目的揭示DTX3L在多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）細(xì)胞粘附過(guò)程中的作用機(jī)制,并探索DTX3L在MM細(xì)胞對(duì)蛋白酶體抑制劑（Proteasome inhibitor,PI）硼替佐米（Bortezomib,Bort）的耐藥過(guò)程中發(fā)揮的作用。為提高多發(fā)性骨髓瘤治療療效、改善預(yù)后方面提供新的理論依據(jù)。方法1.使用無(wú)血清培養(yǎng)液養(yǎng)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞72h后,換用含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞48h。細(xì)胞增殖過(guò)程中,蛋白免疫印跡檢測(cè)DTX3L,增殖相關(guān)蛋白PCNA,CDK2及細(xì)胞周期蛋白cyclinE的表達(dá)。同時(shí),通過(guò)流式檢測(cè)細(xì)胞周期的改變。2.在骨髓瘤細(xì)胞中干擾DTX3L的表達(dá),Western Blot檢測(cè)增殖相關(guān)蛋白PCNA,CDK2及細(xì)胞周期蛋白cyclinE的表達(dá),CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力,流式檢測(cè)細(xì)胞周期的分布。3.將骨髓瘤細(xì)胞RPMI 8226和NCI-H929與骨髓基質(zhì)細(xì)胞HS-5或者纖連蛋白（Fibronection,FN）共培養(yǎng)構(gòu)建粘附模型。Western Blot檢測(cè)DTX3L在骨髓瘤細(xì)胞懸浮及黏附兩種狀態(tài)下的表達(dá)情況;在骨髓瘤細(xì)胞中干擾DTX3L的表達(dá),鈣黃綠素實(shí)... 

【文章來(lái)源】：南通大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

DTX3L在多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增殖過(guò)程中的表達(dá)

南通大學(xué)碩士學(xué)位論文3.1.2 多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增殖過(guò)程中細(xì)胞周期的改變?yōu)榱诉M(jìn)一步驗(yàn)證DTX3L是否參與骨髓瘤細(xì)胞增殖的過(guò)程，通過(guò)對(duì)上述圖1中的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞流式周期檢測(cè)，分析多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增殖過(guò)程中細(xì)胞周期的改變。如圖2所示，RPMI 8226細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)液培養(yǎng)72h后，導(dǎo)致細(xì)胞在G1期阻滯。用完全培養(yǎng)液培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞后，細(xì)胞從G1期重新進(jìn)入S期。G1期的減少及S期的增加與圖1中PCNA，CDK2及cyclinE表達(dá)的改變相一致。結(jié)合圖1與圖2的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，DTX3L在促進(jìn)MM細(xì)胞增殖中起重要作用。

DTX3L 被干擾后細(xì)胞活力的變化，同時(shí)用 Western Blot 檢測(cè)增殖相關(guān)蛋白PCNA，CDK2 及 cyclinE 表達(dá)的改變。如圖 4 所示，干擾 DTX3L 的表達(dá)后，細(xì)胞活力顯著降低，并且增殖相關(guān)蛋白 PCNA，CDK2 及 cyclinE 表達(dá)也明顯降低。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，干擾 DTX3L 的表達(dá)能抑制多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的增殖。

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]抑制蛋白酶體干擾骨髓瘤細(xì)胞未折迭蛋白反應(yīng)與自噬[D]. 高瑛.第四軍醫(yī)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3562994