皮膚癌是全球常見癌癥之一,美國(guó)2010年皮膚癌的確診人數(shù)超過(guò)200萬(wàn)。皮膚癌在中國(guó)的發(fā)病率較低,但由于臭氧層的破壞等環(huán)境因素的影響,皮膚癌在我國(guó)的發(fā)病率逐年上升。目前我國(guó)公共衛(wèi)生系統(tǒng)尚未建立有效預(yù)防皮膚癌的體系,中國(guó)未來(lái)將面臨巨大的健康挑戰(zhàn)。治療皮膚癌的方案有手術(shù)治療、放療、化療及靶向藥物等。靶向MAPK家族的BRAF和MEK抑制劑是晚期皮膚癌的重要靶向藥物,但是由此而生的耐藥問(wèn)題使得開發(fā)新的靶點(diǎn)及靶向藥物越發(fā)急切。TOPK為MAPKK家族的激酶,能夠誘導(dǎo)皮膚癌的發(fā)生發(fā)展,為新興的抗癌靶點(diǎn)。3-去氧蘇木查爾酮（3-DSC）是中國(guó)藥用植物蘇木的提取物,我們的前期研究發(fā)現(xiàn)該化合物靶向TOPK抑制結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展,但該化合物在皮膚癌中作用尚不明確。本文主要研究3-DSC預(yù)防紫外線造成的皮膚損傷及抑制皮膚癌的作用機(jī)制,為皮膚癌的靶向藥物研發(fā)提供新的思路。給予3-DSC處理組和對(duì)照組SKH1無(wú)毛小鼠急性紫外線照射,小鼠背部局部皮膚經(jīng)3-DSC處理后可預(yù)防紫外照射引起的皮膚增厚,降低p-TOPK及其相關(guān)信號(hào)通路蛋白的表達(dá)量。3-DSC 可以抑制皮膚癌細(xì)胞（SK-MEL-2、SK-MEL-28、A3... 

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
引言
1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 3-去氧蘇木查爾酮3-DSC
    1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
    1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.4 主要儀器
    1.5 主要試劑
    1.6 主要試劑盒
    1.7 實(shí)驗(yàn)耗材
    1.8 主要試劑的配置
2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線圖
    2.2 皮膚癌細(xì)胞的復(fù)蘇
    2.3 皮膚癌細(xì)胞的培養(yǎng)
    2.4 細(xì)胞凍存
    2.5 蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
    2.6 TOPK激酶實(shí)驗(yàn)
    2.7 蛋白下拉實(shí)驗(yàn)
    2.8 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
    2.9 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
    2.10 軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)
    2.11 細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)
    2.12 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
    2.13 細(xì)胞敲低實(shí)驗(yàn)
    2.14 TOPK蛋白信號(hào)通路表達(dá)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
    2.15 動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)
    2.16 統(tǒng)計(jì)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 3-DSC抑制TOPK激酶活性
    3.2 蛋白下拉實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證3-DSC可與TOPK結(jié)合
    3.3 TOPK在皮膚癌細(xì)胞系SK-MEL-2,SK-MEL-28,A375和A431中高表達(dá)
    3.4 3-DSC對(duì)正常皮膚細(xì)胞的毒性作用
    3.5 3-DSC抑制皮膚癌細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖
    3.6 3-DSC阻滯EGF誘導(dǎo)的皮膚正常細(xì)胞軟瓊脂克隆形成
    3.7 3-DSC抑制細(xì)胞軟瓊脂克隆形成
    3.8 3-DSC阻滯皮膚癌細(xì)胞周期于G2/M期
    3.9 3-DSC誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
    3.10 敲低TOPK抑制皮膚癌細(xì)胞增殖
    3.11 3-DSC下調(diào)TOPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白表達(dá)量
    3.12 3-DSC在動(dòng)物模型中預(yù)防皮膚損傷和抑制皮膚癌增殖的作用
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 TOPK在癌癥中的研究進(jìn)展
    1 TOPK的生物學(xué)功能
    2 TOPK是多種腫瘤的抗癌靶點(diǎn)
    3 TOPK的信號(hào)通路
    4 TOPK抑制劑的開發(fā)
    5 TOPK與腫瘤的預(yù)后關(guān)系
    6 結(jié)語(yǔ)
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝



本文編號(hào)：3683705