為了探討LncRNA AL022324.3在肝癌發(fā)展中的作用,我們進行了一系列實驗研究。首先,我們進行了實時定量PCR實驗,用來測量轉(zhuǎn)染后的目的基因的沉默效率。結(jié)果表明,在轉(zhuǎn)染后48小時目的基因沉默效率最高,沉默效率達到75%。接下來我們進行了MTT實驗研究沉默目的基因?qū)Ω伟┘毎鲋车挠绊?結(jié)果證明,沉默AL022324.3基因后,細胞的OD值與基因未沉默組相比明顯降低,表明細胞增殖能力明顯受到抑制,尤其是轉(zhuǎn)染后第4天,細胞增殖抑制效果最為明顯�？偟腛D值降低了25%以上。為了研究目的基因?qū)δ[瘤細胞劃痕愈合能力的影響程度,我們進行了細胞劃痕實驗,實驗結(jié)果表明沉默AL022324.3基因的細胞劃痕愈合距離明顯短于基因非沉默組。接下來為了研究目的基因?qū)毎w移與侵襲能力的影響,在沉默AL022324.3基因后,觀察到細胞遷移與侵襲能力均受到一定程度的抑制。裸鼠同種異體肝癌移植瘤形成實驗表明,沉默AL022324.3基因后,與目的基因非沉默組相比,裸鼠體內(nèi)移植瘤的增殖受到一定程度的抑制。我們從裸鼠移植瘤組織與HepG2、MHCC-97H肝癌細胞中提取RNA,并進行實時定量PCR實驗,結(jié)果表明... 

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
背景
Abstract
Background
實驗一 沉默LncAL022324.3對肝癌細胞增殖的影響情況
    1.實驗目的
    2.主要試劑和配置方法
    3.細胞培養(yǎng)
    4.統(tǒng)計學分析
    5.實驗結(jié)果
實驗二 沉默LncAL022324.3對肝癌細胞遷移及侵襲的影響情況
    1.實驗目的
    2.主要試劑與材料
    3.實驗方法
    4.統(tǒng)計學分析
    5.實驗結(jié)果
實驗三 沉默LncAL022324.3對裸鼠肝癌移植瘤體積變化的影響情況
    1.實驗目的
    2.細胞培養(yǎng)
    3.實驗方法
    4.統(tǒng)計學分析
    5.實驗結(jié)果
實驗四 沉默LncAL022324.3對EMT相關基因及蛋白表達影響情況
    1.實驗目的
    2.主要試劑和配置方法
    3.蛋白提取
    4.蛋白變性
    5.蛋白電泳
    6.轉(zhuǎn)膜
    7.膜封閉與抗體孵育
    8.統(tǒng)計學分析
    9.實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
References
綜述
    References
附錄
    主要儀器設備
    主要英文縮略表
致謝



本文編號：3670401