白血病是世界范圍內(nèi)常見血液系統(tǒng)的惡性克隆性疾�。℉M）,尤其是在青少年中的發(fā)病率和致死率較高,目前大部分仍無法治愈,臨床化療放療或者藥物誘導(dǎo)并不能完全使患者康復(fù)痊愈率低。白血病是由于造血細(xì)胞的某一系列或者是某一白細(xì)胞前體細(xì)胞失去分化成熟能力,分化成熟受到阻礙,正常凋亡途徑發(fā)生障礙,以至于出現(xiàn)了大量的異常分化的細(xì)胞,正常成熟的血液細(xì)胞減少,一系列臨床癥狀出現(xiàn),誘發(fā)白血病。因此,抑制白血病細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞的分化與凋亡是治療白血病的有效途徑。目前,用于血液惡性腫瘤的治療有著非常多的治療方案,如前沿技術(shù)干細(xì)胞治療、誘導(dǎo)分化藥物的應(yīng)用、免疫生物學(xué)療法等等。但是這些治療方法在發(fā)揮抗白血病的同時也存在諸多的不足之處:臨床上的放療和化療雖然能使白血病緩解和暫時控制,但它缺乏特異性,在殺傷白血病細(xì)胞的同時,正常細(xì)胞也受到損傷。骨髓移植得到一定范圍的肯定和推廣,在白血病的治療中起到很大的作用,但容易出現(xiàn)異體排斥和殘留白血病細(xì)胞復(fù)發(fā)。對與血液惡性腫瘤的發(fā)生有關(guān)的某些關(guān)鍵基因的研究,已經(jīng)成為根治血液腫瘤的著力點。腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因nm23-H1是Steeg等用消減雜交法分離鑒定出來的,該基因是nm23基因家族... 

【文章來源】：濟(jì)南大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要符號表
前言
材料與方法
    1.1 實驗材料和器材設(shè)備
        1.1.1 實驗材料
        1.1.2 主要儀器設(shè)備
    1.2 白血病細(xì)胞的培養(yǎng)
    1.3 實驗?zāi)Ｐ偷慕?br>        1.3.1 細(xì)胞增殖抑制實驗CCK8
        1.3.2 瑞吉染色觀察細(xì)胞形態(tài)
        1.3.3 表面分化抗原用流式細(xì)胞術(shù)檢測
        1.3.4 建立模型
    1.4 ATRA誘導(dǎo)HL60與PMA誘導(dǎo)THP-1 后基因的檢測
        1.4.1 RT-PCR檢測誘導(dǎo)后HL-60細(xì)胞和THP-1 細(xì)胞中基因表達(dá)的變化
        1.4.2 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
        1.4.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
        1.4.4 1%瓊脂糖凝膠電泳
    1.5 蛋白質(zhì)免疫印跡分析
        1.5.1 制備蛋白樣品
        1.5.2 SDS-PAGE電泳
        1.5.3 灌膠與上樣
        1.5.4 轉(zhuǎn)膜
        1.5.5 免疫反應(yīng)
        1.5.6 化學(xué)發(fā)光顯色
    1.6 用ELISA檢測G-CSF的表達(dá)水平
結(jié)果
    2.1 CCK8實驗檢測藥物對細(xì)胞增殖的影響
    2.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化
    2.3 細(xì)胞表面分化抗原變化
    2.4 nm23-H1、c-Myc、G-CSF mRNA水平的表達(dá)變化
    2.5 nm23-H1、c-Myc基因在蛋白水平上的表達(dá)變化
    2.6 用ELISA檢測G-CSF的表達(dá)水平
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]nm23-H1過表達(dá)對人白血病細(xì)胞系HL60細(xì)胞周期和分化的影響[J]. 袁茵,魯欣,張美英,黃樹林,王一飛.  腫瘤防治研究. 2007(03)
[2]RNAi技術(shù)沉默K562細(xì)胞中c-myc基因的初步研究[J]. 岳楓,馬文麗,宋艷斌,石嶸,張寶,鄭文嶺.  第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2005(06)



本文編號：3644538