目的:肺癌是我國發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。根據(jù)病理分型,肺癌可分為非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）和小細(xì)胞肺癌（SCLC）。肺癌的發(fā)生與吸煙、職業(yè)暴露、空氣污染及肺部感染性疾病有關(guān),但確切的機(jī)制尚不明確。因此,了解肺癌的發(fā)病機(jī)制對(duì)于疾病的早期診斷具有重要意義。研究表明在肺癌發(fā)生發(fā)展過程中,肺癌細(xì)胞對(duì)于氧化應(yīng)激呈現(xiàn)出“兩面性”,一方面在肺癌發(fā)生的早期,氧化應(yīng)激可以誘導(dǎo)肺癌的發(fā)生,促進(jìn)細(xì)胞的增殖;另一方面在肺癌的進(jìn)展期,肺癌細(xì)胞則表現(xiàn)出很強(qiáng)的抗氧化應(yīng)激能力,進(jìn)而抵抗細(xì)胞凋亡及對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性。因此探討肺癌細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激刺激的抵抗效應(yīng)有助于了解肺癌的惡性進(jìn)程以及對(duì)放化療抵抗的機(jī)制。前期工作中發(fā)現(xiàn),肺癌細(xì)胞高表達(dá)S100家族蛋白——S100A16,且與肺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移入腦后的生存活力相關(guān)。S100家族蛋白是應(yīng)激蛋白,有文獻(xiàn)報(bào)道其參與急性及慢性炎癥應(yīng)激反應(yīng),而且與諸多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。作為S100家族的一員,有關(guān)S100A16的研究是有限的,有研究表明,在乳腺癌細(xì)胞中,S100A16可以上調(diào)Notch1,ZEB1,ZEB2的表達(dá),誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞發(fā)生上皮細(xì)胞間質(zhì)化改變,促進(jìn)乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同腫瘤細(xì)胞株中S100A16表達(dá)水平檢測(cè)

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文15圖3.2細(xì)胞在正常以及氧化刺激時(shí)S100A16蛋白的表達(dá)水平3.3過氧化氫刺激作用下S100A16在肺癌細(xì)胞內(nèi)分布的改變前述實(shí)驗(yàn)表明H2O2處理后的A549細(xì)胞和NCI-H446細(xì)胞內(nèi)S100A16的表達(dá)水平明顯增高，提示其為應(yīng)激反應(yīng)蛋白。隨后，我們利用免疫熒光的方法在激光共聚焦顯微鏡下觀察S100A16在細(xì)胞內(nèi)分布的情況。如圖3.3結(jié)果顯示，給予H2O2處理的A549細(xì)胞內(nèi)S100A16由細(xì)胞質(zhì)內(nèi)彌散分布轉(zhuǎn)變?yōu)橄蚣?xì)胞核內(nèi)富集，并呈現(xiàn)核仁區(qū)分布的現(xiàn)象。為進(jìn)一步驗(yàn)證前述現(xiàn)象，我們采用了細(xì)胞不同組分分離的方法，分離純化了H2O2處理前后的A549細(xì)胞及NCI-H446細(xì)胞的不同組分，即細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核組分，利用westernblot的方法分析不同組分中S100A16的表達(dá)情況，圖3.3（2）結(jié)果表明，給予H2O2處理后，肺癌細(xì)胞內(nèi)的S100A16在細(xì)胞質(zhì)中的水平減少，而在細(xì)胞核組分中含量增加，同免疫熒光的實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈現(xiàn)一致性。圖3.3（1）H2O2刺激后免疫熒光觀察S100A16在肺癌細(xì)胞內(nèi)分布情況圖為A549細(xì)胞轉(zhuǎn)染了pEGFP-N1質(zhì)粒和pEGFP-N1/S100A16質(zhì)粒后72小時(shí)給與H2O2刺激，于激光共聚焦顯微鏡下觀察S100A16分布情況。

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文15圖3.2細(xì)胞在正常以及氧化刺激時(shí)S100A16蛋白的表達(dá)水平3.3過氧化氫刺激作用下S100A16在肺癌細(xì)胞內(nèi)分布的改變前述實(shí)驗(yàn)表明H2O2處理后的A549細(xì)胞和NCI-H446細(xì)胞內(nèi)S100A16的表達(dá)水平明顯增高，提示其為應(yīng)激反應(yīng)蛋白。隨后，我們利用免疫熒光的方法在激光共聚焦顯微鏡下觀察S100A16在細(xì)胞內(nèi)分布的情況。如圖3.3結(jié)果顯示，給予H2O2處理的A549細(xì)胞內(nèi)S100A16由細(xì)胞質(zhì)內(nèi)彌散分布轉(zhuǎn)變?yōu)橄蚣?xì)胞核內(nèi)富集，并呈現(xiàn)核仁區(qū)分布的現(xiàn)象。為進(jìn)一步驗(yàn)證前述現(xiàn)象，我們采用了細(xì)胞不同組分分離的方法，分離純化了H2O2處理前后的A549細(xì)胞及NCI-H446細(xì)胞的不同組分，即細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核組分，利用westernblot的方法分析不同組分中S100A16的表達(dá)情況，圖3.3（2）結(jié)果表明，給予H2O2處理后，肺癌細(xì)胞內(nèi)的S100A16在細(xì)胞質(zhì)中的水平減少，而在細(xì)胞核組分中含量增加，同免疫熒光的實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈現(xiàn)一致性。圖3.3（1）H2O2刺激后免疫熒光觀察S100A16在肺癌細(xì)胞內(nèi)分布情況圖為A549細(xì)胞轉(zhuǎn)染了pEGFP-N1質(zhì)粒和pEGFP-N1/S100A16質(zhì)粒后72小時(shí)給與H2O2刺激，于激光共聚焦顯微鏡下觀察S100A16分布情況。


本文編號(hào)：3502293