蛋白Par3對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討Par3蛋白在宮頸癌中的表達(dá)以及對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖與轉(zhuǎn)移的作用。方法:通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Par3蛋白在89例宮頸鱗癌中的表達(dá)水平。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)PARD3在HPV陽(yáng)性宮頸癌SiHa細(xì)胞和HPV陰性宮頸癌C33A細(xì)胞中的本底表達(dá)。采用基因過(guò)表達(dá)和RNA干擾技術(shù)轉(zhuǎn)染宮頸癌細(xì)胞系。運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)PARD3 mRNA和Par3蛋白水平變化。Transwell小室體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)SiHa細(xì)胞侵襲、遷移能力的影響。流失細(xì)胞術(shù)研究其對(duì)SiHa細(xì)胞周期及凋亡的影響。結(jié)果:實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)PARD3基因在SiHa和C33A細(xì)胞中的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。免疫組化實(shí)驗(yàn)顯示Par3蛋白在正常宮頸組織強(qiáng)表達(dá),宮頸鱗癌組織中弱表達(dá)。QRT-PCR和Western blot檢測(cè)提示SiHa細(xì)胞轉(zhuǎn)染基因PARD3過(guò)表達(dá)質(zhì)粒后mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著增高,PARD3siRNA干擾SiHa細(xì)胞后PARD3mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著降低;Par3蛋白低表達(dá)誘導(dǎo)了EMT相關(guān)基因(N-cadherin,E-cadherin andβ-Catenin)的表達(dá)變化;Transwell小室體外實(shí)驗(yàn)表明Par3過(guò)表達(dá)組細(xì)胞侵襲、遷移能力明顯低于對(duì)照組(P0.05),而低表達(dá)組(干擾組)細(xì)胞侵襲、遷移能力明顯高于對(duì)照組(P0.01);流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示與空白對(duì)照相比,PARD3基因被干擾后細(xì)胞被阻滯在S期,干擾組細(xì)胞凋亡率明顯降低(P0.01);然而,上調(diào)PARD3的表達(dá)后細(xì)胞被阻滯在G0/G1期,過(guò)表達(dá)組細(xì)胞凋亡率明顯增高(P0.01)。結(jié)論:Par3在宮頸癌中的缺失表達(dá)促進(jìn)了癌細(xì)胞的增殖、侵襲及遷移的能力。
【關(guān)鍵詞】：宮頸癌 Par3蛋白 遷移 侵襲
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-9
• 摘要9-10
• ABSTRACT10-11
• 前言11-13
• 內(nèi)容與方法13-28
• 1. 研究對(duì)象13-16
• 1.1 組織標(biāo)本及細(xì)胞系來(lái)源13
• 1.2 干擾序列13
• 1.3 主要試劑13-14
• 1.4 相關(guān)試劑配制14-15
• 1.5 主要儀器15-16
• 2. 研究?jī)?nèi)容與方法16-27
• 2.1 免疫組織化學(xué)方法16-18
• 2.2 Si Ha細(xì)胞的培養(yǎng)18-19
• 2.3 PARD3 si RNA細(xì)胞轉(zhuǎn)染19
• 2.4 PARD3基因過(guò)表達(dá)質(zhì)粒的制備及轉(zhuǎn)染19-21
• 2.5 轉(zhuǎn)染后PARD3蛋白的Western blotting檢測(cè)21-24
• 2.6 RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染后PARD3基因m RNA的表達(dá)24
• 2.7 流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)24-25
• 2.8 流式細(xì)胞周期檢測(cè)25
• 2.9 Transwell小室體外遷移能力的測(cè)定25-26
• 2.10 Transwell小室體外侵襲能力的測(cè)定26
• 2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析26-27
• 3.技術(shù)路線圖27-28
• 結(jié)果28-45
• 討論45-49
• 小結(jié)49-50
• 致謝50-51
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 綜述55-63
• 參考文獻(xiàn)59-63
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文63-64
• 導(dǎo)師評(píng)閱表64

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4 馮理達(dá);錢(qián)菊卿;陳淑琴;張s，

本文編號(hào)：371260