目的:探究熱休克蛋白90（Heat-Shock Proteins 90）的抑制劑17-丙烯氨基-去甲氧基-格爾德霉素（17-AAG）對甲狀腺未分化癌（anaplastic thyroid carcinoma ATC）的侵襲和轉(zhuǎn)移的影響并探討HSP90與低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）及其下游侵襲相關(guān)蛋白在ATC細(xì)胞中的分子機(jī)制。方法:通過細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒方法檢測17-AAG（0,250,500,1000,2000,4000nM）分別在12h,24h,48h在與甲狀腺未分化癌（ATC）細(xì)胞系8305c和8505c作用后對存活的影響,然后通過Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測17-AAG對ATC細(xì)胞處理后轉(zhuǎn)移和侵襲能力的影響,并通過蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)檢測HIF-1α及侵襲相關(guān)蛋白MMP₂,VEGF,E-cadherin的表達(dá)水平的影響,用免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)評估HSP90與HIF-1α潛在的機(jī)制。通過Lipofectamine 2000方法轉(zhuǎn)染質(zhì)粒于未分化癌細(xì)胞系8503c和8505c中,觀察經(jīng)過17-AAG處理后的ATC細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力的變化,進(jìn)一步通過Western blot... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室實(shí)驗(yàn)不同濃度17-AAG處理后ATC細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移受到抑制3.317-AAG對ATC細(xì)胞中侵襲相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文9圖3Westernblot實(shí)驗(yàn)不同濃度17-AAG對ATC細(xì)胞MMP2,E-cadherin，VEGF表達(dá)的影響3.417-AAG對HSP90和HIF-1α表達(dá)的影響Westernblot實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示，經(jīng)過17-AAG處理的細(xì)胞，HSP90的表達(dá)量略有上升。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，HIF-1α參與對遷移和侵襲蛋白MMP2，VEGF和E-cadherin的調(diào)控，并且在其他腫瘤中，HSP90與HIF-1α也應(yīng)當(dāng)存在著相互關(guān)系。在本研究中，經(jīng)過藥物17-AAG處理過的細(xì)胞中，HIF-1α的表達(dá)被顯著下調(diào)，并存在濃度依賴性（見圖4）。圖4Westernblot實(shí)驗(yàn)檢測不同17-AAG對HSP90和HIF-1α表達(dá)

Westernblot實(shí)驗(yàn)檢測不同17-AAG對HSP90和HIF-1α表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3628212