目的:慢性粒細胞白血病（Chronic myeloid leukemia,CML）通過酪氨酸激酶抑制劑（tyrosine kinases inhibition,TKI）的規(guī)范治療已使其療效取得了空前的提升。對CML患者BCR/ABL（P210）表達量的定期監(jiān)測是保證療效的前提,目前臨床上廣泛采用的熒光定量PCR（Real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR）技術(shù)對此監(jiān)測有檢測敏感度、內(nèi)參基因影響等方面的局限性。微滴式數(shù)字PCR（Droplet Digital PCR,dd-PCR）技術(shù)是一種檢測敏感度更高,可實現(xiàn)目的基因絕對定量的一種新方法。本研究旨在建立一種dd-PCR檢測CML患者BCR/ABL（P210）微小殘留病的方法,實現(xiàn)對腫瘤負荷更深層次的監(jiān)測,判斷療效,指導(dǎo)臨床個體化治療。方法:1.在細胞水平,用dd-PCR和RT-qPCR同時檢測K562細胞與正常人單個核細胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）依次梯度稀釋的細胞懸液,明確兩種方法的檢測極限以及兩者結(jié)果的相關(guān)性。2.在患者外周血水... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

K562細胞與PBMC梯度稀釋細胞懸液RT-qPCR結(jié)果

圖 2-2 梯度稀釋細胞懸液 dd-PCR 結(jié)果:A02-A08 依次為 1:1，1:10，1:102，1:103,1:104，1:105，1:106細胞懸液結(jié)果；A01 為陽性對照，A09 為陰性對照結(jié)果（A 圖中藍色微滴為陽性微滴，灰色微滴則為陰性微滴；C 圖中藍色柱狀圖代表陽性微滴數(shù)，綠色柱狀圖代表生成的總微滴數(shù)）。11

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 dd-PCR 與 RT-qPCR 結(jié)果的相關(guān)性與轉(zhuǎn)換方程的臨床驗證.1 dd-PCR 與 RT-qPCR 結(jié)果的相關(guān)性通過用兩種方法對細胞懸液檢測結(jié)果分析，得到如表 2-1 的結(jié)果，其中 dd-RT-qPCR 的最終結(jié)果用均數(shù)±標準差表示，經(jīng)相關(guān)性分析得兩種方法結(jié)果的R2≥0.99。對 dd-PCR 和 RT-qPCR 的結(jié)果進行回歸分析，可得兩種結(jié)果之間相方程：Y=33.148X1.222（Y：dd-PCR 結(jié)果；X：RT-qPCR 結(jié)果）（圖 2-3）。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3574610